【正文】 .....................................錯誤 !未定義書簽。 ................................................................................錯誤 !未定義書簽。 年 月 日 燕山大學(xué) 課程設(shè)計 成績評定表 設(shè)計者姓名 : 學(xué)號 : 設(shè)計題目 : 說明書成績評定（滿分 100分）： 得分 設(shè)計內(nèi)容的切題程度：滿分 20分 （ ） 設(shè)計內(nèi)容立題合理性：滿分 10分 （ ） 設(shè)計內(nèi)容的規(guī)范程度：滿分 10分 （ ） 設(shè)計書前后內(nèi)容完整：滿分 20分 （ ） 設(shè)計說明說排版成績：滿分 20分 （ ） 設(shè)計說明書的工作量：滿分 10分 （ ） 設(shè)計過程平時成績： 滿分 10分 （ ） 總分成績： 指導(dǎo)教師： 年 月 日 答辯成績評定：（滿分 100分） 得分 儀表成績：滿分 20分 （ ） 口語表達：滿 分 20分 （ ） 幻燈質(zhì)量：滿分 20分 （ ） 設(shè)計分析：滿分 40分 （ ） 總分 ： 教師： 年 月 日 設(shè)計撰寫成績 （ 70%） 答辯成績 （ 30%） 合計 教師簽字： 年 月 日 20202020 秋 季學(xué)期 生物工程專業(yè)課程設(shè)計 結(jié)題論文 卵丘細胞對豬卵母細胞體外成熟影響的設(shè)計 學(xué)院（系）： 年級 專業(yè)： 學(xué) 號： 學(xué)生 姓名： 指導(dǎo) 教師： 教師 職稱： 摘 要 卵丘細胞是影響卵母細胞成熟的重要因素，尤其是包裹在卵母細胞周圍的卵丘細胞。 實驗試劑 ........................................................................錯誤 !未定義書簽。 卵母細胞體外成熟（ IVM）是指在體外人工給定的條 件下，哺乳動物次級卵母細胞經(jīng)過一系列的生長發(fā)育最終形成有受精能力的成熟卵母細胞的過程。 而即使是從同一品種和統(tǒng)一地區(qū)的豬種所獲得的卵母細胞進行體外培養(yǎng)，其培養(yǎng)效果也會因豬的健康情況和卵巢質(zhì)量等的影響而有很大的不同，比如，處在育齡盛期的健康母豬，其卵巢的體積大，表面卵泡多而且直徑在 36mm 的卵泡相對比例就會較高，抽得的卵母細胞形態(tài)完好，裸卵少，相對體外成熟培養(yǎng)效果也好。根據(jù)卵母細胞外 面包裹的卵丘細胞的層數(shù)將其分成三級 。 目前，常用的豬卵母細胞體外成熟培養(yǎng)方式有微滴培養(yǎng)法、套皿培養(yǎng)法及普通的單皿培養(yǎng)法。 在早期的研究中 ，促性腺激素多數(shù)存在于整個體外培養(yǎng)過程，但 1994 年，F(xiàn)unashi 等的研究表明，在豬卵母細胞 IVM 時，培養(yǎng)前 20 h 加入 PMSG、 hCG、E2，而在培養(yǎng)后 20 h 去除，可增加卵母細胞的成熟率，同時可以促進卵母細胞減數(shù)分裂和胞質(zhì)的成熟，而且有利于卵母細胞的發(fā)育和受精。 TGFα，在結(jié)構(gòu)上和功能上與 EGF 相似，因而也可以與EGF受體結(jié)合，誘導(dǎo)豬卵丘細胞的擴散，促進卵母細胞核成熟。裸卵僅能夠利用周圍介質(zhì)中的丙酮酸和三羧循環(huán)的中間產(chǎn)物，不能直接利用葡萄糖卵丘細胞可將葡萄糖轉(zhuǎn)化為丙酮酸，為卵母細胞的生長和發(fā)育提供能量。m）； 級成熟卵為“卵丘細胞輕度擴展”，卵丘細胞仍緊緊地粘貼在透明帶上。結(jié)果證實裸卵燕 山 大 學(xué) 課 程 設(shè) 計 說 明 書 10 成熟培養(yǎng)后 CG完全消失或卵子本身形態(tài)出現(xiàn)異常。研究表明，卵母細胞體外成熟培養(yǎng)系統(tǒng)與受精率和囊胚發(fā)育率有強相關(guān)性。液滴預(yù)先在二氧化碳培養(yǎng)箱中平衡 2h以上。這些天尋找資料，思考設(shè)計方案，穿梭于東西校區(qū)之間，不僅鍛煉了身體，也鍛煉了我們的心智，每個人都很認真的學(xué)習(xí)、準備，老師的嚴格要求是對我們最好的磨練與監(jiān)督。 