【文章內(nèi)容簡介】 即 送 檢 ， 應(yīng) 避 光 精 液 質(zhì) 量 檢 查采 好 的 精 液 應(yīng) 作 如 下 質(zhì) 檢 液 量 。 以 確 定 稀 釋 量 色 。 正 常 為 乳 白 色 ， 無 血 和 尿 味 。 應(yīng) 為 公 豬 氣 味 力5 異 常 精 子6 密 度一 般 應(yīng) 有 分 光 光 度 儀 檢 查 稀 釋 前 后 精 子 密 度顯 微 鏡 檢 查1． 檢 查 精 子 活 力 和 質(zhì) 量2． 精 子 異 常 情 況操 作 方 法 ：1． 放 玻 片 保 溫 器 于 顯 微 鏡 上 ， 調(diào) 溫 度 至 400c， 則 保 溫 器 表 面 溫 度 可 達(dá) 370c； 放玻 片 于 保 溫 面 上2． 在 蓋 玻 璃 片 上 面 的 中 間 和 邊 上 各 點 一 點 要 檢 的 精 液 （ 邊 上 主 要 是 讓 蓋 片 緊 連 玻 片 ） ，然 后 將 蓋 玻 片 翻 轉(zhuǎn) 放 在 玻 片 上3． 用 100 倍 放 大 鏡 檢 查 活 力4． 用 400 倍 放 大 檢 查 活 動 情 況5． 用 1000 倍 放 大 檢 查 異 常 （ 進(jìn) 行 此 項 檢 查 時 不 用 保 溫 器 ）顯 微 鏡 的 清 潔每 天 工 作 完 成 后 應(yīng) 對 顯 微 鏡 作 如 下 項 目 的 清 潔 ： 個 鏡 頭 用 鏡 頭 紙 擦 干 凈 （ 包 括 物 鏡 和 目 鏡 ）正大集團養(yǎng)豬事業(yè)養(yǎng)豬管理手冊 第 13 頁 共 63 頁 別 是 1000 倍 物 鏡 應(yīng) 先 用 二 甲 苯 洗 掉 油 ， 再 用 紗 布 擦 鏡 ， 然 后 用 擦 鏡 紙 擦 （ 用 過的 物 鏡 才 做 ） 干 布 擦 鏡 身 塑 料 布 蓋 好 放 入 貯 存 柜檢 查 精 子 活 力 輕 輕 搖 勻 精 液 種 環(huán) 用 灑 精 燈 燃 燒 ， 放 涼 ， 然 后 蘸 取 精 液 ， 點 在 蓋 玻 片 上 轉(zhuǎn) 蓋 片 蓋 在 凹 玻 片 上 ， 液 滴 應(yīng) 盡 量 成 凸 圓 形 且 正 好 置 于 凹 玻 片 的 凹 槽 中 100 放 大 鏡 檢 查 精 子 活 力 ， 檢 查 活 精 占 精 子 總 數(shù) 的 比 例 400 倍 檢 查 精 子 活 動 情 況 ， 主 要 是 檢 查 尾 巴 活 動 的 強 度 ， 一 般 用 “+”表 示活 動 分 五 類 ：+++活 動 快 ,看 不 見 尾 巴++活 動 快 ， 能 看 見 尾 巴+活 動 慢 ， 象 滾 動177。有 動 ,但 無 位 置 移 動死 精 ,無 活 動精 滴 要 盡 量 點 圓 形 ， 太 扁 則 精 子 游 到 邊 上 時 活 動 緩 慢 困 難 ， 判 定 易 出 錯 。 邊 上 層 數(shù) 多代 表 密 度 大 。 每 次 檢 查 活 力 應(yīng) 用 保 溫 器 并 調(diào) 至 400c 的 溫 度一 般 用 于 人 工 授 精 的 精 液 應(yīng) 是 活 力 70 %+++， 異 常 精 子 比 例 不 超 過 20 %， 所 以 正常 情 況 下 ， 劑 量 應(yīng) 有 有 效 精 子 50 億 80%， 即 40 億 。 