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正文內(nèi)容

qpcr實時熒光定量pcr(編輯修改稿)

2025-06-20 23:14 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 化學(xué)反應(yīng)原理 依據(jù)反應(yīng)中所選熒光物質(zhì)的不同 ,實時熒光定量 PCR的化學(xué)反應(yīng)原理通常分為熒光染料和熒光探針兩種 : (1) SYBR熒光染料 :SYBR是一種與雙鏈 DNA小溝結(jié)合的染料。在 PCR反應(yīng)體系中 ,加入過量 SYBR熒光染料 , SYBR熒光染料特異性摻入 DNA雙鏈后 ,發(fā)射熒光信號 ,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號 ,從而保證熒光信號的增加與 PCR產(chǎn)物的增加完全同步。 (2)TaqMan熒光探針 :該探針是一種寡核苷酸探針。 PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針 ,兩端分別標記一個熒光基團和一個淬滅基團。當(dāng)探針與靶序列配對時 ,熒光基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收。 PCR擴增時 ,Taq酶的 539。339。外切
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