基因操作工具ppt課件(編輯修改稿)
2025-02-15 09:09 本頁面
【文章內容簡介】 限制酶所識別的序列，無論是 6個堿基還是 4個堿基，都可以找到一條 中心軸線（如圖），中軸線兩側的雙鏈 DNA上的堿基是 反向、對稱、重復 排列的。 ? 想一想限制酶所識別的序列有什么特點？ ? 問：要想獲得某個特定性狀的基因必須要用限制酶切幾個切口？可產生幾個黏性末端？ （二）基因操作的工具 答：要切兩個切口，產生四個黏性末端。 ? 問：如果把兩種來源不同的 DNA用同一種限制酶來切割，會怎樣呢？ 答：會產生 相同的黏性末端 ，然后讓兩者的黏性末端 黏合 起來，就似乎可以合成 重組的DNA分子 了。 ? “ 分子縫合針” —— DNA連接酶 （二）基因操作的工具 ③ 類型： 類型 EcoliDNA連接酶 T4DNA連接酶 來源 功能 大腸桿菌 T4噬菌體 恢復 磷酸 二酯鍵 只能連接 黏性末端 能連接 黏性末端 和平末端 (效率較低 ) 相同點 差別 （二） “ 分子縫合針 ” —— DNA連接酶 根據(jù)酶的來源分為兩類： DNA聚合酶 DNA連接酶 區(qū)別 1 區(qū)別 2 相同點 尋根問底 ? DNA連接酶與 DNA聚合酶是一回事嗎 ?為什么 ? 1)只能將 單個核苷酸 連接到已有的核酸片段上，形成磷酸二酯鍵 形成 磷酸二酯鍵 1)在 兩個 DNA片段之間 形成磷酸二酯鍵 2)以 一條 DNA鏈為模板 ，將 單個核苷酸 通過磷酸二酯鍵 連接成一條互補的 DNA鏈 2)將 DNA雙鏈上的 兩個缺口同時連接 起來，不需要模板 可把黏性末端之間的 縫隙 “ 縫合 ” 起來， Ecoli DNA連接酶 或 T4DNA連接酶 即 恢復被限制酶切開的兩個核苷酸之間的 磷酸二酯鍵 DNA連接酶與 DNA聚合酶是一回事嗎？ T4 DNA連接酶 還可把 平末端之間的縫隙“縫合”起來，但效率較低 A A T T G C C T
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