微工第四章ppt課件(編輯修改稿)
2025-05-26 01:42 本頁面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 有的誘變劑是作用于營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞，就要選對(duì)數(shù)期的細(xì)胞：有的作用于休止期，就可選用孢子。 (二 )處理菌懸液的制備 ? 這一步驟的關(guān)鍵是制備 單細(xì)胞和單孢子 狀態(tài)的 、 活力類似的菌懸液 ， 為此要進(jìn)行合適培養(yǎng)基的培養(yǎng) ， 并要離心 ， 洗滌 ， 過濾 。 因?yàn)? 1）分散狀態(tài)的細(xì)胞可均勻地接觸誘變劑 2）可避免長(zhǎng)出不純的菌落。 帶 玻璃珠 的 三角瓶 內(nèi)，加無菌水 如 紫外線 、 X射線、 ?射線、快中子、超聲波、 微波 等 硫酸二乙酯 (DES)、 亞硝基胍 (NTG)、 亞硝酸 (NA)、氮芥 (NM)、羥胺、 ICR類等 誘變劑 物理誘變劑 化學(xué)誘變劑 (三 )誘變處理 單一誘變劑處理 復(fù)合處理 1）兩種或多種誘變劑先后使用 2）同一誘變劑重復(fù)處理 3）兩種或多種誘變劑同時(shí)使用 菌種 單獨(dú)處理 誘變劑 突變率（ %） 復(fù)合處理 誘變劑 突變率（ %） 土曲霉 紫外線 X射線 紫外線 +X射線 土曲霉 氮芥（ %） 紫外線 不明顯 氮芥 +紫外線 鏈霉菌 紫外線 ?射線 紫外線 +?射線 金色鏈霉菌 二乙烯三胺 硫酸二乙酯 紫外線 二乙烯三胺 +紫外線 硫酸二乙酯 +紫外線 誘變劑的復(fù)合處理及其協(xié)同效應(yīng) 劑 量 ? 對(duì)一般微生物而言，誘變率往往隨誘變劑劑量的增高而增高，但達(dá)到一定程度后，再提高劑量，反而會(huì)使誘變率下降。 ? 目前的處理劑量已從以前采用的死亡率 %降低到7080%，甚至更低的劑量，特別是對(duì)于經(jīng)過一再誘變的高產(chǎn)菌株。 凡既能增加變異幅度，又能促使變異向正變范圍移動(dòng)的劑量就是合適劑量。 (四 )中間培養(yǎng) 由于在發(fā)生了突變尚未表現(xiàn)出來之前 ，有一個(gè)表現(xiàn)延遲的過程 (生理延遲 )， 需 3代以上的繁殖才能將突變性狀表現(xiàn)出來 。 這個(gè)過程對(duì)今后的篩選和獲得穩(wěn)定菌株都是極為重要的 。 方法： 讓變異處理后細(xì)胞在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)幾小時(shí) ， 以讓細(xì)胞的遺傳物質(zhì)復(fù)制 ， 讓細(xì)胞繁殖幾代 ， 以得到純的變異細(xì)胞 。 這樣 ， 隱性的變異就會(huì)顯現(xiàn)出來 。 若不經(jīng)液體培養(yǎng)基的中間培養(yǎng) ， 直接在平皿上分離就會(huì)出現(xiàn)變異和不變異細(xì)胞同時(shí)存在于一個(gè)菌落內(nèi)的可能 ， 形成混雜菌落 ， 以致造成篩
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