微生物的遺傳變異和育種(11)(編輯修改稿)
2025-02-14 01:31 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 凡具有轉(zhuǎn)座作用的一段 DNA序列，稱轉(zhuǎn)座因子 包括原核生物中的插入序列 (is）、轉(zhuǎn)座子（ Tn)和 Mu噬菌體等轉(zhuǎn)座噬菌體。 轉(zhuǎn)座的過程及其中受體 DNA中靶序列的復制過程 ?自發(fā)突變 :指生物體在無人工干預下自然發(fā)生的低頻率突變。 ?自發(fā)突變的原因有： ①由背景輻射和環(huán)境因素引起， ②由微生物自身有害代謝產(chǎn)物引起， ③由 DNA復制過程中堿基配對錯誤引起。 (六）紫外線對 DNA的損傷及其修復 ?1．光復活作用 把經(jīng) UV照射后的微生物立即暴露于可見光下時，就可出現(xiàn)明顯降低其死亡率的現(xiàn)象，此即光復活作用。 ?切除修復 : 是一種不依賴可見光 、只通過酶切作用去除嘧啶二聚體 ,隨后重新合成一段正常DNA鏈的核酸修復方式 . 二、突變與育種 1．從生產(chǎn)中育種 正突變株 :指生產(chǎn)性狀優(yōu)于原株的產(chǎn)量突變株 定向培育 :是一種利用微生物的自發(fā)突變，并 采用特定的選擇條件，通過對微生物群體不斷移植以選育出較優(yōu)良菌株的古老方法。 例如 :卡介苗 （一）自發(fā)突變與育種 （二）誘變育種 ?誘變育種 :是指利用物理、化學等誘變劑處理均勻而分散的微生物細胞群，采用簡便、快速和高效的篩選方法，從中挑選出少數(shù)符合目的的突變株，以供使用。 1．誘變育種的基本環(huán)節(jié) ?(1)選擇簡便有效的誘變劑 物理因素 : A非電離輻射類的紫外線、激光和離子束等， B電離輻射的 X射線、丫射線和快中子等； 化學誘變劑 : 主要有烷化劑、堿基類似物和吖啶化合物 ?艾姆氏試驗 原理 ： 鼠傷寒沙門氏菌的組氨酸營養(yǎng)缺陷型（ his）菌株在基本培養(yǎng)基 []的平板上不能生長，如發(fā)生回復突變變成原養(yǎng)型（ his＋）后則能生長。 方法 大致是在含待測可疑“三致”物例如黃曲霉毒素、二甲氨基偶氮苯、“反應?！? 或二口惡口英等的試樣中，加入鼠肝勻漿液，經(jīng)一段時間保溫后，吸人濾紙片中，然后將濾紙片放置于上述平板中央。 經(jīng)培養(yǎng)后，出現(xiàn) 3種情況 ： ①在平板上無大量菌落產(chǎn)生，說明試樣中不含誘變劑； ②在紙片周圍有一抑制圈，其外周出現(xiàn)大量菌落，說明試樣中有某種高濃度的誘變劑存在； ③在紙片周圍長有大量菌落，說明試樣中有濃度適當?shù)恼T變劑存在。 艾姆斯試驗法檢測致癌物示意圖 (2）挑選優(yōu)良的出發(fā)菌株 ?用于育種的原始菌株， (3)處理單細胞或單孢子懸液 （ 4） 選用最適的誘變劑量 (5)充分利用復合處理的協(xié)同效應 (6）利用和創(chuàng)造形態(tài)、生理與產(chǎn)量間的相關指標 (7)設計高效篩選方案 (8）創(chuàng)造新型篩選方法 3. 3類突變株的篩選方法 ?（ 1）產(chǎn)量突變株的篩選 (2)抗藥性突變株的篩選 (3)營養(yǎng)缺陷型突變株的篩選 ?基本培養(yǎng)基 （ MM，符號為 []）：僅能滿足某微生物的野生型菌株生長所需要的最低成分的組合培養(yǎng)基，稱基本培養(yǎng)基。 完全培養(yǎng)基 （ CM,符號為 [＋ ]）：凡可滿足一切營養(yǎng)缺陷型菌株營養(yǎng)需要的天然或半組合培養(yǎng)基，稱完全培養(yǎng)基。 補充培養(yǎng)基 （ SM 。符號為 [A]或 [B]等）：凡只能滿足相應的營養(yǎng)缺陷型突變株生長需要的組合或半組合培養(yǎng)基，稱補充培養(yǎng)基。 ① 有關的 3類培養(yǎng)基： ② 與營養(yǎng)缺陷型突變有關的 3類遺傳型個體： ?野生型 ：指從自然界分離到的任何微生物在其發(fā)生人為營養(yǎng)缺陷突變前的原始菌株。 營養(yǎng)缺陷型 ：野生型菌株經(jīng)誘變劑處理后，由于發(fā)生了喪失某酶合成能力的突變，因而只能在加有該酶合成產(chǎn)物的培養(yǎng)基中才能生長，這類突變菌株稱為營養(yǎng)缺陷型突變株，或簡稱營養(yǎng)缺陷型。 原養(yǎng)型 ：一般指營養(yǎng)缺陷型突變株經(jīng)回復突
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