初始污染菌檢查(1)(編輯修改稿)
2025-06-15 08:41 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 供試液制備 梯度稀釋 加 樣 用滅菌剪刀將紗布剪成小塊，稱取10g，移入 100ml滅菌生理鹽水中，不時振搖。作為 1： 10供試液。 供試液 10倍遞減稀釋。 盡量避免絲線等雜物的混入。 （ 1）每個稀釋級各吸取 1ml至每個滅 菌平皿，每個稀釋級注 5個平皿。 （ 2）經(jīng)滅菌完畢的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基冷卻至4550 ℃ 時，傾注上述各個平皿 15ml，另傾注一個注入 1ml稀釋液（滅菌生理鹽水）滅菌空平皿作陰性對照。按一個方向快速轉(zhuǎn)動平皿，使供試液與培養(yǎng)基充分混勻。 紗布模擬 培養(yǎng) 瓊脂凝固后，倒置， 37 ℃ 培養(yǎng) 48h 細(xì) 菌 計 數(shù) ?基本概念 細(xì)菌數(shù)測定是微生物的定量檢查，對非規(guī)定滅菌產(chǎn)品中污染的活菌數(shù)量進行測定，通常以每克或每毫升供試品作為計量單位。 ?限制條件 平板菌落計數(shù)法的特點是先使細(xì)胞分散、定位，增生可見菌落后計數(shù)。它是一種有條件的計數(shù)法，其限制條件大致如下： ⑴以菌落數(shù)為基礎(chǔ)。 CFU(colony forming units):一個菌落就是一個細(xì)菌形成單位，它 可以由一個也可以由多個菌細(xì)胞形成。 ⑵受特定培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件限制。 ⑶有繁殖能力的菌細(xì)胞才能認(rèn)定 “ 活菌 ” 。 細(xì)菌計數(shù) ? 先用肉眼觀察，點數(shù)菌落數(shù)，然后再用放大 510倍的放大鏡檢查，以投射光襯以暗色背景，以防遺漏（可輔助菌落計數(shù)器）記下各平皿的菌落數(shù)后，求出同一稀釋度各平皿生長的平均菌落數(shù)（每個稀釋度的 5個平板值，相加后除以 5）。 ? 若平皿中有連成片狀的菌落或花點樣菌落蔓延生長時，該平皿不宜計數(shù)，若片狀菌落不到平皿中的一半，而其余一半中菌落數(shù)分布又很均勻，則可將此半個平皿菌落計數(shù)后乘 2，以代表全皿菌落數(shù)。 菌落特征 ⑴ 形態(tài)特征：常為白色、灰白色或灰色，亦有淡褐色、 淡黃色（如果培養(yǎng)基中加入%TTC(氯化三苯基四氮唑試劑 )， 菌落為紅色） ⑵ 邊緣整齊或不整齊，表面有光滑、粗糙，皺褶、突起或扁平。 ⑶ 大小差異很大。
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