查看：動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱-附2：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)(編輯修改稿)
2025-05-14 03:53 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 方格又各分為１６個(gè)中方格，這是用來(lái)計(jì)數(shù)白細(xì)胞的。中央大方格被劃分為２５個(gè)中方格，每一中方格又劃分成１６個(gè)小方格,稱(chēng)２５１６，也有的計(jì)數(shù)板為１６２５，小方格面積一致)。中央大方格的四角及中心５個(gè)中方格(１６２５/則為四角上的中方格)為紅細(xì)胞或血小板計(jì)數(shù)范圍。(2)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)先用試管稀釋法制備禽類(lèi)血細(xì)胞懸液：將禽類(lèi)紅細(xì)胞稀釋液Ⅰ、Ⅱ分別置水浴鍋中預(yù)熱到４１～４２℃，?、褚海眒L于試管中，用吸血管加入新鮮雞血(或肝素抗凝血)２０霯，再加入Ⅱ液１mL混勻，置該水浴鍋中保溫５０s左右，置室溫，即為待檢的血細(xì)胞懸液?？捎糜诔湟河?jì)數(shù)。取干潔的計(jì)數(shù)板，置于水平的顯微鏡載物臺(tái)上，蓋上蓋玻片，使兩側(cè)各空出少許。搖勻血細(xì)胞懸液，用滴管吸取，將滴管尖輕輕置于蓋玻片邊緣外，讓滴出的血細(xì)胞懸液憑毛細(xì)管作用吸入計(jì)數(shù)室內(nèi)，剛好充滿(mǎn)計(jì)數(shù)室為宜。靜置２min后計(jì)數(shù)，先用低倍鏡觀察，不均勻則拋棄。計(jì)數(shù)時(shí)用虹彩、集光器、反光鏡等調(diào)節(jié)入射光角度和強(qiáng)度，認(rèn)清計(jì)數(shù)室位置。采用“由上至下，由左至右，順序如弓”的順序，對(duì)壓邊線細(xì)胞采取“數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右”的原則。依次計(jì)數(shù)并記錄５個(gè)中方格中分別有多少個(gè)紅細(xì)胞。(3)計(jì)算如發(fā)現(xiàn)各中方格紅細(xì)胞數(shù)目相差20個(gè)以上或各大格的白細(xì)胞數(shù)目相差8個(gè)以上，表明血細(xì)胞分布不均勻，必須把稀釋液搖勻后重新計(jì)數(shù)。紅細(xì)胞的計(jì)數(shù)方法是，（如稀釋100倍則乘以5000），既為要求的每一立方毫米血液中的紅細(xì)胞數(shù)。白細(xì)胞計(jì)數(shù)方法是，將數(shù)得的白細(xì)胞數(shù)乘以50或25，既得一立方毫米血液中白細(xì)胞的總數(shù)。 (4)儀器洗滌計(jì)數(shù)板、蓋玻片和測(cè)定管用清水沖洗，再用綢布或細(xì)布沾干。5．教學(xué)方式以實(shí)驗(yàn)為主，課堂講授為輔的教學(xué)方法，同時(shí)配合錄象教學(xué)。6．考核要求學(xué)會(huì)清洗玻璃器皿，會(huì)配制所需溶液，熟悉顯微鏡的使用和血液化驗(yàn)技術(shù)。7．實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求計(jì)算結(jié)果，報(bào)告中簡(jiǎn)要說(shuō)明計(jì)算過(guò)程。血紅蛋白的測(cè)定1．本次實(shí)驗(yàn)的目的和要求了解和練習(xí)沙利氏比色法測(cè)定血紅蛋白含量。2．實(shí)驗(yàn)內(nèi)容或原理血液加入稀鹽酸后，血紅蛋白轉(zhuǎn)化成不易變色的棕色的高鐵血紅蛋白，可與標(biāo)準(zhǔn)比色板進(jìn)行比色，從而測(cè)得血紅蛋白含量。3．需用的儀器或試劑等人或動(dòng)物。沙利氏血紅蛋白計(jì)、酒精棉球、蒸餾水等。4．實(shí)驗(yàn)步驟（1） 先檢查血紅蛋白計(jì)的測(cè)定管和吸血管是否清潔，如不清潔則依次用自來(lái)水、蒸餾水(３次)、９５％酒精(２次)和乙醚(１～２次)清洗。（2）“２”或“１０％”處。（3）用酒精棉球消毒采血部位，以采血針采血，用吸血管插入流出的血滴深處，吸血至刻度２０霯處，拭凈外壁，將血液立即吹入測(cè)定管的鹽酸中。反復(fù)吸吹，使吸血管中血液全部進(jìn)入鹽酸液中(避免起氣泡)?；靹颍保癿in后，逐滴加入蒸餾水使液體顏色變淺，邊加邊混勻并與標(biāo)準(zhǔn)比色板比較，至二者顏色相同止。