【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】
以間硝基苯磷酸鹽 (PNPP)為底物時(shí)可用標(biāo)準(zhǔn)的比色法測(cè)定酶活性,操作簡(jiǎn)單,反應(yīng)時(shí)間短,價(jià)格廉價(jià),但靈敏度低。以黃素腺嘌呤二核苷酸磷酸為底物進(jìn)行比色測(cè)定,其靈敏度增高。 SEAP可催化 D熒光素 O磷酸鹽水解生成 D熒光素,后者又可作為熒光素酶的底物,此即兩步生物發(fā)光法檢測(cè)酶活性的原理。此方法靈敏度高,接近于熒光素酶報(bào)告基因的檢測(cè),還可用一步化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)酶活性。 ? Luciferase reportor(熒光素酶報(bào)告基因 ): 熒光素酶 (luciferase)催化底物熒光素的轉(zhuǎn)化,發(fā)射出光子。 目前較靈敏的檢測(cè)系統(tǒng)為雙熒光素酶檢測(cè)系統(tǒng)螢火蟲(chóng)熒光素酶 (Firefly luciferase)和海腎熒光素酶 (Ranilla luciferase)催化的發(fā)光反應(yīng)。 vectorscontrolGeneralized map of the pathway profiling vectorsThe cisacting enhancer element vector constructs in the pathway profiling systems pTALSEAP/Luc vectors can be used