【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 描電子顯微鏡可用于（ ）。 A、獲得細(xì)胞不同切面的圖像 B、觀察活細(xì)胞 C、定量分析細(xì)胞中的化學(xué)成分 D、觀察細(xì)胞表面的立體 形貌 1建立分泌單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞是通過(guò)下列技術(shù)構(gòu)建立（ ）。 A、細(xì)胞融合 B、核移植 C、病毒轉(zhuǎn)化 D、基因轉(zhuǎn)移 1適于觀察無(wú)色透明活細(xì)胞微細(xì)結(jié)構(gòu)的光學(xué)顯微鏡是（ ）。 A相差顯微鏡 B、暗視野顯微鏡 C、普通光學(xué)顯微鏡 D、偏振光學(xué)顯微鏡 1動(dòng)物細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下生長(zhǎng)情況是（ ）。 A、能無(wú)限增殖 B、不能增殖分裂很快死亡 C、經(jīng)過(guò)有限增殖后死亡 D、一般進(jìn)行有限增殖后死亡，但 少數(shù)情況下某些細(xì)胞發(fā)生了遺傳突變，獲得無(wú)限增殖能力 1細(xì)胞融合首先采用的技術(shù)是（ ）介導(dǎo)的融合。 A、化學(xué)試劑 B、病毒 C、電融合 D、融合儀 1細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，要保持細(xì)胞原來(lái)染色體的二倍體數(shù)量，最多可傳代培養(yǎng)（ ）代。 A、 10~20 B、 40~50 C、 20~30 D、90~100 正常細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基中常需加入血清，主要是因?yàn)檠逯泻校? ）。 A、氨基酸 B、核酸 C、生長(zhǎng)因子 D、維生素 2 cDNA 是指（ ）。 A、細(xì)菌環(huán)狀的 DNA 分子 B、質(zhì)粒環(huán)狀的 DNA 分子 C、 tRNA 的 DNA 拷貝 D、 mRNA 的 DNA 拷貝 2在雜交瘤技術(shù)中，篩選融合細(xì)胞時(shí)常選用的方法是（ ）。 A、密度梯度離心法 B、熒光標(biāo)記的抗體和流式細(xì)胞術(shù) C、采用在選擇培養(yǎng)劑中不能存活的缺陷型瘤系細(xì)胞來(lái)制作融合細(xì)胞 D、讓未融合的細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中自然死亡 2動(dòng)物的正常細(xì)胞在體外培養(yǎng)條件下的生 長(zhǎng)行為是（ ）。 A、能無(wú)限增殖 B、在有充分營(yíng)養(yǎng)條件下，能無(wú)限增殖 C、不能無(wú)限增殖，其增殖代數(shù)與物種和供體年齡有關(guān) 2從胎兒肺得到的成纖維細(xì)胞可在體外條件下傳 50 代，而從成人肺得到的成纖維細(xì)胞可在體外條件下傳 20 代，這主要是因?yàn)椋? ）。 A、胎兒的肺成纖維細(xì)胞沒有完全分化 B、體內(nèi)細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境在胎兒和成人不同 C、成人的肺成纖維細(xì)胞受到凋亡因子的影響 D、細(xì)胞增殖能力是受到年齡限制的 2在普通光鏡下可以觀察到的細(xì)胞結(jié)構(gòu)是（ ）。 A、核孔 ? ?? B、核仁 ?? C、溶酶體 ?? D、核糖體 ?? 四、判斷題 亞顯微結(jié)構(gòu)就是超微結(jié)構(gòu)。（ ） 光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡的差別在于后者的放大倍數(shù)遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于前者，所以能看到更小的細(xì)胞結(jié)構(gòu)。