植物生物技術復習題(編輯修改稿)
2025-05-21 22:39 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 、脂類和蛋白質(zhì)以及具有特殊化學性質(zhì)的物質(zhì)，賦予生物新的性狀和功能。如開發(fā)富含β—胡蘿卜素的金色大米，能生產(chǎn)降低膽固醇、高蛋白含量的食品等。植物組織培養(yǎng)室通常怎樣設置？各室的主要功能是什么？ 植物組織培養(yǎng)實驗室的設置 一個標準的植物組織培養(yǎng)實驗室必須具備下列必需的設施或條件： ①清洗和儲存玻璃器皿、塑料器皿和其他實驗器皿； ②培養(yǎng)基的配制、滅菌和儲存； ③植物材料的無菌操作； ④可控溫度、光照、濕度的條件，以便對材料進行體外培養(yǎng)； ⑤培養(yǎng)物生長發(fā)育過程的顯微觀察。 功能：植物組織培養(yǎng)實驗室至少需要有三間相連但相互隔開的房間： 第一間用于玻璃器皿的清洗和儲存，以及培養(yǎng) 基的制備(稱為培養(yǎng)基室或準備室)， 第二間用于無菌操作(稱為接種室)； 第三間用于放置培養(yǎng)物(稱為培養(yǎng)室)1植物離體操作的關鍵是什么？ （1）玻璃器皿和用具的清洗 1．培養(yǎng)用品的清洗 2．包裝 （2）滅菌和消毒 1．培養(yǎng)基滅菌 2．器皿和用具滅菌 3．外植體滅菌 4．接種區(qū)滅菌 （3）無菌操作技術 （4）植物組織培養(yǎng)無菌培養(yǎng)的一般步驟1愈傷組織形成的三個階段及其特征是什么？ 起動期、分裂期、形成期 起動期：是愈傷組織形成的起點。外植體已分化的活細胞在外源激素的作用下，通過脫分化起動而進入分裂狀態(tài)，并開始形成愈傷組織。這時在外觀上未見明顯變化，但實際上細胞內(nèi)一些大分子代謝動態(tài)已發(fā)生明顯的改變，細胞正積極為下一步分裂進行準備。細胞內(nèi)合成代謝活動加強，迅速進行蛋白質(zhì)和核酸等物質(zhì)的合成。形成愈傷組織時的變化，不僅是DNA，而且RNA以及蛋白質(zhì)均表現(xiàn)明顯。 分裂期：分裂期是外植體切口邊緣開始膨大，外層細胞通過一分為二的方式進行分裂，從而形成一團具有分生組織狀態(tài)細胞的過程。在這個過程中，培養(yǎng)組織的細胞中RNA及其一些成分隨著細胞的不斷分裂而開始減少，DNA含量始終保持不變。由于細胞分裂的速率大大超過了細胞的生長速率，結(jié)果使每個細胞體積顯著減小，鮮重下降，但細胞的數(shù)目迅速增加。最后細胞內(nèi)這些成分的積累又和分裂達到一種協(xié)調(diào)狀態(tài)，細胞的體積不再減小，內(nèi)無大液泡，細胞核大，核仁明顯。 形成期：形成期是指外植體的細胞經(jīng)過誘導、分裂形成了具有無序結(jié)構的愈傷組織時期。這個時期特征是細胞大小不再發(fā)生變化，愈傷組織表層的分裂逐漸減慢和停止，接著內(nèi)部組織細胞開始分裂，細胞數(shù)目進一步增加。1影響器官和胚狀體發(fā)生的主要因素有哪些？ 根據(jù)起源不同可將器官分化分為兩種發(fā)生方式，一種情況是：器官是由切下的外植體中已存在的器官原基發(fā)育而成的；另一種情況是從外植體脫分化中形成愈傷組織，再在新形成的愈傷組織或經(jīng)繼代培養(yǎng)的愈傷組織上產(chǎn)生一些分生細胞團，隨后由這些分生細胞團分化成不同的器官原基。1單細胞分離的兩種方法是什么？機械法和酶解法有什么不同？機械法和酶解法機械法：先把葉片輕輕研碎，然后通過過濾和離 心凈化細胞。優(yōu) 點：①細胞不會受到酶傷害。 ②不需質(zhì)壁分離，有利于進行生理、生 化研究。 但是，容易傷害細胞結(jié)構，獲得完整細胞團或細胞數(shù)量極低，不具有普遍性。只有在薄壁組織排列疏松，胞間接觸點很少時，分離葉肉細胞才能取得成功。酶解法：用兩種酶：果膠酶、纖維素酶處 理，分離出具有代謝活性的細胞。作 用：降解中膠層、軟化細胞壁。所以在 用酶解法分離細胞的時候，必須對 細胞給于滲透壓保護。1懸浮培養(yǎng)體系的必備條件是什么？ 一個成功的懸浮細胞培養(yǎng)體系必須滿足三個基本條件： ①懸浮培養(yǎng)物分散性良好，細胞團較??； ②懸浮培養(yǎng)物均一性好，細胞形狀和細胞 團大小大致相同； ③懸浮培養(yǎng)物生長迅速。1單細胞培養(yǎng)的幾種方法是什么？請敘述?？醋o培養(yǎng)法、平板培養(yǎng)法、微室培養(yǎng)法看護培養(yǎng)法：是把單個細胞置于一塊活躍生長的愈傷組織(也稱看護愈傷組織)上培養(yǎng)，在愈傷組織和培養(yǎng)的細胞之間，用一片濾紙隔開。平板培養(yǎng)法：將含有游離細胞和細胞團的懸浮培養(yǎng)物過濾，除去組織塊和大的細胞團，保留游離細胞和小細胞團。將液體培養(yǎng)基加入610g/L的瓊脂，使其融化，冷卻到35℃時，將培養(yǎng)基與上述細胞懸浮培養(yǎng)液等量混合，迅速使之鋪展在培養(yǎng)皿。微室培養(yǎng)法：由懸浮培養(yǎng)物中取出一滴含單細胞的培養(yǎng)液，置于一張無菌載玻片上，在培養(yǎng)基的四周與之隔一定距離涂上一圈石蠟油，然后在左右兩側(cè)各加一滴石蠟油并分別置一張蓋玻片，第三張蓋玻片架在前兩個蓋玻片之間，這樣一滴含有單細胞的培養(yǎng)液就被覆蓋于微室之中，最后把筑有微室的整張載玻片置于培養(yǎng)皿中進行培養(yǎng)。當細胞團長到一定大小時，將其轉(zhuǎn)移到新鮮的液體或半固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)。1 原生質(zhì)體定義原生質(zhì)體為去掉細胞壁的裸露細胞。1原生質(zhì)體培養(yǎng)概念意義指將植物細胞游離成原生質(zhì)體，在適宜的培養(yǎng)條件下，依據(jù)細胞的全能性使其再生細胞壁，進行細胞的分裂分化，并發(fā)育成完整植株的過程。意義：單細胞無性系的建立 遺傳轉(zhuǎn)化的良好受體 多種基礎研究的實驗體系 體細胞雜種的形成1原生質(zhì)體分離方法
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