植物生物技術(shù)復(fù)習(xí)題(編輯修改稿)
2025-05-21 22:39 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 、脂類和蛋白質(zhì)以及具有特殊化學(xué)性質(zhì)的物質(zhì)，賦予生物新的性狀和功能。如開發(fā)富含β—胡蘿卜素的金色大米，能生產(chǎn)降低膽固醇、高蛋白含量的食品等。植物組織培養(yǎng)室通常怎樣設(shè)置？各室的主要功能是什么？ 植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置 一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室必須具備下列必需的設(shè)施或條件： ①清洗和儲(chǔ)存玻璃器皿、塑料器皿和其他實(shí)驗(yàn)器皿； ②培養(yǎng)基的配制、滅菌和儲(chǔ)存； ③植物材料的無菌操作； ④可控溫度、光照、濕度的條件，以便對(duì)材料進(jìn)行體外培養(yǎng)； ⑤培養(yǎng)物生長發(fā)育過程的顯微觀察。 功能：植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室至少需要有三間相連但相互隔開的房間： 第一間用于玻璃器皿的清洗和儲(chǔ)存，以及培養(yǎng) 基的制備(稱為培養(yǎng)基室或準(zhǔn)備室)， 第二間用于無菌操作(稱為接種室)； 第三間用于放置培養(yǎng)物(稱為培養(yǎng)室)1植物離體操作的關(guān)鍵是什么？ （1）玻璃器皿和用具的清洗 1．培養(yǎng)用品的清洗 2．包裝 （2）滅菌和消毒 1．培養(yǎng)基滅菌 2．器皿和用具滅菌 3．外植體滅菌 4．接種區(qū)滅菌 （3）無菌操作技術(shù) （4）植物組織培養(yǎng)無菌培養(yǎng)的一般步驟1愈傷組織形成的三個(gè)階段及其特征是什么？ 起動(dòng)期、分裂期、形成期 起動(dòng)期：是愈傷組織形成的起點(diǎn)。外植體已分化的活細(xì)胞在外源激素的作用下，通過脫分化起動(dòng)而進(jìn)入分裂狀態(tài)，并開始形成愈傷組織。這時(shí)在外觀上未見明顯變化，但實(shí)際上細(xì)胞內(nèi)一些大分子代謝動(dòng)態(tài)已發(fā)生明顯的改變，細(xì)胞正積極為下一步分裂進(jìn)行準(zhǔn)備。細(xì)胞內(nèi)合成代謝活動(dòng)加強(qiáng)，迅速進(jìn)行蛋白質(zhì)和核酸等物質(zhì)的合成。形成愈傷組織時(shí)的變化，不僅是DNA，而且RNA以及蛋白質(zhì)均表現(xiàn)明顯。 分裂期：分裂期是外植體切口邊緣開始膨大，外層細(xì)胞通過一分為二的方式進(jìn)行分裂，從而形成一團(tuán)具有分生組織狀態(tài)細(xì)胞的過程。在這個(gè)過程中，培養(yǎng)組織的細(xì)胞中RNA及其一些成分隨著細(xì)胞的不斷分裂而開始減少，DNA含量始終保持不變。由于細(xì)胞分裂的速率大大超過了細(xì)胞的生長速率，結(jié)果使每個(gè)細(xì)胞體積顯著減小，鮮重下降，但細(xì)胞的數(shù)目迅速增加。最后細(xì)胞內(nèi)這些成分的積累又和分裂達(dá)到一種協(xié)調(diào)狀態(tài)，細(xì)胞的體積不再減小，內(nèi)無大液泡，細(xì)胞核大，核仁明顯。 形成期：形成期是指外植體的細(xì)胞經(jīng)過誘導(dǎo)、分裂形成了具有無序結(jié)構(gòu)的愈傷組織時(shí)期。這個(gè)時(shí)期特征是細(xì)胞大小不再發(fā)生變化，愈傷組織表層的分裂逐漸減慢和停止，接著內(nèi)部組織細(xì)胞開始分裂，細(xì)胞數(shù)目進(jìn)一步增加。1影響器官和胚狀體發(fā)生的主要因素有哪些？ 