sars病原與檢測(cè)ppt課件(編輯修改稿)
2025-02-01 03:30 本頁面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 分離、 PCR，血清作 抗體檢測(cè) 尸檢標(biāo)本 采集肺、氣管、腎、脾、肝、心臟、腦、 病毒分離、 PCR、 淋巴結(jié)等，樣品運(yùn)輸液為 Hank氏液、 Eagle液 電鏡觀察 等（加青、鏈霉素和制霉菌素），立即凍存； 福爾馬林固定者室溫保存 標(biāo)本運(yùn)輸與儲(chǔ)存 臨床采集的標(biāo)本，宜盡快送至專業(yè)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室，在運(yùn)送抵達(dá)前的 2448小時(shí)內(nèi)，標(biāo)本可 4?C冷藏（非福爾馬林固定的尸檢標(biāo)本冷凍保存）。 檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)長(zhǎng)期保存，血液標(biāo)本 20 ?C冷凍保存，其它 70 ?C保存。 標(biāo)本的生物安全操作 采集與運(yùn)輸 標(biāo)本管：螺旋蓋、密封，貼生物危險(xiǎn)性提示標(biāo)簽 運(yùn)輸過程中保證密封 處理 任何可能產(chǎn)生氣溶膠的操作均應(yīng)在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。操作者個(gè)人防護(hù)。 ? 二級(jí)生物安全（ BSL2）裝備內(nèi)進(jìn)行的操作 ： 血清和血標(biāo)本的各種常規(guī)診斷性檢查。 ? 三級(jí)生物安全（ BSL2）室內(nèi)進(jìn)行的操作 ： SARS病原體分離培養(yǎng)、濃縮 標(biāo)本中核酸提取 動(dòng)物接種 醫(yī)務(wù)人員對(duì) SARS或疑似病人采樣時(shí)的個(gè)人防護(hù) 口罩（符合 N,R,P95/99/100, FFP2/3標(biāo)準(zhǔn)）、護(hù)目鏡、手套、隔離衣 在沒有把握控制病毒泄漏（包括產(chǎn)生氣溶膠）的情況下，不能進(jìn)行標(biāo)本的操作 SARS檢測(cè)及結(jié)果解釋 檢測(cè)方法 抗體 （ IgG/IgM)： － ELISA (Enzyme Linked ImmunoSorbant Assay) 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn) － IFA (Indirect ImmunoFluorescence Assay ) 間接免疫熒光實(shí)驗(yàn) 核酸（ RNA） ： － RTPCR（ Reversed transcription Ploymerase Chain Reaction） ? Nested PCR ? real time PCR － gene chip 病毒分離 － 細(xì)胞培養(yǎng) SARS檢測(cè)及結(jié)果解釋 解釋（ Interpretation of test results） 陽性結(jié)果 對(duì)于 PCR和細(xì)胞培養(yǎng)： SARS病人正在或近期被 SARS病毒感染 。 對(duì)于 ELISA和 IFA ：正在或近期被 SARS病毒感染，或既往感染（需注意不同檢測(cè)方法的特異性） 陰性結(jié)果 病人沒有被 SARS病毒感染，而是由其它傳染性（病毒、細(xì)菌、真菌）或非傳染性因素。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果不正確（“假陰性”）。目前的方法需要提高靈敏度。 對(duì)于 PCR和細(xì)胞培養(yǎng)：病人標(biāo)本并沒有在病毒或其遺傳物質(zhì)出現(xiàn)的時(shí)段內(nèi)采集。病毒及其遺傳物質(zhì)僅存在一段較短的時(shí)期（依賴于不同標(biāo)本種類）。 對(duì)于 ELISA和 IFA：標(biāo)本收集過早，抗體還沒有產(chǎn)生。 (檢測(cè) SARS病毒結(jié)果為陰性并不就表示病人沒有感染 SARS病毒 ) Laboratory case definition of SARS A person with symptoms and signs that are clinically suggestive of SARS AND with positive laboratory findings for SARSCoV based on one or more of the following diagnostic criteria: a) PCR positive for SARSCoV PCR positive using a validated method from: ?At least two different clinical specimens (eg na
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