2007年研究生高級生化技術(編輯修改稿)
2025-02-15 09:10 本頁面
【文章內容簡介】 mmol/L KCl； 100~500mmol/LTrisHAC （ ） ；15~20mmol/L MgCl2（ 對 Taq酶的活性影響很大 ，一般濃度為 ~， 實際應用時根據反應體系的情況進行調整 。 ） ； %明膠或牛血清白蛋白 ? dd H2O 調節(jié)反應體積 ? 液體石蠟油 ? 影響 PCR的主要因素 ① PCR反應體系的各個組分 ② PCR循環(huán)的溫度 （ 預變性 、 變性 、 退火 、 延伸 ） ③ PCR循環(huán)的次數和平臺效應 ④ 操作環(huán)境 平臺效應及其原因 實驗三 核酸和蛋白紫外分光光度法定量測定 分光光度技術是利用物質特有的吸收光譜對其進行定性 、 定量分析的實驗技術 。 一、分光光度技術 光學光譜區(qū) 遠紫外 近紫外 可見 近紅外 中紅外 遠紅外 （真空紫外） 10nm~200nm 200nm ~380nm 380nm ~ 780nm 780 nm ~ ?m ?m ~ 50 ?m 50 ?m ~300 ?m 電磁波譜 氫燈 復合光 (陽光及鎢燈 ) 發(fā)射光譜 紅 橙 黃 綠 青 藍 紫 單色光 三棱鏡 可見光分光光度計光源 紫外分光光度計光源 高 低 二、有關光學原理 1. 吸收光譜 在光源和棱鏡之間放上某種物質的溶液， 光源發(fā)射光譜中某些波長的光因溶液吸收 而消失，這種被溶液吸收后的光譜稱為該 溶液的 吸收光譜 。 透射光 入射光 反射光 被物質吸收的光 光吸收基本定律 : Lam
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