植物組織培養(yǎng)第一章實驗室的設(shè)計于基本操作(編輯修改稿)
2025-02-18 00:03 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 ? 培養(yǎng)基的種類及其組成 ? 培養(yǎng)基 （ Medium） ： 植物組織培養(yǎng)離體材料賴以生存的 “ 土壤 ” ， 是外植體生長的營養(yǎng)物質(zhì) 。 ? 培養(yǎng)基種類： 基本培養(yǎng)基 、 完全培養(yǎng)基 。 ? 基本培養(yǎng)基組分： 大量元素 、 微量元素 ， 維生素和氨基酸 ， 糖和水 。 陳傳紅 制作 2022 / 5 ? 基本培養(yǎng)基最常用的有十幾種 ， 如： MS， 改良 MS，White， 改良 White， Nitsch， MT， N6， B5， NT，Blaydes等 。 ? 完全培養(yǎng)基： 在基本培養(yǎng)基上根據(jù)不同要求附加一些植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)以及其它的一些有機附加產(chǎn)物 。 ? 根據(jù)物理性質(zhì)分為： 固體和液體培養(yǎng)基 ， ? 固體培養(yǎng)基是在液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)上添加有凝固劑所致的 。 陳傳紅 制作 2022 / 5 培養(yǎng)基四種母液 （ 1） 大量元素 ： 其濃度大于 mol/L的植物必須需元素 。 他們占植物體干重的百分之幾十至萬分之幾 。 如：氧 、碳 、 氫 、 氮 、 鉀 、 磷 、 鎂 、 硫 、 鈣 。 （ 2） 微量元素 ： 其濃度小于 mol/L的植物所需的元素 。 如：硼 、 錳 、 鋅 、 鉬 、 銅 、 鈷 、 鐵 、 氯等 。 （ 3） 鐵鹽： 用 FeSO4 7H2O與 EDTA（ 乙二胺四乙酸二鈉 ） 配成的鰲合鐵 。 陳傳紅 制作 2022 / 5 （ 4） 有機成分 ① 維生素 ： 硫胺素 （ VB1） 、 吡哆醇 （ VB6） 、 煙酸（ VB3） 、 泛酸鈣 （ VB5） 、 生物素 （ VH） 、 鈷胺素（ VB12） 、 葉酸 （ VBc） 、 抗壞血酸 （ VC） 等等 ， 用量一般為 ～ 。 ? 是以各種輔酶的形式參與多項代謝活動 ， 對生長 、 分化等有很好的促進作用 。 ② 氨基酸 ： 甘氨酸 、 精氨酸 、 谷氨酸 、 谷酰氨 、 門冬氨酸 、 門冬酰氨 、 丙氨酸等 。 ? 常用水解酪蛋白和水解乳蛋白 ， 它們是含有約 20種氨基酸的混合物 ， 用量在 10～ 1000mg/l之間 。 陳傳紅 制作 2022 / 5 ③ 肌醇 （ 環(huán)已六醇 ） ： 它在糖的互相轉(zhuǎn)化中起作用 。 在適當(dāng)?shù)那闆r下使用 ， 能促進愈傷組織生長 、 胚狀體和芽的形成 。 用量為 50～100mg/l。 ④ 腺嘌呤及其硫酸鹽 ： 可促進芽的形成和生長 ， 難出芽的植物可試用 。 ⑤ 其它附加產(chǎn)物 ： 椰乳 、 香蕉 、 麥芽提取物 、 酵母提取物 、 馬鈴薯塊等 ， 它們對培養(yǎng)的某些植物的器官 、 組織或細(xì)胞有一定的促進生長的效應(yīng) 。 陳傳紅 制作 2022 / 5 （ 5） 其他 ? 糖 ： 糖作為碳源 ， 為細(xì)胞提供合成新化合物的 碳骨架 ， 為細(xì)胞的呼吸代謝提供底物與能源 ， 還用于維持一定的滲透勢 。 ? 常用的碳源： 蔗糖 ， 葡萄糖和果糖 也較常用 。 ? 糖的用量一般為 2～ 5％ 。 ? 瓊脂： 在固體培養(yǎng)時瓊脂是作為固化劑 。 ? 用量一般在 6～ 10 g/L 之間 。 陳傳紅 制作 2022 / 5 ① 生長素類 ? 主要生理作用： ⅰ 促進細(xì)胞伸長生長和細(xì)胞分裂； ⅱ 誘導(dǎo)受傷組織形成愈傷組織； ⅲ 促進生根 。 ⅳ 促進植物性別分化 ， 使形成的雌花雌株較多 。 ⅴ 防止落花 、 落果 。 ⅵ 促進無籽果實的形成等等 。 （ 6）植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì) 陳傳紅 制作 2022 / 5 ? 生長素類在組織培養(yǎng)中的作用 ? ⅰ 誘導(dǎo)愈傷組織； ? ⅱ 誘導(dǎo)根形成； ? ⅲ 與細(xì)胞分裂素配合使用，誘導(dǎo)不定芽的分 化，側(cè)芽的萌動與生長，以及胚狀體的形成等。 陳傳紅 制作 2022 / 5 ? 常用的種類有： ? 吲哚乙酸（ IAA）、吲哚丁酸（ IBA）、萘乙酸（ NAA）、 2， 4－二氯苯氧乙酸（ 2,4D）等。 ? 活性比較： 2， 4－ D﹥ IBA和 NAA ﹥ IAA。 ? 相同濃度下，以 IAA的相對活性為 1，則 NAA為 3～ 4，2， 4－ D則為 10～ 20。 ? 2， 4－ D的副作用較大，使用的濃度較窄，濃度高有毒害作用，同時有抑制芽的形成作用。 ? 一般在誘導(dǎo)愈傷組織時使用，而誘導(dǎo)分化階段則只使用 NAA和 IBA。 陳傳紅 制作 2022 / 5 ② 細(xì)胞分裂素類 主要生理作用 ： ? ⅰ 促進細(xì)胞分裂與擴大，可使莖增粗，而抑制莖伸長； ? ⅱ 誘導(dǎo)芽的分化，促進側(cè)芽萌發(fā)生長，當(dāng)組織內(nèi) 細(xì)胞分裂素 /生長素的比值高 時，誘導(dǎo)芽的分化，這時細(xì)胞分裂素起著主導(dǎo)作用； ? ⅲ 抑制衰老，可延緩衰老過程，有保鮮產(chǎn)效果。 陳傳紅 制作 2022 / 5 ? 常用的細(xì)胞分裂素有： ? 芐基腺嘌呤（ BA或 BAP ） ? 異戊烯基腺嘌呤（ 2ip） ? 糠基腺嘌呤（ KT） ? 玉米素（ ZT） 陳傳紅 制作 2022 / 5 ③ 赤霉素類 主要生理作用 ：
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