核酸的序列分析ppt課件(編輯修改稿)
2025-02-10 22:12 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 9。2 + 5 1 + 43 + 67 + 8dddddddddd ddddddAGCTAAAGGTACGGGAATTTCGCG 5’ 3’ 添加 DNA polymerase 所有 4 dNTPs 其中一種標記的 ddNTP ddTTP ddCTP ddGTP ddATP 在四個不同的反應管中各只包含一種 ddNTP. AGCTAAAGGTACGGGAATTTCGCG 5’ 3’ T TCGAT TCGATT TCGATTT TC TCGATTTC TCGATTTCC TCG TCGA T reaction C reaction G reaction A reaction 每一管中的復制的序列都停留在 ddNTPs 處 5’ 反應終止后，四個反應管中的反應混合液分別進行聚丙烯酰胺凝膠電泳分離 . 這四個反應管中延伸的寡核苷酸僅相差一個堿基 . 電泳結(jié)構(gòu)通過顯色指示 . T C G A 3’ C C T T T A G C T 5’ 化學裂解 法 是 Maxam和 Gilbert等人 1977年創(chuàng)建的，用來測定 DNA序列。 化學法是用化學試劑在A、 G、 C、 T處特定地裂解 DNA片段，產(chǎn)生一簇各種長度的短鏈（等差數(shù)列 n=1），經(jīng)過 PAGE和放射自顯影后，可以直接讀出 DNA的順序。 一、化學裂解法測序的原理 用放射性核素標記待測 DNA一側(cè)末端 將標記 DNA分為 G、 A+G、 C+T、 C 4個反應體系 用不同的化學試劑處理不同反應體系，隨機斷裂 DN
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