對化學(xué)性肝損傷有輔助保護(hù)功能的保健品(編輯修改稿)
2025-02-09 21:46 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 草轉(zhuǎn)氨酶（ AST）的測定 測定方法 可選用全自動生化分析儀或賴氏法（試劑盒）測定。 數(shù)據(jù)處理和結(jié)果判定 采用方差分析，但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗，方差齊，計算 F值， F值 ,結(jié)論：各組均數(shù)間差異無顯著性； F值≥,P≤, 用多個實驗組和一個對照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計；對非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)或方差齊要求后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計；若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗進(jìn)行統(tǒng)計。 受試樣品組的 ALT、 AST與模型對照組比較，差異有顯著性，可分別判定 ALT、 AST結(jié)果陽性。 5. 肝臟病理組織學(xué)變化、診斷標(biāo)準(zhǔn)和結(jié)果判定 實驗材料 取大鼠肝臟左葉用 10%福爾馬林固定，從肝左葉中部做橫切面取材，常規(guī)病理制片（石蠟包埋，）。 鏡檢 從肝臟的一端視野開始記錄細(xì)胞的病理變化，用 40倍物鏡連續(xù)觀察整個組織切片?？梢娦∪~中心性肝細(xì)胞的退行性病變和少數(shù)細(xì)胞壞死。主要病變類型有肝細(xì)胞氣球樣變、脂肪變性、胞漿凝聚、肝細(xì)胞水樣變性和細(xì)胞壞死等。 評分標(biāo)準(zhǔn)： 分別記錄每個視野中的各種病變所占視野的面積，并累計所觀察視野的病變總分。 肝細(xì)胞氣球樣變 ,（細(xì)胞腫大 ,胞漿殘留少許） 大致正常 0分 氣球樣變的肝細(xì)胞占整個視野的 1/4 1分 氣球樣變的肝細(xì)胞占整個視野的 1/2 2分 氣球樣變的肝細(xì)胞占整個視野的 3/4 3分 氣球樣變的肝細(xì)胞占整個視野 4分 肝細(xì)胞脂肪變性：（肝細(xì)胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)界限清晰脂滴空泡） 大致正常 0分 脂肪變性的肝細(xì)胞占整個視野的 1/4 1分 脂肪變性的肝細(xì)胞占整個視野的 1/2 2分 脂肪變性的肝細(xì)胞占整個視野的 3/4 3分 脂肪變性的肝細(xì)胞占整個視野 4分 胞漿凝聚：（胞漿嗜伊紅增強(qiáng)） 大致正常 0分 胞漿凝聚的肝細(xì)胞占整個視野的 1/4 1分 胞漿凝聚肝細(xì)胞占整個視野的 1/2 2分 胞漿凝聚的肝細(xì)胞占整個視野的 3/4 3分 胞漿凝聚 的肝細(xì)胞占整個視野 4分 水樣變性： 未見水樣變性的肝細(xì)胞 0分 水樣變性的肝細(xì)胞占整個視野的 1/4 1分 水樣變性的肝細(xì)胞占整個視野的 1/2 2分 水樣變性的肝細(xì)胞占整個視野的 3/4 3分 水樣變性的肝細(xì)胞占整個視野 4分 肝細(xì)胞壞死：（胞漿嗜伊紅變，凝固性壞死） 未見壞死細(xì)胞 0分 散在個別細(xì)胞占整個視野的 1/4 1分 壞死細(xì)胞占整個視野的 2/4 2分 壞死細(xì)胞占整個視野的 3/4 3分 壞死細(xì)胞彌漫性存在占整個視野 4分 數(shù)據(jù)處理和病理結(jié)果判定 采用方差分析，但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗，方差齊，計算 F值， F值 ,結(jié)論：各組均數(shù)間差異無顯著性； F值≥,P≤, 用多個實驗組和一個對照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計；對非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)或方差齊要求后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計；若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗進(jìn)行統(tǒng)計。 （ 1）受試樣品任何一個劑量組與模型對照組之間，氣球樣變、脂肪變性、胞漿凝聚、水樣變性或肝細(xì)胞壞死等肝細(xì)胞病變中，肝細(xì)胞壞死程度減輕，差異有顯著性，而其它病變類型與模型對照組比較明顯減輕或無明顯差異，可判斷動物實驗病理結(jié)果陽性。 （ 2）受試樣品任何一個劑量組與模型對照組之間，氣球樣變、脂肪變性、胞漿凝聚、水樣變性這四種肝細(xì)胞病變類型加重和減輕同時存在，差異有顯著性，且肝細(xì)胞壞死程度減輕，差異有顯著性，則可將其各種病理變化的得分相加，肝細(xì)胞壞死評分 2倍計入，以總分進(jìn)行統(tǒng)計分析，若差異有顯著性，可判斷動物實驗病理結(jié)果陽性。 6 結(jié)果判斷 在模型成立的前提下， ALT、 AST兩項血液生化指標(biāo)果為中任何一項和病理結(jié)陽性，可判定受試樣品對化學(xué)性肝損傷有輔助保護(hù)作用。 ?方案二：酒精肝損傷模型 機(jī)體大量攝入乙醇后，在乙醇脫氫酶的催化下大量脫氫氧化，使三羧循環(huán)障礙和脂肪酸氧化減弱而影響脂肪代謝，致使脂肪在肝細(xì)胞內(nèi)沉積。同時乙醇能激活氧分子，產(chǎn)生氧自由基導(dǎo)致肝細(xì)胞膜的脂質(zhì)過氧化及體內(nèi)還原型谷胱甘肽的耗竭。 2. 實驗動物 成年小鼠或大鼠，單一性別，大鼠（ 180－ 220克），每組 812只，小鼠（ 18－ 22克），每組 1015只。 3. 實驗方法和步驟 劑量分組及受試樣品給予時間 實驗設(shè)三個劑量組和一個空白對照組和一個模型對照組，以人體推薦量的 10倍（小鼠）或 5倍（大鼠）為其中的一個劑量組，另設(shè)二個劑量組，必要時設(shè)陽性對照組。 用無水乙醇（分析純）造成肝損傷模型，無水乙醇濃度為 50％（以蒸餾水稀釋），小鼠灌胃量 12－ 14mL/kgBW (折合乙醇的劑量為 600
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