（4）讀出測(cè)定管內(nèi)液體凹面最低處的刻度，即為每１００mL血液中血紅蛋白的克數(shù)。另一方面刻度表示百分率，可參照血紅蛋白計(jì)的說(shuō)明換成克數(shù)以核對(duì)讀數(shù)。5．教學(xué)方式以實(shí)驗(yàn)為主，課堂講授為輔的教學(xué)方法，同時(shí)配合錄象教學(xué)。6．考核要求掌握各項(xiàng)目的操作方法，了解實(shí)驗(yàn)步驟，弄清正常值及臨床意義是什么，結(jié)果偏低或偏高的原因。7．實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求鹽酸量的多少及作用時(shí)間長(zhǎng)短對(duì)結(jié)果會(huì)產(chǎn)生什么影響？為什么？（課后思考題）實(shí)驗(yàn)五 紅細(xì)胞脆性的測(cè)定、紅細(xì)胞沉降率的測(cè)定、紅細(xì)胞的凝集現(xiàn)象1．本次實(shí)驗(yàn)的目的和要求測(cè)定紅細(xì)胞膜對(duì)不同低滲溶液的滲透抵抗力．亦即測(cè)定正常動(dòng)物紅細(xì)胞的滲透脆性。了解紅細(xì)胞沉降率并掌握其測(cè)定方法。了解紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象，并掌握測(cè)定血型的方法。2．實(shí)驗(yàn)內(nèi)容或原理內(nèi)容：實(shí)驗(yàn)室可完成紅細(xì)胞脆性實(shí)驗(yàn)，血紅蛋白含量檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。做到改變某些因素時(shí)的檢測(cè)內(nèi)容，結(jié)合實(shí)驗(yàn)理解紅細(xì)胞脆性的概念，分析論證產(chǎn)生的結(jié)果。原理：（1）通過(guò)實(shí)驗(yàn)了解正常的紅細(xì)胞懸于等滲的血漿中，若置于高滲溶液內(nèi)，則紅細(xì)胞失去內(nèi)部液體而皺縮，反之，置于低滲溶液內(nèi)則水分進(jìn)入紅細(xì)胞，使紅細(xì)胞兩面凹陷的圓盤(pán)型變?yōu)榍蛐?，如繼續(xù)膨大，即發(fā)生破裂溶解，形成溶血。（2）紅細(xì)胞膜含有凝集原，血漿內(nèi)含有凝集素。當(dāng)相應(yīng)的凝集原和凝集寨相互作用時(shí)，就產(chǎn)生紅細(xì)胞的凝集現(xiàn)象。3．需用的儀器或試劑等電子天平、水浴箱、電子稱(chēng)、低速離心機(jī)、微量移液器、標(biāo)準(zhǔn)槍架等。4．實(shí)驗(yàn)步驟（1）取試管10支，按不同比例向各管內(nèi)加入1％NaCL溶液和蒸餾水，充分混勻．使各試管溶液均為2ml。并在各試管中加人大小相等的血液1滴，用拇指堵住試管口，慢慢倒置一、二次，使血液與管內(nèi)鹽水混合均勻。室溫靜置1小時(shí)，觀察結(jié)果。（2）將容積比例為1：4的抗凝血吸到清潔、干燥的血沉管至最高刻度“0”處，絕對(duì)避免產(chǎn)生氣泡。然后將吸有血液的血沉管垂直置于血沉管架上，按不同時(shí)間分別記錄。（3）取一載玻片，在左上角和右上角分別寫(xiě)上“A”和“B”字作為標(biāo)記。各用小滴管分別吸取A型標(biāo)準(zhǔn)血清及B型標(biāo)準(zhǔn)血清滴人已經(jīng)記過(guò)A和B字樣的兩側(cè)各一滴。然后再各加人一滴受檢者的血液。用細(xì)玻棒的一端混合A型血清與血液，用另一端混合B血清與血液。置室溫下1030min后，在低倍鏡下觀察有無(wú)凝集現(xiàn)象。5．教學(xué)方式以實(shí)驗(yàn)為主，課堂講授為輔的教學(xué)方法，同時(shí)配合錄象教學(xué)。6．考核要求掌握各項(xiàng)目的操作方法，了解實(shí)驗(yàn)步驟，弄清正常值及臨床意義是什么，結(jié)果偏低或偏高的原因。7．實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求（1）統(tǒng)計(jì)全班各血型人數(shù)所占比例。（課后思考題）（2）如果已知1人為Ａ型血，請(qǐng)你設(shè)計(jì)無(wú)標(biāo)準(zhǔn)血清情況下測(cè)知全班人血型方案。（課后思考題）實(shí)驗(yàn)六 脊髓反射、反射弧分析、蛙血管內(nèi)血液流動(dòng)觀察、蛙心起搏點(diǎn)的觀察脊髓反射1．本次實(shí)驗(yàn)的目的和要求本實(shí)驗(yàn)通過(guò)脊動(dòng)物反射活動(dòng)的觀察，認(rèn)識(shí)脊髓反射的基本特征和興奮在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)傳導(dǎo)的基本特征。