進(jìn) 口 公 豬 體 形 好 ， 精 子 有 問 題 時 ，另 外 考 慮分 光 光 度 儀 檢 查 精 子 密 度 光 度 為 50um 左 鈕 按 順 時 針 方 向 扭 動 打 開 光 度 儀 15 分 鐘 傳 導(dǎo) 率 為 0 后 放 入 3%檸 檬 酸 溶 液 ， 讓 管 標(biāo) 號 對 準(zhǔn) 儀 器 標(biāo) 號 左 鈕 于 傳 導(dǎo) 率 為 100 出 比 色 液 然 后 再 放 入 ， 儀 器 傳 導(dǎo) 率 讀 數(shù) 應(yīng) 仍 為 100， 如 不 是 應(yīng) 重 復(fù) 35 的 操作正大集團養(yǎng)豬事業(yè)養(yǎng)豬管理手冊 第 14 頁 共 63 頁 ml 精 液 混 合 3 %檸 檬 酸 ml 搖 勻 ， 放 入 檢 測 ， 時 間 為 15 秒 ， 讀 出 傳導(dǎo) 率 據(jù) 讀 數(shù) ， 查 稀 釋 標(biāo) 準(zhǔn) 圖 確 定 稀 釋 比 例 ， 再 乘 以 采 精 量 ， 算 出 應(yīng) 添 加 稀 釋 液 的 量計 算 方 法例 ： 采 精 300 ml， 取 樣 2 ml 加 稀 釋 液 300 ml， 比 例 1： 1， 即 將 精 液 稀 釋 到 600 ml 所 取 樣 混 入 3 %檸 檬 酸 鹽 溶 液 ， 用 分 光 光 度 儀 測 量 指 數(shù) 為 6 %T 比 標(biāo) 準(zhǔn) 圖 得 出 應(yīng) 為 9 倍 稀 釋 大 稀 釋 量 則 為 9300＝ 2700 ml 按 1： 1 的 比 例 稀 釋 過 的 精 液 稀 釋 比 為 2700/600＝ 倍若 配 種 2 頭 母 豬 時 ， 即 需 拿 1： 1 精 液 為 200/＝ ml200 ml 輸 精 量 則 需 加 入 稀 釋 液 ml 精 液 稀 釋 采 精 后 即 檢 測 活 力 ， 密 度 ， 然 后 稀 釋 ， 稀 釋 液 和 精 子 放 350c 降 溫 箱 ， 倒 入 稀 釋 ，要 順 瓶 墊 轉(zhuǎn) 動 流 入 ， 同 時 轉(zhuǎn) 動 精 液 瓶 混 勻 ， 至 到 需 要 的 稀 釋 量 稀 釋 過 程 中 ， 稀 釋 比 例 越 高 ， 稀 釋 時 間 越 長 ， 倒 入 稀 釋 液 應(yīng) 越 慢 。 要 保 存 的 精 液 ， 稀釋 比 應(yīng) 是 1： 1， 大 約 含 精 子 2 億 /ml 稀 釋 液 溫 度 一 定 要 與 精 液 相 同 保 存 精 液 已 稀 釋 精 液 ， 應(yīng) 保 存 于 16180c 恒 溫 箱 ， 此 時 精 子 消 耗 營 養(yǎng) 最 低 ， PH 變 化 小 。 低于 140c 會 殺 死 精 子 ， 用 Kive,Modena 配 方 時 有 葡 萄 糖 、 檸 檬 酸 鈉 ,而 無 脂 蛋 白 保 存 溫度 不 能 低 于 150c， 如 有 脂 蛋 白 則 可 能 降 到 50c 保 存 超 過 200c 時 ， 精 子 消 耗 營 養(yǎng) 多 ， 廢 物 多 ， 精 子 易 死 。 保 存 的 精 液 應(yīng) 置 于 水 中 ， 讓 水作 緩 沖 ， 避 免 溫 度 突 然 變 化 恒 溫 箱 保 存 的 精 液 使 用 前 要 進(jìn) 行 檢 查 ， 操 作 是 先 取 12 ml 放 37380c 水 中 恒 溫 ，保 存 1 天 ， 恒 溫 5 分 鐘 ， 每 超 過 一 天 加 10 分 鐘 。 