根據(jù)起源不同可將器官分化分為兩種發(fā)生方式，一種情況是：器官是由切下的外植體中已存在的器官原基發(fā)育而成的；另一種情況是從外植體脫分化中形成愈傷組織，再在新形成的愈傷組織或經(jīng)繼代培養(yǎng)的愈傷組織上產(chǎn)生一些分生細(xì)胞團(tuán)，隨后由這些分生細(xì)胞團(tuán)分化成不同的器官原基。1單細(xì)胞分離的兩種方法是什么？機(jī)械法和酶解法有什么不同？機(jī)械法和酶解法機(jī)械法：先把葉片輕輕研碎，然后通過過濾和離 心凈化細(xì)胞。優(yōu) 點(diǎn)：①細(xì)胞不會(huì)受到酶傷害。 ②不需質(zhì)壁分離，有利于進(jìn)行生理、生 化研究。 但是，容易傷害細(xì)胞結(jié)構(gòu)，獲得完整細(xì)胞團(tuán)或細(xì)胞數(shù)量極低，不具有普遍性。只有在薄壁組織排列疏松，胞間接觸點(diǎn)很少時(shí)，分離葉肉細(xì)胞才能取得成功。酶解法：用兩種酶：果膠酶、纖維素酶處 理，分離出具有代謝活性的細(xì)胞。作 用：降解中膠層、軟化細(xì)胞壁。所以在 用酶解法分離細(xì)胞的時(shí)候，必須對(duì) 細(xì)胞給于滲透壓保護(hù)。1懸浮培養(yǎng)體系的必備條件是什么？ 一個(gè)成功的懸浮細(xì)胞培養(yǎng)體系必須滿足三個(gè)基本條件： ①懸浮培養(yǎng)物分散性良好，細(xì)胞團(tuán)較??； ②懸浮培養(yǎng)物均一性好，細(xì)胞形狀和細(xì)胞 團(tuán)大小大致相同； ③懸浮培養(yǎng)物生長迅速。1單細(xì)胞培養(yǎng)的幾種方法是什么？請(qǐng)敘述?？醋o(hù)培養(yǎng)法、平板培養(yǎng)法、微室培養(yǎng)法看護(hù)培養(yǎng)法：是把單個(gè)細(xì)胞置于一塊活躍生長的愈傷組織(也稱看護(hù)愈傷組織)上培養(yǎng)，在愈傷組織和培養(yǎng)的細(xì)胞之間，用一片濾紙隔開。平板培養(yǎng)法：將含有游離細(xì)胞和細(xì)胞團(tuán)的懸浮培養(yǎng)物過濾，除去組織塊和大的細(xì)胞團(tuán)，保留游離細(xì)胞和小細(xì)胞團(tuán)。將液體培養(yǎng)基加入610g/L的瓊脂，使其融化，冷卻到35℃時(shí)，將培養(yǎng)基與上述細(xì)胞懸浮培養(yǎng)液等量混合，迅速使之鋪展在培養(yǎng)皿。微室培養(yǎng)法：由懸浮培養(yǎng)物中取出一滴含單細(xì)胞的培養(yǎng)液，置于一張無菌載玻片上，在培養(yǎng)基的四周與之隔一定距離涂上一圈石蠟油，然后在左右兩側(cè)各加一滴石蠟油并分別置一張蓋玻片，第三張蓋玻片架在前兩個(gè)蓋玻片之間，這樣一滴含有單細(xì)胞的培養(yǎng)液就被覆蓋于微室之中，最后把筑有微室的整張載玻片置于培養(yǎng)皿中進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)細(xì)胞團(tuán)長到一定大小時(shí)，將其轉(zhuǎn)移到新鮮的液體或半固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)。1 原生質(zhì)體定義原生質(zhì)體為去掉細(xì)胞壁的裸露細(xì)胞。1原生質(zhì)體培養(yǎng)概念意義指將植物細(xì)胞游離成原生質(zhì)體，在適宜的培養(yǎng)條件下，依據(jù)細(xì)胞的全能性使其再生細(xì)胞壁，進(jìn)行細(xì)胞的分裂分化，并發(fā)育成完整植株的過程。意義：單細(xì)胞無性系的建立 遺傳轉(zhuǎn)化的良好受體 多種基礎(chǔ)研究的實(shí)驗(yàn)體系 體細(xì)胞雜種的形成1原生質(zhì)體分離方法
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