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正文內(nèi)容

水體富營(yíng)養(yǎng)化中藻毒素的危害與檢測(cè)方法(編輯修改稿)

2025-06-20 06:34 本頁(yè)面
 

【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 藻毒素的含量標(biāo)準(zhǔn) 目前,各國(guó)一般還沒(méi)有制定強(qiáng)制性的飲用水中藻毒素含量標(biāo)準(zhǔn),已有的標(biāo)準(zhǔn)一般也只針對(duì)微囊藻毒素 LR 含量。 ⑴ 世界衛(wèi)生組織 (WHO) 建議飲用水中藻毒素標(biāo)準(zhǔn)為 ; ⑵ 加拿大健康組織 認(rèn)為飲用水中可接受的藻毒素標(biāo)準(zhǔn)為 。 ⑶ 我國(guó)尚未制定飲用水中微囊藻毒素總含量標(biāo)準(zhǔn),在 2021 年 6 月衛(wèi)生部頒布的 《 生活飲用水衛(wèi)生規(guī)范 》 中已將微囊藻毒素 LR 的標(biāo)準(zhǔn)值列入,為 0. 001mg/ L 。 ⑷ 國(guó)家環(huán)境保護(hù)總局頒布的 《 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 》(GB38382021) 中也在集中式生活飲用水地表水源地特定項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)限值列出微囊藻毒素 LR 的標(biāo)準(zhǔn)值,同樣為 0. 001mg/ L 。 藻毒素的檢測(cè) 藻毒素的檢測(cè) 生物法 化學(xué)法 免疫法 生物法 小鼠測(cè)試法 蛋白磷酸酶抑制試驗(yàn)法( PPIA) 蛋白磷酸酶競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合試驗(yàn)法( PPCBA) PCR法 組織培養(yǎng)細(xì)胞毒性分析法 通常為小鼠腹腔注射或口腔灌飼,根據(jù)其急性毒性篩選,粗略判斷藻毒素含量,并結(jié)合毒素作用特點(diǎn)區(qū)分神經(jīng)毒性或肝毒性 。 該法操作簡(jiǎn)單,但專一性和靈敏性相對(duì)較差,樣品需要量大,無(wú)法精確定量和堅(jiān)定藻毒素結(jié)構(gòu) 。 PPIA法方便快捷,需要樣品少,具有較好的重復(fù)性、可靠性,檢測(cè)限極低,便于進(jìn)行大批量樣品檢測(cè),但只能用于藻毒素總量測(cè)定,無(wú)法鑒定毒素成分和區(qū)分毒素同系物。 小鼠測(cè)試法 蛋白磷酸酶抑制試驗(yàn)法( PPIA) MC對(duì)蛋白磷酸酶 PP1和 PP2A具有強(qiáng)烈的活性抑制作用,強(qiáng)度與毒素計(jì)量有關(guān),呈典型的 S型曲線。采用同位素標(biāo)記 PPⅠ A法和微量比色 PPⅠ A法檢測(cè)樣品存在時(shí) PP的相對(duì)活力,可計(jì)算其中毒素的含量,無(wú)需任何前處理和濃縮處理,檢測(cè)限即可分別達(dá)到 和 L1。 蛋白磷酸酶競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合試驗(yàn)法( PPCBA) PCR法 藻毒素對(duì) PP1 和 PP2A 上 Ser 和 T hr 具有高親和力 ,采用 125Ⅰ 標(biāo)記 MCYR, 將之與未標(biāo)記的被測(cè)毒素一起與 PP2A 反應(yīng) , 競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合PP2A 達(dá)平衡后通過(guò)凝膠過(guò)濾分離 PP2A 結(jié)合相毒素和未結(jié)合相毒素 , 檢測(cè) MCYR 與PP2A 結(jié)合體的放射性 , 依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得被測(cè)毒素含量。 