生物物理學的內(nèi)容(編輯修改稿)
2024-11-22 16:40 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 的小分子 藻膽蛋白 phycobiliprotein 綠色熒光蛋白 Green Fluorescent Protein (4) 與研究對象的特定基團共價結(jié)合或與蛋白質(zhì)非共價 結(jié)合 （ 5）熒光探針的應用分類 測定細胞活性的熒光探針：活細胞探針和死細胞探針 膜熒光探針：熒光基團標記的磷脂，陰離子膜探針，陽離子膜探針， 其它非極性和雙親性膜探針。 細胞器熒光探針：線粒體探針，溶酶體、酵母菌液泡和其它酸性細胞器的探針 Ca2＋ ， Mg2＋ ， Zn2＋ ， Na＋ ， K＋ ， Cl－ 等離子熒光探針 pH熒光探針 : 近中性 pH應用的探針，酸性，探針交聯(lián)物 活性氧和一氧化氮探針 信號轉(zhuǎn)導探針：蛋白激酶，蛋白磷酸酶和核苷酸結(jié)合蛋白探針 入胞作用、受體和離子通道探針 pH 細胞形態(tài)和流體測量的熒光示蹤劑 細胞骨架蛋白熒光探針 四 熒光生色團的結(jié)構(gòu)特點 1 天然熒光生色團的結(jié)構(gòu)特點 （ 1）碳原子骨架： 分子具有共軛雙鍵體系，大多含有芳香環(huán)或雜環(huán) 任何有利于提高 π電子共軛度的結(jié)構(gòu)改變，都將提高 熒光效率。 例如：對苯基化，間苯基化等。 （ 2）分子的幾何排布： 具有剛性平面結(jié)構(gòu) COOCOO HH OH HCOCOO HH O 熒光素 酚酞 四 熒光生色團的結(jié)構(gòu)特點 （ 4）取代基的位置： 鄰位、對位 — 熒光增強，間位 — 熒光減弱（ CN基例 外） (5)環(huán)境、溶劑、溫度及 pH等均會影響分子結(jié)構(gòu)，從而影響熒光 四 熒光生色團的結(jié)構(gòu)特點 （ 3）取代基的類型： （ 1）加強熒光的基團：給電子取代基， NH2, NHR, OH,OR, CN,OCH3,OC2H5 （ 2）減弱熒光的基團：得電子取代基， CO2H,COOH,C=O,NO2,NO,SH,F,Cl,Br,I （ 3）影響不明顯的基團： R,SO3H,NH3 2 蛋白質(zhì)和核酸中的熒光生色團 Tryptophan (W, Trp) Phenylalanine (F, Phe) Tyrosine (Y, Tyr) 四 熒光生色團的結(jié)構(gòu)特點 生色團 條件 ?ex nm ?max 103 ?em nm ?F ?F ns 敏感度?max?F 102 Trp H2O,pH7 280 348 11 Tyr H2O,pH7 274 303 Phe H2O,pH7 257 282 Ybase Yeas tRNAPhe 320 460 亞硝基奈酚 +Tyr 茚三酮（ Cu2+,)+Phe ?ex:460nm, ?em:570nm ?ex:365nm, ?em:515nm 四 熒光生色團的結(jié)構(gòu)特點
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