不同類型 COCs的孤雌胚胎發(fā)育能力卻不同，這可能是包 裹卵丘細胞較少的卵母細胞在體外成熟后已有老化的趨勢，卵裂后發(fā)育至囊胚的能力下降，但包裹 3層以上卵丘細胞及附帶 FSP的 COCs在體外成熟后孤雌激活時正處于發(fā)育的較佳時期，能夠很好的發(fā)育至囊胚期。 B級：卵丘細胞為 1～ 2層；或卵丘細胞雖在 3層或 3層以上，但是不完整，部分為 1～ 2層。 (3) 去除卵丘細胞的小鼠卵母細胞在體外成熟過程中，皮質(zhì)顆?？赡艽嬖诶^發(fā)性生成障礙或者數(shù) 量異常，該結(jié)果可能是去除卵丘細胞的小鼠卵母細胞存在體外受精障礙的原因之一。卵丘細胞的形態(tài)不依賴于供體的類型，擁有完整多層并且擴散的卵丘細胞的卵母細胞的比例最大（ ％～ 46％ ），其次是帶有致密多層的卵丘細胞的卵母細胞（ ％～ 28％ ），裸卵的比例小于 7％ 。卵母細胞也可能通過分泌特殊因子或通過促卵泡素（ FSH）和 EGF刺激卵丘透明質(zhì)酸酶的合成，調(diào)節(jié)卵丘擴散，從而解除卵丘卵母細胞的異源連接，促使減數(shù)分裂恢復(fù)。壁層顆粒細胞與卵丘細胞之間，卵丘細胞與卵丘細胞之間以及卵丘細胞與卵母細胞之間，存在著廣泛的縫隙連接。 Vatzias 等研究發(fā)現(xiàn)冷凍卵泡液在促進卵母細胞的成熟、降低多精受精方面優(yōu)于新鮮卵泡液，孟慶剛等認為在激素存在的條件下， pFF 具有促進豬小腔卵泡卵母細胞體外成熟的作用。 在卵母細胞的體外培養(yǎng)體系中， FSH、 LH 有利于改變卵丘細胞的代謝機能，并阻斷卵丘細胞通過胞間連接向卵母細胞分泌減數(shù)分裂抑制因子的途徑，從而使卵母細胞恢復(fù)成熟分裂過程 。多數(shù)培養(yǎng)基在配制前都已將 pH 值調(diào)好，并具有一定的緩沖能力，因此， 5%CO2 則剛好是維持 pH 所必需。韓毅冰等也證明小直徑卵泡卵母細胞 (1~2 mm)成熟率不如大直徑卵泡卵母細胞（ 2~6mm）。 在卵母細胞的成熟過程中，有很多化學(xué)物質(zhì)及因子參與反應(yīng)，因此，只有當體外成熟條件與體內(nèi)卵母細胞發(fā)育所需要的環(huán)境非常接近時，才能獲得較高的成熟率，從而為進一步的科研工 作提供優(yōu)質(zhì)大量成熟的卵母細胞。 ................................................................................錯誤 !未定義書簽。 .........................................................................3 .......................................................3 體外成熟培養(yǎng)條件 ............................................................................4 .............................................................................4 .............................................................................4 .......................................................4 .......................................................................................4 ..................................................................................................5 ..................................................................................................5 ........................................................................