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正文內(nèi)容

安捷倫1260高效液相色譜培訓(xùn)(編輯修改稿)

2025-02-08 16:57 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 管柱(微柱)內(nèi)徑 ~ d、半制備柱,內(nèi)徑 5mm。 e、實(shí)驗(yàn)室制備柱,柱長 10 ~ 30cm,內(nèi)徑 20 ~ 40mm f、生產(chǎn)制備柱,內(nèi)徑可達(dá)幾十厘米。 注: 一般在分離前備有一個(gè)前置柱,前置柱內(nèi)填充物和分離柱完全一樣,這樣可使淋洗溶劑由于經(jīng)過前置柱為其中的固定相飽和,使它在流過分離柱時(shí)不再洗脫其中固定相,保證分離技的性能不受影響 。 色譜柱的使用和注意事項(xiàng) A、避免溫度和壓力的急劇變化及任何機(jī)械振動(dòng)。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下會(huì)影響柱內(nèi)的填充情況;柱壓突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料,因此在調(diào)節(jié)流量時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行,在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過緩。 B、應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┙M成,特別是反相色譜中,不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改為全部是水,反之亦然。 C、一般情況下色譜柱不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí),才可以反沖除去柱內(nèi)雜質(zhì),否則反沖會(huì)迅速降低柱效。 D、選擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是 PH值),以避免固定相被破壞。有時(shí)候可以在進(jìn)樣器前面連接一預(yù)柱,分析柱是鍵合硅膠,預(yù)柱為硅膠,可是流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠飽和,避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。 E、避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接進(jìn)入柱內(nèi), 需要對樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一個(gè)保護(hù)柱,保護(hù)柱一般是填有固定相的短柱,保護(hù)柱可以經(jīng)常更換。 F、經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱,清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì) G、保存色譜柱時(shí)應(yīng)將色譜柱中充滿乙腈或甲醇,柱接頭擰緊,防止溶劑會(huì)發(fā)干。絕對禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi),靜置過夜或更長時(shí)間。 H、色譜柱使用過程中,如果壓力升高,可能的原因有:色譜柱進(jìn)口過濾芯被污染、沖洗閥過濾芯被污染、色譜柱被污染、連接管路的毛細(xì)管堵塞、進(jìn)樣器轉(zhuǎn)子上的凹槽被污染、進(jìn)樣針或針座被堵塞。若發(fā)現(xiàn)壓力升高,進(jìn)行分段檢查,排除故障。 四.檢測系統(tǒng) 在液相色譜中,有兩種基本類型的檢測器。一類是 溶質(zhì)性檢測器 ,它僅對被分離組分的物理或化學(xué)特性有響應(yīng),屬于這類檢測器的有 紫外、熒光、電化學(xué)檢測器等 。另一類是 總體檢
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