本法干擾因素少,檢測(cè)限低至 ,但也只能檢測(cè)毒素總量。 采用 MC 毒素合成酶基因 —— Mcy 基因 , 進(jìn)行產(chǎn)藻毒素藻株和非產(chǎn)毒株的鑒定、篩選 , 凡有產(chǎn)毒能力的藻細(xì)胞均可被檢出。 該法檢測(cè)下限低 , 靈敏度高 , 方便快捷 , 可檢測(cè)干藻粉、實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)物、無(wú)前處理的自然水樣等 , 但不能定量和無(wú)法檢測(cè)溶解的 MC。 本法可從神經(jīng)毒性較強(qiáng)的含藻毒素目標(biāo)物中檢出微量 MC 的存在 , 但試驗(yàn)工作量較大。 組織培養(yǎng)細(xì)胞毒性分析法 在肝細(xì)胞懸浮培養(yǎng)液中加入 MC, 據(jù)其導(dǎo)致細(xì)胞凋亡的程度區(qū)分產(chǎn)毒株、檢測(cè) MC 含量、評(píng)價(jià)MC 毒性 , 通過(guò)把握凋亡中肝細(xì)胞裂解程度可進(jìn)一步提高試驗(yàn)靈敏度。 化學(xué)法 氣象色譜(GC) 薄層色譜( TLC) 高效液相色譜( HPLC) 質(zhì)譜分析( MS) 毛細(xì)管電泳法( CE) 化學(xué)法可實(shí)現(xiàn)生物法通常無(wú)法實(shí)現(xiàn)的對(duì)藻毒素的精確定量和構(gòu)型分析以及同分異構(gòu)體鑒別。 是最簡(jiǎn)單的定性測(cè)定方法之一,一般用Kieselgel60 F254( )薄層板,展開(kāi)容積系列有 CHCL3: MeOH:H2O(26:15: 3或者 13:7:2), Rf值為 。EtOAC: 2PrOH: H2O(8: 4: 3或4:3:7)。利用正相或反相硅膠制作的薄層板可提高分離效果。 薄層色譜 (TLC) 高效液相色譜 (HPLC) 是最常用的的檢測(cè)方法,通常先以反向或正向色譜柱分離純化藻毒素,再采用238mm紫外光或熒光檢測(cè),以標(biāo)準(zhǔn)毒素為基準(zhǔn),既可以精確定量檢測(cè)藻毒素,也可用于藻毒素異構(gòu)體鑒定。 HPLC檢測(cè)靈敏度高,重現(xiàn)性好,但需要標(biāo)準(zhǔn)毒素,試驗(yàn) HPLC檢測(cè)靈敏度高,重現(xiàn)性好,但需要標(biāo)準(zhǔn)毒素,實(shí)驗(yàn)成本高,實(shí)驗(yàn)時(shí)間長(zhǎng),且對(duì)檢測(cè)儀器精密度依賴程度高。 質(zhì)譜分析( MS) 實(shí)驗(yàn)成本較高 , 但靈敏度高。液、質(zhì)聯(lián)用 ( LC/ MS) 快速而精確 , 即使沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)毒素 , 在已知毒素相對(duì)分子質(zhì)量情況下也可定性和定量檢測(cè)。微孔反相液質(zhì)聯(lián)用法檢測(cè)毒素達(dá)到 pg 級(jí) , 可用于分析有機(jī)大分子結(jié)構(gòu)及其相對(duì)分子質(zhì)量。原子轟擊質(zhì)譜分析法 (FABMS) 和液相次級(jí)離子質(zhì)譜 ( LSIMS) 可快速有效 地確定毒素相對(duì)分子質(zhì)量。 毛細(xì)管電泳法( CE) 利用其柱上富集功能 , 所需樣品量少 , 采用激光誘導(dǎo)的熒光檢測(cè)器提高檢測(cè)靈敏度可避免放射性物質(zhì) , 靈敏度高 , 無(wú)需添加劑
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