[理學(xué)]進(jìn)展匯報(bào)范例(編輯修改稿)
2025-04-18 06:38 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 基因啟動(dòng)子 i i ? 異源基因在絲狀真菌中的表達(dá)需要適當(dāng)?shù)恼婢鷨?dòng)子 ，不同種屬的絲狀真菌啟動(dòng)子具有一定的交叉性 ， 很多異源啟動(dòng)子可以在特定的絲狀真菌中表達(dá)同源或異源的基因 。一般規(guī)律：在絲狀子囊菌及相應(yīng)半知菌 （ 無性階段 ） 內(nèi) ，真菌啟動(dòng)子有廣泛的宿主范圍 。 米根霉基因強(qiáng)啟動(dòng)子合成 Primers Primers’ information Sequences(5′→3′) lpro_F lpro_R Synthesis of ldhA gene upstream sequences CGGATATCATACCATCTTAATTTGCC CGGATATCCATGAGAATTATATATTGTAAAG pdcApro_F pdcApro_R Synthesis of pdcA gene upstream sequences TCTCCCGGGGCTAAAGTTTATCAGCTTCAATCCAT TCTCCCGGGCATGCTTTTAAATTTGTTTTGTAGAG amyApro_F amyApro_R Synthesis of amyA gene upstream sequences CGGATATCATTCCATGTCCACTTC CGGATATCCATGCTAGAGAAAGACCAAT pgkpro_F pgkpro_R Synthesis of pgk2 gene upstream sequences TCTCCCGGGAGCACAACAATCTATTTATACTGCC TCTCCCGGGCATTCTGTTGAAAAATTGGTATTTG Kmr_F Kmr_R Synthesis of kanamycin resistance gene expression cassette CGAATATT GATATCTATGGACAGCAAGCGAACC GGAATTCCATATGAGGGCGACACGGAAATG PCR 所用引物及其序列 ? lpro（ ldhA上游 257bp啟動(dòng)子區(qū)域片段 ） PCR產(chǎn)物電泳檢測； ? pdcpro（ pdcA上游 1083bp啟動(dòng)子區(qū)域片段 ） PCR產(chǎn)物電泳檢測； ? amypro（ amyA上游 899bp啟動(dòng)子區(qū)域片段 ） PCR產(chǎn)物電泳檢測； ? pgkpro（ pgk2上游 557bp啟動(dòng)子區(qū)域片段 ） PCR產(chǎn)物電泳檢測； ? KmR（ 載體 pEASY所攜帶的編碼卡那霉素抗性基因及其上下游調(diào)控序列的表達(dá)盒區(qū)域 ） PCR產(chǎn)物電泳檢測 。 ? 同樣擴(kuò)增的片段經(jīng)過回收后連入準(zhǔn)備好的克隆 /測序載體中轉(zhuǎn)化感受態(tài)大腸桿菌進(jìn)行克隆并用于測序分析 。 ? 測 序 結(jié) 果 與 米 根 霉 基 因 組 數(shù) 據(jù) 庫 Rhizopus oryzae Database 中對(duì)應(yīng)的基因組序列以及 pEASY載體上的相對(duì)部分序列進(jìn)行比對(duì) ， 對(duì)應(yīng)的序列同源性分別為 98%， 98%，99%， 100%， 100%。 啟動(dòng)子片段電泳及測序檢測，載體捕獲及啟動(dòng)活性檢測 4 5 0 03 0 0 02 2 5 01 5 0 01 0 0 07 5 05 0 02 5 01 2 3 4 5bp1 2 3 4 5 64 5 0 03 0 0 02 2 5 01 5 0 01 0 0 07 5 05 0 02 5 0bp1 2 3 445003000225015001000750500250bp1 2 3 4 5 6 745003000225015001000750500250bp M M 1 2 3 4 1000bp 750bp 500bp 1000bp 1 2 3 bp1 5 0 0 01 0 0 0 07 5 0 05 0 0 02 5 0 01 0 0 02 5 0? 啟動(dòng)子捕獲載體構(gòu)建 1 2 3 4 5 6 7 84500300022501500100075050025015000100007500 500025001000250bp bp1 2 3 4 51 5 0 0 01 0 0 0 07 5 0 05 0 0 02 5 0 01 0 0 02 5 04 5 0 03 0 0 02 2 5 01 5 0 01 0 0 07 5 05 0 02 5 0bp bpp U C 1 82 6 8 6 b pl a c ZA m p rC o l E 1 o r iS s p I N d e Ip E A S Y T 13 9 2 8 b pl a c Zf 1 o r iK m rA m p rp U C o r iK m r1 0 0 b p539。 339。S s p IN d e IE c o R VP C RS s p I a n d N d e IS s p I a n d N d e Ip U K M R3 3 4 9 b pA m p rK m rC o l E 1 o r iN d e IS s p IE c o R Vp r o m o t e r f r a g m e n t t
黨政相關(guān)相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1