（ ） 熒光顯微鏡技術(shù)是在光鏡水平，對(duì)特異性蛋白質(zhì)等大分子定性定位的最有力的工具。廣泛用于測(cè)定細(xì)胞和細(xì)胞器中的核酸、氨基酸、蛋白質(zhì)等。（ ） 生物樣品的電子顯微鏡分辨率通常是超薄切片厚度的十分之一，因而切得越薄，照片中的反差越強(qiáng)，分辨率也越高。（ ） 細(xì)胞株是指 在體外培養(yǎng)的條件下，細(xì)胞發(fā)生遺傳突變且?guī)в邪┘?xì)胞特點(diǎn)，有可能無(wú)限制地傳下去的傳代細(xì)胞。（ ） 透射或掃描電子顯微鏡不能用于觀察活細(xì)胞，而相差或倒置顯微鏡可以用于觀察活細(xì)胞。（ ） 酶標(biāo)抗體法是利用酶與底物的特異性反應(yīng)來(lái)檢測(cè)底物在組織細(xì)胞中的存在部位。（ ） 光鏡和電鏡的切片均可用載玻片支持。（ ） 體外培養(yǎng)的細(xì)胞，一般仍保持機(jī)體內(nèi)原有的細(xì)胞形態(tài)。（ ） 細(xì)胞凍存與復(fù)蘇的基本原則是快凍慢融。（ ） 1多莉的培育成功說(shuō)明動(dòng)物的體細(xì)胞都是全能的。（ ） 五、簡(jiǎn)答題 超薄切片的樣品制片過(guò)程包括哪些步驟？ 熒光顯微鏡在細(xì)胞生物學(xué)研究中有什么應(yīng)用？ 比較差速離心與密度梯度離心的異同。 為什么電子顯微鏡不能完全替代光學(xué)顯微鏡？ 相差顯微鏡在細(xì)胞生物學(xué)研究中有什么應(yīng)用？ 比較放大率與分辨率的含義。 掃描隧道顯微鏡具有哪些特點(diǎn)？ 六、論述題 試比較電子顯微鏡與光學(xué)顯微鏡的區(qū)別。 七、翻譯 cell line cell strain cell culture cell engineering cell fusion primary culture cell subculture cell monoclonal antibody、 第三章參考答案 一、名詞解釋 分辨率：區(qū)分開兩個(gè)質(zhì)點(diǎn)間的最小距離。 細(xì)胞培養(yǎng)：把機(jī)體內(nèi)的組織取出后經(jīng)過(guò)分散（機(jī)械方法或酶消化）為單個(gè)細(xì)胞，在人工培養(yǎng)的條件下，使其生存、生長(zhǎng)、繁殖、傳代，觀察其生長(zhǎng)、繁殖、接觸抑制、衰老等生命現(xiàn)象的過(guò)程。 細(xì)胞系：在體外培養(yǎng)的條件下，有的細(xì)胞發(fā)生了遺傳突變，而且?guī)в邪┘?xì)胞特點(diǎn)，失去接觸抑制，有可能 無(wú)限制地傳下去的傳代細(xì)胞。 細(xì)胞株：在體外一般可以順利地傳 40― 50 代，并且仍能保持原來(lái)二倍體數(shù)量及接觸抑制行為的傳代細(xì)胞。 原代細(xì)胞培養(yǎng)：直接從有機(jī)體取出組織，通過(guò)組織塊長(zhǎng)出單層細(xì)胞，或者用酶消化或機(jī)械方法將組織分散成單個(gè)細(xì)胞，在體外進(jìn)行培養(yǎng)，在首次傳代前的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。 傳代細(xì)胞培養(yǎng)：原代培養(yǎng)形成的單層培養(yǎng)細(xì)胞匯合以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)（即將細(xì)胞從一個(gè)培養(yǎng)器皿中以一定的比率移植至另一些培養(yǎng)器皿中的培養(yǎng)），否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或由于細(xì)胞密度過(guò)大引起營(yíng)養(yǎng)枯竭，將影響細(xì)胞的生長(zhǎng)，這一分離培 養(yǎng)稱為傳代細(xì)胞培養(yǎng)。 細(xì)胞融合：兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞融合成一個(gè)雙核細(xì)胞或多核細(xì)胞的現(xiàn)象。