db37t3122-20xx槐花多糖提取工藝及其生物活性評價技術規(guī)程(編輯修改稿)
2025-05-04 03:03 本頁面
【文章內容簡介】 注射器。 密封袋?！?濃硫酸?！?苯酚。5 儀器設備 恒溫干燥箱?！?超微粉碎機?！?40目篩網(wǎng)?！?電子天平?！?pH計?！?水浴鍋?！?旋轉蒸發(fā)儀?！?全自動血細胞分析儀?！?分光光度計。 酶標儀?！?磁力攪拌器?！?移液器（10 μL～1000 μL）?！?微量振蕩器?！?高壓蒸汽滅菌器?！?蒸餾裝置?！?分光光度計（380 nm～780 nm）?！?電子天平。 坐標紙。6 槐花多糖的提取 采集新鮮盛開的槐花，去梗后放入恒溫干燥箱中于70 ℃烘干，用超微粉碎機粉碎成粉末狀，過40目篩，裝入密封袋，20 ℃保存?！?稱取一定量的槐花粉與去離子水按體積1:25混合， %的纖維素酶，45 ℃水浴中浸提1 h，提取4次，合并4次上清液，用旋轉蒸發(fā)儀減壓濃縮至1/5體積?！?濃縮液用Sevag試劑（配制方法見附錄A）除蛋白，重復兩次，最后加入4倍體積的無水乙醇使多糖沉淀，對析出的多糖進行離心，冷凍干燥后即為槐花多糖。7 苯酚硫酸法測定多糖含量 葡萄糖標準液的配制稱取葡萄糖100 mg，蒸餾水定容至100 mL的1 mg/L的葡萄糖液，搖勻后吸取10 mL該溶液，用去離子水稀釋定容至100 mL，即得100 ug/mL的葡萄糖標準液?！?90 %苯酚液的配制量取苯酚90 mL，用去離子水定容至100 mL，即得90 %苯酚液，棕色瓶中避光保存?！?6 %苯酚液的配制將90 %苯酚液稀釋至6 %，即一體積儲存液對應十四體積去離子水，臨用現(xiàn)配?！?實驗步驟 標準曲線的制作取8支干凈的帶塞試管，按表1方法分別加入相應體積的葡萄糖溶液， mL的6 %苯酚溶液，震蕩搖勻后緩慢逐滴加入純硫酸，以不放熱或微量放熱為宜，搖勻后恒溫加塞，沸水放置20 min，取出后用涼水冷
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