細(xì)胞生物學(xué)研究方法4學(xué)時(shí)(編輯修改稿)
2025-02-12 20:19 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 ? 滲透、包埋 ? 超薄切片 厚度 4050nm ? 染色 電鏡的實(shí)際分辨率與切片厚度有關(guān) 負(fù)染色技術(shù) Negative staining ? 負(fù)染色 是用重金屬鹽對(duì)鋪展在載網(wǎng)上的樣品進(jìn)行染色 ， 吸去多余染料 ， 樣品經(jīng)自然干燥后 ，整個(gè)載網(wǎng)上都鋪上了一薄層重金屬鹽 ， 從而襯托出樣品的精細(xì)結(jié)構(gòu) 。 Figure 329. Electron micrograph of negatively stained actin filaments. Each filament is about 8 nm in diameter and is seen, on close inspection, to be posed of a helical chain of globular actin molecules. (Courtesy of Roger Craig.) ? 亦稱冰凍斷裂， 主要 用來觀察膜斷裂面的蛋白質(zhì)顆粒和膜表面結(jié)構(gòu) 。 冷凍蝕刻電鏡技術(shù) Freeze Etching electron microscopy 掃描電子顯微鏡 scanning electron microscope, SEM ? 20世紀(jì) 60年代問世， 用來觀察標(biāo)本的表面結(jié)構(gòu) ? 目前掃描電鏡的分辨力為 6~10 nm。 Figure 323. Scanning electron microscopy. Scanning electron micrograph of the stereocilia projecting from a hair cell in the inner ear of a bullfrog (A). For parison, the same structure is shown by differentialinterferencecontrast light microscopy (B) and by thinsection electron microscopy (C). 三、掃描隧道顯微鏡 scanning tunneling microscope, STM ? Binnig和 Rohere 1981年發(fā)明，1986年獲獎(jiǎng)； ? 可觀察到原子級(jí)的圖像。 A. Xray crystallography X射線衍射 B. NMR spectroscopy 核磁共振成像 第二節(jié) 細(xì)胞組分的分析方法 一、用離心技術(shù)分離細(xì)胞器與生物大分子 ? 普通離心機(jī)：轉(zhuǎn)速 ≦ 25000 r/min ? 超速離心機(jī)： ≧ 30000 r/min ? 在密度均一的介質(zhì)中由低速到高速逐級(jí)離心，用于分離不同大小的細(xì)胞和細(xì)胞器 。 差速離心 differential centrifugation ? 細(xì)胞器沉降順序：核、線粒體、溶酶體與過氧化物酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高基體。 密度梯度離心 density gradient centrifugation ? 用介質(zhì)在離心管內(nèi)形成連續(xù)或不連續(xù)的密度梯度，細(xì)胞混懸液或勻漿置于介
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