一般通過(guò)滅活的病毒或化學(xué)物質(zhì)介導(dǎo)，也可通過(guò)電刺激融合。 單克隆抗體：通過(guò)克隆單個(gè)分泌抗體的 B 淋巴細(xì)胞，獲得的只針對(duì)某一抗原決定簇的抗體，具有專一性強(qiáng)、能大規(guī)模生產(chǎn)的特點(diǎn)。 二、填空題 光學(xué)放大系統(tǒng)，照明系統(tǒng)，機(jī)械和支架系統(tǒng)；光源的波長(zhǎng)，物鏡的鏡口角，介質(zhì)折射率。 紫外光；電子束。 物鏡和照明系統(tǒng)的位置顛倒。 透射電鏡，掃描電鏡。 固定，包埋，切片，染色。 超速離心法，層析法，電泳法。 差速離 心法，密度梯度離心法。 電磁，玻璃。 （小鼠骨髓）瘤細(xì)胞， B 淋巴細(xì)胞；單克隆抗體。 相差顯微鏡；暗視野顯微鏡；冰凍蝕刻。 1成纖維樣細(xì)胞，上皮樣細(xì)胞。 三、選擇題 A， B， A， C， C， A， A， B， C， C， 1 D， 1 A， 1 B， 1 D， 1 A， 1 A， 1 C， 1 B， 1 B， C，2 D、 2 C， 2 C， 2 D， 2 D。 四、判斷題 √， √， √， 1 五、簡(jiǎn)答題 超薄切片的樣品制片過(guò)程包括哪些步驟？ 答案要點(diǎn)：固定，包埋，切片，染色。 熒光顯微鏡在細(xì)胞生物學(xué)研究中有什么應(yīng)用？ 答案要點(diǎn)：熒光顯微鏡是以紫外線為光源，照射被檢物體發(fā)出熒光，在顯微鏡下觀察形狀及所在位置，圖像清晰，色彩逼真。 熒光顯微鏡可以觀察細(xì)胞內(nèi)天然物質(zhì)經(jīng)紫外線照射后發(fā)熒光的物質(zhì)（如葉綠體中的葉綠素能發(fā)出血紅色熒光）；也可觀察誘發(fā)熒光物質(zhì)（如用丫啶橙染色后，細(xì)胞中 RNA 發(fā)紅色熒光， DNA 發(fā)綠色熒光），根據(jù)發(fā)光部位，可以定位研究某些物質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的變化情況。 比較差速離 心與密度梯度離心的異同。 答案要點(diǎn)：二者都是依靠離心力對(duì)細(xì)胞勻漿懸浮扔中的顆粒進(jìn)行分離的技術(shù)。差速離心是一種較為簡(jiǎn)便的分離法，常用于細(xì)胞核和細(xì)胞器的分離。因?yàn)樵诿芏染坏慕橘|(zhì)中，顆粒越大沉降越快，反之則沉降較慢。這種離心方法只能將那些大小有顯著差異的組分分開，而且所獲得的分離組分往往不很純；而密度梯度離心則是較為精細(xì)的分離手段，這種方法的關(guān)鍵是先在離心管中制備出蔗糖或氯化銫等介質(zhì)的濃度梯度并將細(xì)胞勻漿裝在最上層，密度梯度的介質(zhì)可以穩(wěn)定沉淀成分，防止對(duì)流混合，在此條件下離心，細(xì)胞不同組分將以不同速率沉降并形成 不同沉降帶。 為什么電子顯微鏡不能完全替代光學(xué)顯微鏡？ 答案要點(diǎn)：電子顯微鏡用電子束代替了光束，大大提高了分辨率，電子顯微鏡相對(duì)光學(xué)顯微鏡是個(gè)飛躍。但是電子顯微鏡：樣品制備更加復(fù)雜；鏡筒需要真空，成本更高；只能觀察“死”的樣品，不能觀察活細(xì)胞。光學(xué)顯微鏡技術(shù)性能要求不高，使用容易；可以觀察活細(xì)胞，觀察視野范圍廣，可在組織內(nèi)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系；而且一些新發(fā)展起來(lái)的光學(xué)顯微鏡能夠觀察特殊的細(xì)胞或細(xì)胞結(jié)構(gòu)組分。因此，電子顯微鏡不能完全代替光學(xué)顯微鏡。 相差顯微鏡在細(xì)胞生物學(xué)研究中有什么應(yīng)用？ 答案要點(diǎn)：相差 顯微鏡通過(guò)安裝特殊裝置（如相差板等）將光波通過(guò)樣品的光程差或相差位轉(zhuǎn)換為振幅差，由于相差板上部分區(qū)域有吸光物質(zhì)，使兩組光線之間增添了新的光程差，從而對(duì)樣品不同同造成的相位差起“夸大作用”，樣品表現(xiàn)出肉眼可見的明暗區(qū)別。