期末考試答題冊(cè)word版(編輯修改稿)
2025-02-07 01:49 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 DNA鏈才能被 DNA連接酶催化成磷酸二酯鍵。 DNA 聚合酶 真核細(xì)胞有 5 種 DNA 聚合酶，分別為 DNA 聚合酶α (定位于胞核，參與復(fù)制引發(fā)具 539。－ 339。外切酶活性 )，β (定位于核內(nèi)，參與修復(fù)，具 539。－ 339。外切酶活性 )，γ (定位于線(xiàn)粒體，參與線(xiàn)粒體復(fù)制具 539。－ 339。和 339。－ 539。外切活性 )，δ (定位核，參與復(fù)制，具有 339。－ 539。和 539。－ 339。外切活性 )，ε (定位于核，參與損傷修復(fù)，具有 339。－ 539。和 539。－ 339。外切活性 )。 原核細(xì)胞有 3 種 DNA 聚合酶，都與 DNA 鏈的延長(zhǎng)有關(guān)。 常用載體包括 （ 1）目的基因克隆載體：其功能是保存和克隆目的基因。與微 物基因工程相似，通常是由多拷貝的 E. Coli小質(zhì)粒為載體。 （ 2）中間克隆載體：是構(gòu)建中間表達(dá)載體的基礎(chǔ)質(zhì)粒。是由大腸桿菌質(zhì)粒插入TDNA片段、目的基因和標(biāo)記基因等構(gòu)建而成。 （ 3）中間表達(dá)載體：是含有植物特異啟動(dòng)子的中間載體。是構(gòu)建轉(zhuǎn)化載體的質(zhì)粒。 （ 4）卸甲載體：是解除武裝的 Ti質(zhì)?；?Ri質(zhì)粒，是構(gòu)建轉(zhuǎn)化載體的受體質(zhì)粒。 （ 5）植物基因轉(zhuǎn)化載體：是最后用于目的基因?qū)酥参锛?xì)胞的載體，亦稱(chēng)工程載 體。 (2）甾醇類(lèi)轉(zhuǎn)錄因子與鋅指蛋白類(lèi)轉(zhuǎn)錄因子的區(qū)別是什么？ 甾醇類(lèi)受體轉(zhuǎn)錄因子與鋅結(jié)合的保守序列不同于鋅指蛋白，參與轉(zhuǎn)錄激活與 DNA和激素結(jié)合分別由不同的結(jié)構(gòu)域完成。 類(lèi)固醇受體與鋅以 Cys— Cys— Cys— Cys 基序相結(jié)合，而鋅指蛋白使用 Cys—CysHis— His 基序。 3） 已有基因組研究表明一種生物的基因組中的基因的總數(shù)與這種生物能表達(dá)的各種蛋白質(zhì)的總數(shù)是不等的。一般而言，是基因數(shù)多，還是蛋白質(zhì)數(shù)多？為什么，舉例說(shuō)明。 基因多在真核生物中，一個(gè)編碼區(qū)包括多個(gè)內(nèi)含子和外顯子，一般情況下，在斷裂基因初級(jí) 轉(zhuǎn)錄本的剪接中，總是把所有的內(nèi)含子剪掉，然后將外顯子依次地連接起來(lái)。因此，一種斷裂基因只能產(chǎn)生一種 成熟的 mRNA，合成一種多肽。但后 來(lái)發(fā)現(xiàn)許多斷裂基因在其轉(zhuǎn)錄本剪接中，通過(guò)不同的剪接方式從一個(gè)基因產(chǎn)生多種不同的多肽或蛋白質(zhì)。生物體通過(guò)這種選擇性剪接 (alternative splicing)來(lái)調(diào)控基因的表達(dá)，產(chǎn)生不同的蛋白質(zhì)以適應(yīng)不同的環(huán)境需要。 選擇性剪接的原理是這樣的：在某個(gè)組織里是利用某些外顯子，而在另一組織里，可能選擇另外一些外顯子來(lái)組成成熟的 mRNA，或者，某些內(nèi)含子并不剔除而是被當(dāng)作外顯子，這樣就可能產(chǎn)生了完全不同的 mRNA 和蛋白質(zhì)，甚至打破了內(nèi)含子與外顯子的界定，從而產(chǎn)生不同的蛋白質(zhì)。選 擇性剪接實(shí)際上是在內(nèi)含子 /外顯子水平上對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控。 大部分高等真核基因通過(guò)這種選擇性剪接方式產(chǎn)生多種蛋白質(zhì)，例如在小鼠淀粉酶基因 (amylase gene)中有兩個(gè)啟動(dòng)子，其間相隔約2850bp，以及 4 個(gè)外顯子。在唾腺 (salivary gland)細(xì)胞中，第一個(gè)啟動(dòng)子被使用，在最終轉(zhuǎn)錄物 (mRNA)中，外顯子 L 被剪切掉，留下 S、 2 和 3 三個(gè)外顯子。然而在肝 (liver)細(xì)胞中，使用的是第二個(gè)啟動(dòng)子，因而外顯子 S 與被排除在外，結(jié)果肝細(xì)胞中的 mRNA 含有 L、 2 和 3 三個(gè)外顯子。選擇性剪接也可以利用同一個(gè)啟 動(dòng)子產(chǎn)生兩種不同的蛋白質(zhì)。例如大鼠肌細(xì)胞中兩種不同形式肌鈣蛋白T(troponin T)α，β的產(chǎn)生就是如此。基因中有 5 個(gè)外顯子，但在每種肌鈣蛋白中僅含有其中的 4 個(gè)。 4） 從分子水平解釋?duì)耸删w的 裂解周期和溶源性。 在λ噬菌體發(fā)育中有兩個(gè)可調(diào)控階段，溶原化周期和裂解周期，而這兩個(gè)周期是相互連系的。當(dāng)λ DNA 進(jìn)入新的宿主細(xì)胞時(shí)裂解和溶原化的途徑并存。早早期和晚早期的基因都需要表達(dá)。然后就要分化了：若晚期基因得到表達(dá)
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