【文章內容簡介】 ml。 (3)伊紅乙醇液 伊紅Y59，95%乙醇100m1，混合后不停攪拌。溶解后即可使用。 [染色方法] (1)切片脫蠟至水。 (2)經(jīng)70%乙醇漂洗。 (3)地衣紅液染30~60min。 (4)95%乙醇分化，洗去多余染液。 (5)用1%鹽酸乙醇處理2~5min，直至背景無色為止。需鏡下控制。 (6)流水沖洗5~l0min。 (7)姬姆薩稀釋液浸染2h~過夜。 (8)用95%乙醇分化，伊紅乙醇液(95%乙醇中滴數(shù)滴)中染色，直到大量的藍色從結締組織中脫掉為止?？稍阽R下控制。 (9)無水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。 [結果) 細胞核深藍色，彈力纖維深棕到黑色，膠原纖維粉紅到淺藍色，黑色素呈綠色到棕色，嗜伊紅顆粒呈紅色至紫色，細胞核呈深藍色。 Uana地衣紅染色法 [固定] 甲醛液或其他固定液。 [試劑配制] Uana地衣紅染色液：地衣紅lg , 70%乙醇99ml，濃鹽酸1m1。將地衣紅溶于乙醇內，然后加入濃鹽酸。放置冰箱中保存?zhèn)溆谩? [染色方法] (1)組織切片，脫蠟至水。 (2)在70%乙醇中2min。 (3)置Uana地衣染色液中15~30min(系溫箱內所需時間，室溫中浸染過夜)。 (4)70%乙醇液分化至無多余染液脫下為止。 (5)可用Van Gieson液復染。 (6)95%乙醇、無水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。 [結果] 彈力纖維呈棕紅色至暗棕色，其他組織呈復染的顏色。 Gomori改良醛復紅阿爾辛籃染色法 [固定] 各種固定液，但以乙醇或Bouin固定液固定效果最佳。 [試劑配制] 醛復紅阿爾辛藍染液：，70%乙醇98m1，濃鹽酸1ml，三聚乙醛1m1。將復紅和阿爾辛藍依次溶于乙醇內，然后加入鹽酸和三聚乙醛，充分混合搖勻，放置室溫中24h，使其自然成熟后即可使用。該液用后須貯存于冰箱中可保存2~3個月。 [染色方法] (1)石蠟切片，脫蠟至水。 (2)用醛復紅阿爾辛藍液染1~2h。 (3)70%乙醇液漂洗2次，約3~5min。 (4)蒸餾水稍洗。 (5)用焰紅B液染色10~l5min。 (6)直接用無水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。 [結果] 彈力纖維呈深紫色，背景呈藍綠色或其他復染的顏色。 Darrow合成地衣紅改良法(1952年) [固定] Zenker液、Bouin液、10%甲醛均可。 [試劑配制] (1)A液 %濃鹽酸的70%乙醇中。 (2)B液 即Mallory硼砂亞甲藍液，其貯存原液為1g亞甲藍與1g硼砂溶于100m1蒸餾水中。用時將此原液l ml加蒸餾水至9 ml即可。 [染色方法] (1)按常規(guī)將切片脫蠟。(2)在A液中染30min。(3)在70%乙醇中稍洗2次。(4)蒸餾水中洗2次。(5)在稀釋的B液中染5min。 (6)蒸餾水洗。 (7)%透明松香(Colophony，rosin)的95%乙醇中分色并脫水2min。切片要經(jīng)常搖動，在鏡檢下掌握染色結果。 (8)在無水乙醇中快速完成脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。 [結果] 彈力纖維呈深紫色或紅紫色，核藍色。 Fraenkel多色染色法(Lillie，1965年) [顯示目的] 彈性硬蛋白、膠原纖維、肌肉和核。 [固定] 任何固定劑。 [試劑配制] A溶液：，95%乙醇120ml，蒸餾水60ml，硝酸6 mI。向含有3%HCl的70%乙醇加入足量的上述貯存液，使溶液呈棕色。 B溶液，%的靛姻脂紅(Indigo carmine)。 C溶液，即Orth鋰煙脂紅染色液。~5g煙脂紅溶于飽和碳酸鋰水溶液中(%)，煮沸10~15min，冷卻過濾并加lg百里蠶粉。 [染色方法] (1)按常規(guī)切片脫蠟至水。 （2）用C液染2~5min，使核雖紅色。 (3)在1%，鹽酸乙醇中分色。 (4)在A液中染24h。 (5)在80%乙醇中分色。 (6)在B液中染10~l5min。 (7)%醋酸中洗。 (8)在95%與100%乙醇中快速脫水。 (9)二甲苯透明，中性樹膠封固。 [結果]核紅色，彈性硬蛋白深棕色，膠原纖維藍綠色，肌肉黃色。 堿性藍B染色法 [固定] 10%甲醛液、乙醇液或Zenker液均可。 [試劑配制] (1)堿性藍B乙醇溶液 堿性藍B ~，70%乙醇100ml。 (2)氫氧化鉀乙醇液 ，70%乙醇100ml。 [染色方法] (1)石蠟切片，脫蠟至水。 (2)在70%乙醇中l(wèi)min，入堿性藍B乙醇液5~10min。 (3)蒸餾水速洗。 (4)用4%鐵明礬溶液處理2~3min。 (5)蒸餾水速洗。 (6)入50%乙醇內1~2min。 (7)%氫氧化鉀乙醇液分化3~5s。 (8)蒸餾水速洗2次。 (9)%熒光桃紅液染3~5min。 (10)蒸餾水略洗。 (11)用95%乙醇及無水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。 [結果] 彈力纖維呈藍色，膠原纖維及背景呈紅色，紅細胞呈紫紅色。 1顯示彈力纖維的VBM染色法 [固定] 中性甲醛固定，石蠟包埋切片。 [試劑配制] (l)Martius yellow染色液 ，95%乙醇98m1。 (2)Victoria blue染色液 詳見顯示彈力、膠原纖維的雙重組合染色法。 [染色方法] (1)組織切片脫蠟至水。 (2)切片入70%乙醇中洗2min。 (3)將切片浸入Victoria blue染色中2h。 (4)用95%乙醇分化l min。 (5)浸入蒸餾水中洗2次。 (6)用馬休黃染色液染l min。 (7)快速用無水乙醇沖洗2次。 (8)二甲苯透明，中性樹膠封固。 [結果] 彈力纖維呈藍色，背景黃色。 、膠原纖維的雙重組合染色法(1992年) [固定] 中性甲醛液，石蠟包埋切片。 [試劑配制] (1)維多利亞藍染色液 維多利亞藍(Victoria blue)2g，間苯二酚4g，蒸餾水200m1。將上述物質混合后加熱煮沸，邊煮邊攪拌，約5min。然后用另一容器取30%三氯化鐵水溶液25ml，另行加熱煮沸后慢慢倒入上述混合液中，繼續(xù)煮沸3min，不斷攪拌溶液呈膠體狀。去火冷卻過濾，將濾紙上的殘渣連同濾紙一起放在60℃恒溫箱中烤干。殘渣呈深藍色細顆粒狀粉末，再將其溶于400m1的70%乙醇液中。然后加濃鹽酸4ml和苯酚5g，放置至成熟后使用。 (2)麗春紅S染色液 %麗春紅(ponceau39。s上海試劑三廠出品)l5ml，加苦味酸飽和水溶液(%)85m1。 [染色方法] (1)組織切片脫蠟至水。 (2)切片入70%乙醇中洗2min。 (3)~2h。 (4)直接入95%乙醇中分色數(shù)秒鐘。 (5)用蒸餾水洗2min。 (6)用麗春紅S液滴染切片2min。 (7)直接用無水乙醇沖洗多余染色液2次。 (8)將切片在空氣申或冷風干燥。(9)二甲苯透明，中性樹膠封固。[結果] 彈力纖維呈藍綠色，膠原纖維呈紅色，背景呈淡黃色。第二章 肌肉組織肌組織主要由肌細胞構成，根據(jù)結構和功能，又分為骨骼肌、心肌和平滑肌，而骨骼肌和心肌的肌纖維含有橫紋，所以又稱為橫紋肌。其基本病變主要是指肌纖維的變性、壞死和修復等。常見腫瘤有橫紋肌瘤、橫紋肌肉瘤和含有成肌細胞的混合性中胚葉腫瘤等，而共同的病理變化特點是腫瘤細胞可出現(xiàn)橫紋肌纖維，可用磷鎢酸蘇木素（PTAH）來顯示肌纖維成分。第一節(jié) 橫紋肌組織一、Mallory磷鎢酸蘇木素染色法（PTAH）（1）Mallory磷鎢酸蘇木素液（PTAH） ，磷鎢酸2g，蒸餾水100ml。將蘇木素置20ml蒸餾水中加熱溶解，再將磷鎢酸溶于80ml蒸餾水中。蘇木素冷卻后加入磷鎢酸溶液，混合后置放，經(jīng)陽光處理數(shù)周至數(shù)月才成熟。（2）高錳酸鉀氧化液 %高錳酸鉀水溶液50ml，%硫酸水溶液50ml。（1）中性甲醛液固定組織，石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水。（2）在高錳酸鉀液中氧化510min。（3）自來水洗2次后，用1%草酸漂白2min。（4）自來水洗，蒸餾水洗2次。（5）浸入Mallory PTAH 液中1248h。（6）直接用95%乙醇分化。（7）無水乙醇脫水、二甲苯透明、中性樹膠封固。 胞核、纖維、肌肉、神經(jīng)膠質纖維、纖維素、橫紋肌等均呈藍色；膠原纖維、網(wǎng)狀纖維、軟骨基質及骨呈黃色或玫瑰紅色；粗彈力纖維有時被染色成微紫色；有缺血缺氧早期病變的心肌呈紫藍色或棕黃色。（1）此液在室溫下自然成熟后，置冰箱內保存可使用多年時間，其效果不減。（2）如果實驗時急需用試劑，以加快促使成熟。（3）95%乙醇分化時應注意在切片上保留一定的紅色，然后用無水乙醇快速脫水，冷風稍干燥后封固。 第二節(jié) 早期心肌病變組織染色早期心肌梗死是近年來被稱為早期心肌病變，從60年代開始，有許多作者都對心肌病變進行方法學研究，其共同特點是選用酸（堿）性復紅對缺氧心肌進行實驗，結果證明了心肌病變的可靠性，這種缺氧心肌對酸性復紅的親和力稱嗜復紅性，對堿性復紅的親和力稱為親復紅性。在實驗中還可用PAS法來顯示早期心肌病變中的糖原減少或消失。以便作為對照的鑒別診斷。一、NagarOlsen染色法（1974年）此法顯示缺氧心肌的蘇木素堿性復紅苦味酸染色法，簡稱HBFP。（1）Harris蘇木素液（2）堿性復紅染色液 ，蒸餾水100ml。（1）中性甲醛液固定組織，石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水。（2）入明礬蘇木素液1030s。（3）自來水沖洗5min，用蒸餾水洗2次。（4）堿性復紅染色液3min。（5）蒸餾水洗510s。（6）純丙酮洗5s。（7）%苦味酸純丙酮液迅速分化515s。（8）純丙酮脫水、二甲苯透明、中性樹膠封固。缺氧心肌、紅細胞呈紅色，正常心肌呈黃色或黃棕色，細胞核呈黃色。本法屬于退行性染色，關鍵是在苦味酸丙酮液中分化，復紅液對缺氧心肌染色力較強，而分化時也相對的抵抗力較大，其脫色慢些；但正常心肌對分化液的抵抗力差，即脫色快些，因此需要將切片浸入分化液中而不停的快速上下移動多次后，即用丙酮進行脫水，在鏡下觀察脫色情況，如果分化不足可再進行分色。