精 液 在 保 存 時 每 天 應(yīng) 進(jìn) 行 12 次 滾動 ， 保 證 精 子 均 勻 分 布 及 得 到 充 分 的 營 養(yǎng) 。 精 液 一 般 可 保 存 3 天 ， 再 長 則 精 子 質(zhì) 量 下降 ， 不 能 用 于 配 種染 色 檢 查 精 子 異 常正大集團養(yǎng)豬事業(yè)養(yǎng)豬管理手冊 第 15 頁 共 63 頁1． 將 已 稀 釋 精 液 輕 輕 搖 勻 ， 以 蓋 玻 片 邊 緣 醮 一 點 精 液 ， 然 后 以 蓋 玻 片 醮 精 液 一 側(cè) 接 觸玻 片 的 一 端 并 貼 住 玻 片 拉 向 另 一 端 ， 讓 精 液 均 勻 分 布 于 玻 片 上 ， 晾 干2． 點 70 % 甲 基 灑 精 固 定 ， 放 3 分 鐘 ， 用 水 沖 去 灑 精 ， 晾 干3． 將 已 晾 干 玻 片 放 入 紅 玫 瑰 染 色4． 15 分 鐘 后 ， 取 出 玻 片 沖 洗 掉 染 色 劑 ， 晾 干異 常 精 子 檢 查1． 將 做 好 晾 干 的 待 檢 玻 片 放 于 100 倍 顯 微 鏡 下 找 到 精 子 分 布 的 區(qū) 域2． 用 油 點 此 區(qū) 后 轉(zhuǎn) 換 致 1000 倍 ， 微 調(diào) 顯 微 鏡3． 用 計 數(shù) 器 記 住 不 同 區(qū) 域 所 見 的 精 子 直 到 333 個 ， 同 時 記 住 異 常 精 子 數(shù) ， 算 出 百分 比異 常 精 子 的 種 類1． 頭 部 異 常 ： 如 頭 大 ， 頭 扁2． 頸 部 異 常 ： 斷 裂 ， 頭 頸 不 連3． 中 部 ： 歪 ， 肥 大4． 尾 部 ： 斷 尾 ， 折 斷 ， 卷 曲5． 不 成 熟 ， 細(xì) 壁 質(zhì) 滴 粘 在 中 部 ， 尾 部 或 頸 部精 子 異 常 原 因 分 析1． 初 級 異 常 ： 在 睪 丸 內(nèi) 產(chǎn) 生 ， 如 頭 部 異 常 、 一 部 分 尾 巴 異 常 （ 二 個 尾 ， 卷 尾 ） 及 中部 異 常2． 二 類 異 常 ： 在 睪 丸 外 產(chǎn) 生 。 異 常 產(chǎn) 生 于 附 睪 。 如 尾 歪 、 破 損 ， 頭 帽 異 常 、 近側(cè) 和 遠(yuǎn) 端 液 滴 粘 附 等 .可 能 是 冷 刺 激 ， 滲 透 壓 變 化 所 致一 般 健 康 公 豬 異 常 精 子 比 例 不 超 過 17%（ 610%之 間 ） ， 公 豬 如 睪 丸 退 化 ， 頭 部 不正 常 可 達(dá) 20%在 檢 查 異 常 精 子 時 ， 必 須 先 染 色 再 用 顯 微 鏡 看 。 染 色 劑 有 幾 種 ： 如 印 度 墨 染 色 劑 ， 鮮紅 色 染 料 及 苯 胺 墨 ， 最 后 2 種 是 常 用 的精 子 的 頭 帽 作 用 在 于 產(chǎn) 生 酵 素 ， 幫 助 精 子 進(jìn) 入 卵 子一 般 頭 帽 檢 查 即 檢 查 頭 帽 是 否 完 整 、 是 否 變 形 。 頭 帽 是 否 正 常 ， 反 映 公 豬 健 康 狀 況 ，異 常 率 ＝ 異 常 精 子 數(shù) 3/10正大集團養(yǎng)豬事業(yè)養(yǎng)豬管理手冊 第 16 頁 共 63 頁它 比 活 力 的 反 映 更 準(zhǔn)頭 帽 是 否 正 常 ， 檢 查 非 常 復(fù) 雜 ， 不 能 用 一 般 手 段 ， 應(yīng) 在 化 驗 室 進(jìn) 行檢 查 頭 帽 要 用 (Phase contrast or differential interference contrast microscopy)， 此 設(shè) 備 價 格 高 ， 附 件 很 多 。 