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sl14核酸的生物合成1-dna的復制(編輯修改稿)

2025-02-04 11:53 本頁面
 

【文章內容簡介】 Ⅲ 作 用 修復 ( 10/秒) 修復( ) 復制 ( 150/秒 , 10萬 /分) 活 性 2+ + 3+ 功 能 催化兩個 dNTP 聚合生成 3’,5’磷酸二酯鍵 Mw/ 103 102 880 830 外 切 3’- 5’ + + + 外 切 5’- 3’ + - + 分子數(shù) /細胞 400 100 20(活性比 Ⅰ 大 20倍) 真核生物的 DNA聚合酶 DNA聚合酶 催化活性 功 能 539。→339。 聚合 339?!?39。 核酸外切 539。→339。 核酸外切 真 核 生 物 DNA聚合酶 ? + 切去引物 RNA,補上正確的 DNA片段 DNA聚合酶 ? + DNA聚合酶 g + 負責鏈的延長 DNA聚合酶 ? + + 負責先導鏈的延長 (二)引物酶 (primase) —— 復制起始時催化生成 RNA引物的酶 是一種 特殊 的 RNA聚合酶 該酶以 DNA為模板,合成一段 RNA引物。 DNA復制在該引物上加入 dNTP。 RNA聚合酶 DNA模板 RNA引物 NTP Primase( 引物酶 ) 答:因為 DNA pol不能催化兩個游離的 dNTP聚合。 問:為什么引物不可以是 DNA? (三) DNA連接酶 (DNA ligase) ?催化 DNA雙鏈中一條鏈上的缺口( 3′ OH 與它下游相鄰的核苷酸的 5′ 磷酸之間)共價連結(形成磷酸二酯鍵) 。 3553 5353HO P DNA l i g a s eNADAT PNMNAMP + P P i′′′′′′′′+? DNA連接酶在 DNA復制、損傷修復、重組 等過程中起重要作用。 (四)解旋酶 (helicase) 作用 : — 利用 ATP供能,作用于氫鍵,使 DNA雙鏈解開成為兩條單鏈 . 大腸桿菌 DnaB蛋白的解旋酶活性 (五)單鏈 DNA結合蛋白( single stranded binding protein, SSB) ? 作用 :防止單鏈 DNA重新形成雙鏈, 防止單鏈 DNA被核酸酶水解。 ? 特點: 四聚體, DNA跨度 32bp,呈協(xié)同效應,不斷的結合和解離。 (六) DNA拓撲異構酶 (DNA topoisomerase) 已知:在生物體內, DNA以超螺旋的形式存在。 ? 問:復制時,超螺旋時如何打開的? ? —— 拓撲異構酶起著重要的作用 ? 復制時, DNA解鏈沿中心軸反向旋轉,因為復制速度快,旋轉也快( 100次 /秒),易導致 DNA出現(xiàn):打結、纏繞和連環(huán)。 DNA復制過程中形成的正超螺旋 ? 拓撲異構酶作用特點 – 既能水解 、又能連接磷酸二酯鍵 ? 分 類 拓撲異構酶 Ⅰ 拓撲異構酶 Ⅱ 三、 原核細胞的 DNA復制過程 (一) . 復制的起始( Initiation) (二) . 復制的延伸( Elongation) (三) . 復制的終止( Termination) (一) 、 復制的起始 解決兩個問題 1. DNA解開成單鏈,提供模板。 2. 合成引物,提供 3?OH末端。 (一) 復制的起始 DNA解成單鏈 由特定蛋白質識別復制起始位點( ori),在解螺旋酶、 TOPO異構酶及單鏈 DNA結合蛋白的共同作用下,DNA解鏈,解旋, 形成復制叉 。 ? 倒 Y 雙向復制 單向復制 理順 DN A 鏈拓撲異構酶 ( gyrA , B)穩(wěn)定已解開的單鏈單鏈 DN A結合蛋白SSB催化 RN A 引物生成引物酶D naG ( dna G )運送和協(xié)同 Dn aBD naC ( dna C )解開 DN A 雙鏈解螺旋酶D naB ( dna B )辨認起始點D naA ( dna A )蛋白質(基因) 通用名 功能原核生物復制起始的相關蛋白質 Dna A Dna B DNA拓撲異構酶 SSB 3? 5? 3? 5? 2. 引發(fā)體和引物的生成 含有解旋酶、 DnaC蛋白、引物酶和 DNA復制起始區(qū)域的復合結構稱為 引發(fā)體 。 解旋酶解開雙鏈后引物酶進入形成 引
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