【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 病，要注意腐爛組織的色、味、結(jié)構(gòu)（如軟腐、干腐）以及有無蟲傷等。 放大鏡和解剖鏡在檢查病癥時(shí)很有用，注意有無病癥，即真菌產(chǎn)生孢子和子實(shí)體等。 大多數(shù)真菌病害在病部產(chǎn)生病征，或稍加保濕培養(yǎng)即可慶出子實(shí)體來。特別值得提出的是，鑒定時(shí)常常會(huì)遇到許多非侵染性病害，它們的癥狀有的與病毒病、線蟲病或有些真菌病害很相似，甚至在上面還能檢查到真菌，當(dāng)然，這些真菌 一般是后來在上面生長(zhǎng)的腐生性真菌。 要區(qū)分這些子實(shí)體是真正病原真菌的子實(shí)體，還是次生或腐生真菌的子實(shí)體，因?yàn)樵诓“卟?、尤其是老病斑或壞死部分常有腐生真菌和?xì)菌污染，并充滿表面。較為可靠的方法是從新鮮 病組織 的邊緣作鏡檢或分離，選擇合適的培養(yǎng)基是必要的，一些特殊性診斷技術(shù)也可以選用。按柯赫氏法則進(jìn)行鑒定，尤其是接種后看是否發(fā)生同樣病害是最基本的，也是最可靠的一項(xiàng)。 病原菌鑒定 癥狀對(duì)鑒定不是絕對(duì)可靠，不同的病原物可以產(chǎn)生相似的癥狀，而一種病害的癥狀可能因寄主和環(huán)境條件而變化，因此，標(biāo)本的顯微鏡檢查非常重要。 真菌病害標(biāo)本或培養(yǎng)的真菌，應(yīng)因材料的不同而采取不同的方法檢視。 各調(diào)查單元在有條件的情況先，建議每種病害進(jìn)行顯微病原檢查。 以下介紹的方法簡(jiǎn)單易行，一架顯微鏡即可執(zhí)行。 菌絲體和子實(shí)體的挑取檢視 標(biāo)本或培養(yǎng)基上的菌絲體或子實(shí)體，一般是直接用針挑取少許，放在加有一滴浮載劑的載玻片上，加蓋玻片在顯微鏡下檢視。 葉面真菌的粘貼檢視 葉面真菌的粘貼檢視可用透明膠、醋酸纖維素、火棉膠或其他粘貼劑等。目的是為了檢查葉片表面的真菌如白粉菌和其他霉菌等。 組織整體透明檢視 組織透明后的整體檢查，不但可以看清表面有病菌，還可以觀察組織內(nèi)部的病菌，透明的方法很多，最常用的是水合氯醛。水合氯醛透明：為了觀察病葉表面和內(nèi)部的病菌，可將小塊葉片在等量的酒精（ 95%）和冰醋酸的混合液中固定24h，然后浸泡在飽和的水合氯醛水溶液中，待組織透明后取出用水洗凈，經(jīng)稀苯胺藍(lán)的水溶液染色，用甘油浮載檢視。 真菌的玻片培養(yǎng)檢視 瓊膠培養(yǎng)基表面的真菌，直接挑取檢視往往會(huì)破壞真菌的結(jié)構(gòu)，故玻片培養(yǎng)是很好的檢視方法。 瓊膠培養(yǎng)基中真菌的檢視 瓊膠培養(yǎng) 基表面下的真菌機(jī)構(gòu)，可以從平板上切取小塊帶菌的瓊膠培養(yǎng)基、放在載玻片上，加蓋玻片擠壓后檢視。 真菌細(xì)胞核和染色體的觀察 真菌細(xì)胞核和染色體的觀察對(duì)了解真菌致病性和變異是非常重要的，有時(shí)需要對(duì)真菌染色體的變化或細(xì)胞核進(jìn)行觀察。細(xì)胞核染色方法很多，通常使用蘇木精染色或 4,6－ Diamido2phenylindol(DAPI)熒光染料染色。 組織浸離檢視 組織浸離就是將根、莖、樹皮等組織用藥處理，除去中膠層，是細(xì)胞分離，以觀察單個(gè)細(xì)胞的形態(tài)。 徒手切片檢視 徒手切片很有用，不需要特殊 設(shè)備，操作方便，是日常用的最多的真菌檢視方法。 （ 三 ）細(xì)菌病害的診斷和鑒定 大多數(shù)細(xì)菌病害的癥狀有一定持點(diǎn)，初期有水漬狀或油漬狀邊緣，半透明，病斑上有菌膿外溢，斑點(diǎn)、腐爛、萎蔫、腫瘤大多數(shù)是細(xì)菌病害的特征，部分真菌也引起萎蔫與腫瘤。切片鏡檢有無噴茵現(xiàn)象是最簡(jiǎn)便易行又最可靠的診斷技術(shù)，要注意制片方法與鏡檢要點(diǎn)。 癥狀觀察 植物細(xì)菌病害表現(xiàn)各種類型的癥狀，不同屬的細(xì)菌侵染植物后引起的癥狀有所不同，如棒形桿菌屬細(xì)菌主要引起萎蔫，假單胞菌屬細(xì)菌主要引起葉斑葉葉枯（少數(shù)枝枯、萎蔫和軟腐），黃單胞 菌屬細(xì)菌主要引起葉斑和葉枯，土壤桿菌屬細(xì)菌主要引起腫瘤，歐文氏菌屬細(xì)菌主要引起軟腐等，許多細(xì)菌性病害的病斑還帶有水漬狀，有時(shí)可以作為診斷的特征，植物病部有時(shí)還有菌膿排出，也可以作為植物細(xì)菌病害診斷特征。 病原菌鑒定 2． 