第三章 神經(jīng)組織第一節(jié) 神經(jīng)元及神經(jīng)纖維一、神經(jīng)元及神經(jīng)纖維的結構神經(jīng)組織主要是由具有長突起、能傳導沖動的神經(jīng)細胞組成。神經(jīng)細胞是神經(jīng)系統(tǒng)的結構和功能單位，所以又稱神經(jīng)元。神經(jīng)元集中于大腦、小腦皮質、腦干、脊髓的灰質以及神經(jīng)節(jié)內。神經(jīng)元的胞體聚集成核團，而神經(jīng)元的軸突組成纖維束；在周圍神經(jīng)中，神經(jīng)元的胞體組成神經(jīng)節(jié)，軸突組成神經(jīng)束。神經(jīng)元由細胞體、樹突和軸突構成。神經(jīng)元的細胞體具有和其他細胞一樣的結構，即表面有細胞膜、中有細胞質、內有細胞核。胞體的形態(tài)、大小各異，有圓形、錐形、星形等。一般細胞核位于胞體的中央，為泡狀，核仁極明顯；胞質結構較復雜，含有神經(jīng)原纖維、尼氏小體、高爾基體、線粒體、內含物、色素等，其中神經(jīng)原纖維和尼氏小體是神經(jīng)元特有的結構。神經(jīng)元之間通過突觸互相聯(lián)系。神經(jīng)元的胞突分為樹突與軸突兩種。每個神經(jīng)元有1至多個樹突，軸突只有一個。神經(jīng)纖維由從神經(jīng)元發(fā)出的軸突和較長的樹突以及包裹在外的構造一起組成，在腦與脊髓內走行于白質中，并為外周神經(jīng)系統(tǒng)的一部分。軸突中主要為神經(jīng)原纖維和少量胞漿及線粒體，沒有尼氏小體。軸突外周的構造，有些較為復雜，外層被鞘膜包裹，稱為有髓纖維；有些比較簡單，無鞘膜被覆。稱為無髓纖維。二、神經(jīng)元和神經(jīng)纖維的染色在常規(guī)HE染色中雖然可觀察到神經(jīng)元及神經(jīng)纖維的全貌，但是細微的結構和某些特殊成分還需用特殊的染色方法來顯示。用鍍銀法可以在神經(jīng)元胞漿中看到許多交錯成網(wǎng)的細絲，并伸入樹突之中，這在HE染色中是看不到的。電鏡下可見它們是粗約120197。的微絲或直徑約250197。的微管集合成的束。神經(jīng)原纖維可能與維持細胞的外形和細胞內物質的傳遞有關。某些疾病時，神經(jīng)原纖維集結，可用鍍銀染色清晰地顯示。在神經(jīng)組織的疾病診斷和科研中，均需要應用顯示神經(jīng)元及神經(jīng)纖維的染色方法進行觀察。如一些中毒性外圍神經(jīng)疾病、維生素B1缺歹癥、麻風病及其他外周神經(jīng)病變時，可用特殊染色法來進行觀察損害程度。當神經(jīng)纖維遭受橫斷外傷時，神經(jīng)纖維可發(fā)生變性、崩解、自斷端向兩側發(fā)展，嚴重者導致潰變，神經(jīng)原纖維腫脹、碎裂，繼而成為顆粒狀。神經(jīng)元及神經(jīng)纖維染色在診斷和鑒別某些神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤方面也經(jīng)常應用。神經(jīng)元和神經(jīng)纖維的染色法較多，但主要為鍍銀法。鍍銀法的基本原理是把固定后的組織或切片浸于銀溶液中，再用還原劑處理，使銀顆粒沉著于軸索的軸漿中，使之呈現(xiàn)深棕色或黑色。鍍銀后可在神經(jīng)元胞漿內看到許多交錯成網(wǎng)的細絲，并伸入樹突及軸突之中。1．Bielschowsky冰凍切片法引自Davenport，Windle與Beech(1934年)和Beech與Davenport