2．實(shí)驗(yàn)內(nèi)容或原理脊髓是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的最低級(jí)部位，它的機(jī)能最簡(jiǎn)單，便于觀察。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)脊動(dòng)物反射活動(dòng)的觀察，認(rèn)識(shí)脊髓反射的基本特征和興奮在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)傳導(dǎo)的基本特征。3．需用的儀器或試劑等1%普魯卡因、%及1%硫酸、蛙、解剖器械、鐵支架、燒杯、濾紙片、紗布。4．實(shí)驗(yàn)步驟蛙針或斷頭法破壞蛙腦成脊蛙(最長(zhǎng)可存活幾個(gè)星期)，用短線穿過(guò)下頜，懸在鐵架臺(tái)上，待其興奮性恢復(fù)后，進(jìn)行下面實(shí)驗(yàn)。：(1)屈肌反射和對(duì)側(cè)伸肌反射：％硫酸少許，接觸蛙下肢趾尖，觀察受刺激側(cè)和對(duì)側(cè)下肢的反應(yīng)。(2)搔扒反射：％硫酸的小濾紙片貼于蛙的腹側(cè)部，觀察后肢反應(yīng)的早遲及動(dòng)作的準(zhǔn)確性。：(1)反射時(shí)的測(cè)定：％及1％的硫酸刺激腳趾，用秒表(或電子表)測(cè)定反射時(shí)。每種濃度重復(fù)3次。求其平均值。(2)反射過(guò)程的抑制：先用鱷魚(yú)夾夾住蛙大腿根部的皮膚，待蛙不動(dòng)后，％(或1％)的硫酸刺激。比較此時(shí)反射時(shí)與前項(xiàng)的區(qū)別。(3)脊髓內(nèi)興奮過(guò)程的擴(kuò)散：用鑷子夾蛙左趾，力量由小到大，觀察參與反射肌肉的范圍和強(qiáng)度。(4)刺激的綜合：用單個(gè)電刺激找到刺激閾強(qiáng)度（波寬、電壓），然后改用稍弱于閾值強(qiáng)度的連續(xù)電刺激，觀察頻率變?yōu)槎啻髸r(shí)，蛙趾開(kāi)始后縮。，看能否觀察到空間總和現(xiàn)象。(5)當(dāng)蛙后肢受到電刺激時(shí)，引起反射動(dòng)作，觀察當(dāng)刺激停止時(shí)反射作用是否立即停止；若不便觀察，增大刺激強(qiáng)度，看反應(yīng)又有何變化？，將切口以下皮膚剝凈，直至趾端（包括趾底），％硫酸刺激，結(jié)果如何？，分離出坐骨神經(jīng)(位置不能太低，分支盡量剪斷)，然后將蘸有1％可卡因(或氯仿)的小棉球置于神經(jīng)干之下，每隔10秒鐘，用硫酸刺激一下腳趾，至不出現(xiàn)反應(yīng)時(shí)，立即將浸有1％硫酸的小濾紙片貼于該后肢同側(cè)軀干部的皮膚上，能否觀察到可卡因(或氯仿)對(duì)坐骨神經(jīng)傳入、傳出神經(jīng)纖維麻痹作用的時(shí)間順序？5．教學(xué)方式以實(shí)驗(yàn)為主，課堂講授為輔的教學(xué)方法，同時(shí)配合錄象教學(xué)。6．考核要求掌握測(cè)定反射時(shí)的方法及各項(xiàng)目的操作，了解實(shí)驗(yàn)步驟。7．實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求對(duì)實(shí)驗(yàn)操作中的問(wèn)題給出正確答案。（課后思考題）反射弧分析1．本次實(shí)驗(yàn)的目的和要求（1）通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明，任何一個(gè)反射，只有當(dāng)實(shí)現(xiàn)該反射的反射弧存在并保證其完整的情況下才能出現(xiàn)。 （2）學(xué)習(xí)測(cè)定反射時(shí)的方法。（3）通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明，任何一個(gè)反射，只有當(dāng)實(shí)現(xiàn)該反射的反射弧存在并保證其完整的情況下才能出現(xiàn)。 2．實(shí)驗(yàn)內(nèi)容或原理機(jī)體在中樞神經(jīng)系統(tǒng)參與下，對(duì)刺激所發(fā)生的反應(yīng)叫做反射。反射弧是反射的解剖學(xué)基礎(chǔ)（反射弧一般包括感受器、傳入神經(jīng)、中樞、傳出神經(jīng)、效應(yīng)器等五個(gè)部分）。要引起反射，首要條件是反射
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