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胚胎試驗在水生動物中的應用(編輯修改稿)

2025-06-19 04:54 本頁面
 

【文章內容簡介】 ? 被廣泛利用 ? 在實驗室內容易大量培養(yǎng) ? 具有代表性和對受試物的敏感性 ? 遺傳背景清楚 試驗動物的飼養(yǎng)也有相應的規(guī)范 胚胎來源 ? 多數魚類產卵后離體孵化,易于收集 。 ? 一般可采用親魚人工催產結合人工受精的方法獲得 。 ? 對于如斑馬魚,青鳉等小型種類,在實驗室內養(yǎng)殖相對容易,只需控制適當的物理條件,一般都能在試驗當天取到足夠數量的受精卵 。 野外試驗 ? 收集魚卵 在實驗室完成剩余的發(fā)育過程,檢測多個終點指標 。 ? 原位暴露 在室內得到受精卵,用適當的裝置放置于待檢測的地點,全部發(fā)育過程或絕大部分發(fā)育過程在野外完成。 ? 有抱卵習性的甲殼動物,胚胎在母體腹部附肢發(fā)育成幼體,通過捕撈帶卵的母體,分離胚胎。 分類 ? 胚胎試驗同樣可分成急性毒性試驗和亞急性毒性試驗 。 ? 急性毒性試驗時間較短,其目的是獲得有關受試物的初步毒性信息;亞急性毒性試驗時間較長,可以貫穿胚胎發(fā)育的整個時期。 ? 暴露途徑 可分為靜態(tài),半靜態(tài)和流動等 ,或微注射的途徑。 容器 ? 透明的試驗容器通常是首選,燒杯、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)管是最普通的工具。 ? 在野外暴露試驗中,有黏性的受精卵可以被直接負在載玻片上,后者固定在特制的容器里 。 溶劑 ? 有機物質水溶性較差,則需要化學溶劑來助溶,但不適當的溶劑會影響結果的可靠性,化學溶劑本身對胚胎具有毒性甚至會和受試物產生協(xié)同作用,因此,選用適當的溶劑以及適當的濃度對結果的準確性都是有益的。 ? 乙醇,丙酮,二甲亞砜是常用的溶劑,終濃度一般在 %以下 。 %(V/V)乙醇 1%(V/V)乙醇 對照 Grass shrimp (Palaemoes pugio) 檢測終點 ? 半致死濃度( LC50) ? 形態(tài)異常 ? 孵化延遲 ? 生化指標 ? 遺傳物質 ? 生長指標 半致死濃度( LC50) ? 半致死濃度( LC50) ? 死亡是檢測的可見終點,初步反映受試物的毒性,是急性毒性試驗的常用指標 。 ? 孵化也可作為終點來反映受試物毒性,指標采用半效應濃度( EC50)。 ? 在發(fā)育早期可以胚胎完整性來判斷存活與否,當器官出現(xiàn)后則用器官的運動作為標準。 形態(tài)異常 ? 形態(tài)異常是胚胎致畸試驗的核心內容 。 ? 斑馬魚和爪蟾胚胎發(fā)育過程中有多種可以觀察的反應指標,被列入標準方法的觀察終點。 ? 對于甲殼動物,常見的觀察結構有眼、卵黃形狀、心臟、頭
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