1 顯微鏡觀察 顯微鏡檢查對(duì)診斷是非常重要的，細(xì)菌侵染引起的病害受害部位的維管束或薄壁細(xì)胞組織中一般都有大量的細(xì)菌，用顯微鏡觀察組織有無細(xì)菌流出（噴菌現(xiàn)象）。 2． 2 病原細(xì)菌分離鑒定 植物病原細(xì)菌一般都用稀釋分離法。病原細(xì)菌在組織中的數(shù)量很大，稀釋培養(yǎng)可以使病原細(xì)菌與雜菌分開，形成分 散菌落，容易分離得到純培養(yǎng)，對(duì)病原細(xì)菌的識(shí)別和鑒定有很大幫助。病原細(xì)菌的鑒定通常需要進(jìn)行生理生化測(cè)定和致病性測(cè)定。 （四）線蟲病害的診斷和鑒定 癥狀觀察 植物受到線蟲為害后，可以表現(xiàn)各種癥狀，有的表現(xiàn)為癭瘤、葉斑、壞死或整株枯死等，通?？梢栽诓∽儾课徽业讲≡€蟲，但是多數(shù)線蟲病表現(xiàn)為變色、褪綠、黃化、矮縮和萎蔫等癥狀，這多半是根部危害造成的。各屬線蟲為害不同，根結(jié)線蟲在新生的支根或側(cè)根上寄生后引起根結(jié)，滑刃線蟲主要危害植物的地上部分，可以傳染植物病毒的長(zhǎng)針線蟲、劍線蟲和毛刺線蟲等，在根外寄生。 病原鑒定 直接觀察分離 ： 寄生線蟲，可在解剖鏡下用挑針直接挑取蟲體觀察， 或者經(jīng)分離后檢查 ，放在凹穴玻片上的水滴中，觀察和處理。 （ 五 ）病毒病害的診斷和鑒定 植物的病毒病是 植物 的重要病害， 但在林木中表現(xiàn)不多。原因是對(duì)它的了解和掌握不夠。一般 幾乎每種 植物有 一種、幾種甚至十幾種病毒病害 。 對(duì)于病毒病害，首先要注意它的病理現(xiàn)象，有助于病毒病害的鑒別。 癥狀觀察 病毒病的癥狀以花葉、矮縮、壞死為多見。無病征 。 植物病毒必須經(jīng)過一定的傷口才能侵入寄主植物的細(xì)胞和組織，例如，葉片經(jīng)磨擦接種病毒后，在接種點(diǎn)可形成局部斑點(diǎn)，有壞死褪綠、黃花等不同顏色，大小也可以不同。植物病毒從侵入點(diǎn)擴(kuò)散，一般可以擴(kuò)散到全株，表現(xiàn)各種外部癥狀，植物病毒病的外部癥狀一般可以歸為五種類型：花葉、變色、環(huán)斑和環(huán)紋、壞死、矮縮、矮化和畸形。植物病毒病的內(nèi)部癥狀包括組織與細(xì)胞的變化和內(nèi)含體的變化兩個(gè)方面。 病毒形態(tài)觀察 ： 需進(jìn)行電子顯微鏡觀察。 在電鏡下可見到病毒粒體和內(nèi)含體。采取病株葉片用汁液摩擦接種或用蚜蟲傳毒接種可引起發(fā)?。挥貌≈耗Σ两臃N在指示植物或鑒別寄主上可見到特殊癥狀出現(xiàn)。用血清學(xué)診斷技術(shù)可快速作出正確的診斷。必要時(shí) 作進(jìn)一步的鑒定試驗(yàn)。 （ 六 ） 植原體病害 的診斷和鑒定 植原體 病害的特點(diǎn)是植株矮縮、叢枝或扁枝，小葉與黃化，少數(shù)出現(xiàn)花變?nèi)~或花變綠。 如棗瘋病、泡桐叢枝病等。 只有在電鏡下才能看到 植原體 。注射四環(huán)素以后，初期病害的癥狀可以隱退消失或減輕。對(duì)青霉素不敏感。 第 二 節(jié) 林木病害癥狀 鑒別 癥狀是林木病害表觀表現(xiàn)的異常特征，也是病害的表觀“身份” 特征。了解林木病害癥狀，對(duì)田間調(diào)查中發(fā)現(xiàn)病害，及初步診斷病害，具有重要意義。 一、 林木病害 癥狀的概念 1. 癥狀：植物在發(fā)病部位表現(xiàn)出的不正?，F(xiàn)象。分為外部癥狀、內(nèi)部癥狀 。 內(nèi)部癥狀：植物體內(nèi)細(xì)胞形態(tài)或組織結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，顯微鏡觀察。 外部癥狀：植物外表變化，肉眼觀察。 2. 病狀：是指發(fā)病植物本身所表現(xiàn)出來的反?，F(xiàn)象。 3. 病 征 ： 是指病原物在植物體上表現(xiàn)出來的特征性結(jié)構(gòu)。 二、林木病害的癥狀類型 （ 一）、病狀類型 常見的病害癥狀有很多種，其中病狀類型很多歸納起來只有 5 類，即變色、壞死、萎蔫、腐爛和畸形。 變色 (discoluration) 病植物的色澤發(fā)生改變。大多出現(xiàn)在病害癥狀的初期，尤其是病毒病中最為常見。整個(gè)葉片或者葉片的一部分均勻地變色，主要表現(xiàn)為褪綠和黃化(yellowing)。褪綠是由于葉綠素的減少而使葉片表現(xiàn)為淺綠色。當(dāng)葉綠素的量減少到一定程度就表現(xiàn)為黃化。另一種形式是葉片不是均勻地變色，