但 1988 年 Bamba 等 發(fā) 現(xiàn) 鮮 紅 及 苯 胺 墨 檢 查法 與 以 上 方 法 檢 測 的 結(jié) 果 也 很 接 近公 豬 使 用 頻 率 高 、 休 息 不 夠 或 年 輕 公 豬 ， 都 會 出 現(xiàn) 不 成 熟 精 子 多 的 情 況化 驗 室 設(shè) 備 用 具 清 潔1． 所 有 已 用 過 的 工 具 都 應(yīng) 馬 上 水 洗 ， 特 別 是 吸 管 ， 如 已 干 則 清 洗 難2． 用 清 水 清 洗 所 有 工 具 ， 如 很 臟 應(yīng) 同 時 使 用 毛 刷 或 海 綿3． 用 蒸 餾 水 再 次 清 洗 ， 晾 干4． 高 溫 消 毒用 干 燥 消 毒 玻 璃 器 械 時 應(yīng) 至 少 消 毒 小 時 (輸 精 管 不 能 用 此 法 ,易 損 壞 )水 蒸 汽 消 毒 塑 料 器 具 和 輸 精 管 時 消 毒 時 間 應(yīng) 不 少 于 45 分 鐘5. 消 毒 后 的 用 具 放 進(jìn) 貯 存 柜 ， 用 消 毒 紗 布 包 好 或 鋁 鉑 封 好*不 能 用 洗 潔 精 和 肥 皂 清 洗 用 具人 工 授 精 工 具 清 洗1． 所 有 已 用 過 的 器 具 應(yīng) 馬 上 浸 泡 ， 用 后 清 洗 ， 干 后 難 洗2． 用 清 水 沖 洗 內(nèi) ， 外3． 用 蒸 餾 水 再 沖 一 次4． 水 蒸 汽 消 毒5． 清 洗 過 的 工 作 臺 面 每 周 可 用 70%酒 精 消 毒 一 次 ， 或 安 裝 紫 外 線 燈 消 毒*不 能 用 洗 潔 精 和 肥 皂 清 洗精 液 運 輸精 液 運 輸 溫 度 與 保 存 一 樣 為 180c， 正 常 范 圍 16180c。 如 超 過 200c， 精 子 表 面 損壞 ， 且 不 能 恢 復(fù) ， 故 溫 度 條 件 不 能 滿 足 的 情 況 下 應(yīng) 避 免 運 輸 。 精 液 確 需 運 輸 時 ， 不 管采 用 什 么 方 法 則 一 定 要 保 證 需 要 的 溫 度 同 時 要 避 免 振 動 。 最 好 的 方 法 是 使 用 可 控 溫 的 小 保溫 箱 ， 使 用 連 續(xù) 電 源 ， 用 泡 沫 箱 亦 可 ， 因 為 泡 沫 比 其 它 材 料 保 溫 效 果 好將 運 輸 的 精 液 置 于 蓋 嚴(yán) 的 瓶 中 ， 用 防 水 材 料 包 好 ， 放 入 作 為 介 質(zhì) 的 水 中 ， 再 用 海 綿 裹住 ， 防 止 振 動 。 水 位 應(yīng) 比 精 液 液 面 高 。 用 泡 沫 箱 時 ， 要 先 將 箱 內(nèi) 溫 度 要 降 致 180c，正大集團養(yǎng)豬事業(yè)養(yǎng)豬管理手冊 第 17 頁 共 63 頁降 至 此 溫 度 大 約 需 要 1 小 時 以 上 的 時 間 。 有 時 溫 度 會 低 于 160c， 低 于 150c 時 將 引 起精 子 死 亡 ， 故 此 要 研 究 箱 的 大 小 ， 裝 精 液 量 ， 冰 塊 大 小 的 配