相差顯微鏡的樣品不需染色，可以觀察活細(xì)胞，甚至研究細(xì)胞核、線粒體等到細(xì)胞器的形態(tài)。 比較放大率與分辨率的含義。 答案要點(diǎn)：二者都是衡量顯微鏡性能的指標(biāo)。通常放大率是指顯微鏡所成像的大小與樣本實(shí)際大小的比率；而分辨率是指能分辨或區(qū)分出的被檢物體細(xì)微結(jié)構(gòu)的最小間隔，即兩個(gè)點(diǎn)間的最小距離。放大率 對(duì)分辨率有影響，但分辨率不僅僅取決于放大率。 掃描隧道顯微鏡具有哪些特點(diǎn)？ 答案要點(diǎn)：①高分辨率：具有原子尺度的高分辨率本領(lǐng)，側(cè)分辨率為 ~，縱分辨率可達(dá) ；②直接探測(cè)樣品的表面結(jié)構(gòu)：可繪出立體三維結(jié)構(gòu)圖像；③可以在真空、大氣、液體（接近于生理環(huán)境的離子強(qiáng)度）等多種條件下工作；④非破壞性測(cè)量：由于沒有高能電子束，對(duì)表現(xiàn)沒有破壞作用（如輻射、熱損傷等），能對(duì)生理狀態(tài)下的生物大分子和活細(xì)胞膜表面的結(jié)構(gòu)進(jìn)行研究，樣品不會(huì)受到損傷而保持完好；⑤掃描速度快，獲取數(shù)據(jù)的時(shí)間短，成像快。 六 、論述題 試比較光學(xué)顯微鏡與電子顯微鏡的區(qū)別。 答案要點(diǎn)：光學(xué)顯微鏡是以可見光為照明源，將微小的物體形成放大影像的光學(xué)儀器；而電子顯微鏡則是以電子束為照明源，通過(guò)電子流對(duì)樣品的透射或反射及電磁透鏡的多級(jí)放大后在熒光屏上成像的大型儀器。它們的不同在于： ①照明源不同：光鏡的照明源是可見光，電鏡的照明源是電子束；由于電子束的波長(zhǎng)遠(yuǎn)短于光波波長(zhǎng)，因而電鏡的放大率及分辨率顯著高于光鏡。 ②透鏡不同：光鏡為玻璃透鏡；電鏡為電磁透鏡。 ③分辨率及有效放大本領(lǐng)不同：光鏡的分辨率為 m 左右，放大倍數(shù)為 1000 倍； 電鏡的分辨率可達(dá) ，放大倍數(shù) 106 倍。 ④真空要求不同：光鏡不要求真空；電鏡要求真空。 ⑤成像原理不同：光鏡是利用樣品對(duì)光的吸收形成明暗反差和顏色變化成像；而電鏡則是利用樣品對(duì)電子的散射和透射形成明暗反差成像。 ⑥生物樣品制備技術(shù)不同：光鏡樣品制片技術(shù)較簡(jiǎn)單，通常有組織切片、細(xì)胞涂片、組強(qiáng)壓片和細(xì)胞滴片等；而電鏡樣品的制備較復(fù)雜，技術(shù)難度和費(fèi)用都較高，在取材、固定、脫水和包埋等環(huán)節(jié)上需要特殊的試劑和操作，還需要制備超薄切片。 七、翻譯 細(xì)胞系 細(xì)胞株 細(xì)胞培養(yǎng) 細(xì)胞工程 細(xì)胞融合 原代細(xì)胞 傳代細(xì)胞 單克隆抗體 第四章 細(xì)胞膜與細(xì)胞表面 本章要點(diǎn)：本章闡述了細(xì)胞膜的基本結(jié)構(gòu)特征及其生物學(xué)功能，生物膜的結(jié)構(gòu)模型及膜的化學(xué)組成；重點(diǎn)闡述了細(xì)胞連接的結(jié)構(gòu)類型、特點(diǎn)及功能，并對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)的組成、分子結(jié)構(gòu)及生物功能進(jìn)行了簡(jiǎn)單介紹。要求重點(diǎn)掌握生物膜的結(jié)構(gòu)模型、化學(xué)組成和功能特點(diǎn)；重點(diǎn)掌握細(xì)胞連接的基本類型、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及主要功能。 一、名詞解釋 生物膜 脂質(zhì)體 雙型性分子（兼性分子） 內(nèi)在蛋白 外周 蛋白 細(xì)胞外被 細(xì)胞連接 緊密連接 橋粒 膜骨架 1血影 1間隙連接 1細(xì)胞粘附分子 1細(xì)胞外基質(zhì) 二、填空題 細(xì)胞膜的最顯著特性