【正文】 ）與蛋白質含量成正比。此外，進行紫外吸收法測定時，由于蛋白質吸收高峰常因pH的改變而有變化，因此要注意溶液的pH值，測定樣品時的pH要與測定標準曲線的pH相一致。由于核酸在280nm波長處也有光吸收，對蛋白質測定有一定的干擾作用，但核酸的最大吸收峰在260nm處。亦可用1mg/ml的牛血清白蛋白溶液。蛋白質含量測定
3．本法需用石英比色杯。故該法適于用測定與標準蛋白質氨基酸組成相似的蛋白質。[臨床意義]：（1）血清中水分減少，而使蛋白濃度相對增高。），溶于1%酒石酸鉀溶液100ml中。[注意事項]1．雙縮脲試劑中，加入酒石酸鉀鈉，Cu2+形成穩(wěn)定的絡合銅離子，以防止CuSO4如有需要，標準蛋白質還可預先用微量凱氏定氮法測定蛋白氮含量，計算出其純度，再根據其純度，稱量配制成標準蛋白質溶液。二、雙縮脲(Biuret)法測定蛋白質含量[器材]吸量管； 試管；721型分光光度計[試劑]：。[目的要求]1．掌握測定蛋白質的含量基本方法。[試劑]1．雙縮脲試劑： 取CuSO43H2OP2O5?13WO3?5MoO3?10H2O3H2OP2O5?14WO2?4MoO2?10H2O（滴定時可將酚試劑稀釋，以免顏色影響）。、磷鎢酸的顯色反應是由于和還原物質的還原反應而引起的，因此本法可受很多還原性物質的干擾，如帶有SH的化合物，糖類、酚類等甚至有些緩沖劑（如Tris）也能干擾測定。特別適用于柱層析洗脫液的快速連續(xù)檢測，因為此時只需測定蛋白質濃度的變化，而不需知道其絕對值?；靹?。C二. 器材1. 752型分光光度計。　15cm(9)。為方便起見對于混合蛋白質溶液，（mg/ml）。以0號管調零，以蛋白質溶液濃度為橫坐標，吸光度值為縱坐標，繪制出蛋白質標準曲線。，否則影響實驗結果。5．721分光光度計；旋渦混合器；秒表；試管。烯醇化反應后，可與Cu2+絡合，絡合后，易于使肽釋放電子，使酚試劑還原。2．1ml，5ml移液管；3．坐標紙 ；NaOH溶液300ml，KI該法近年在某些方面有取代經典的Lowry法趨勢，因為它操作簡單，反應時間短，染料蛋白質顏色穩(wěn)定，抗干擾性強。2．樣品測定：取1ml樣品溶液（約含25～250微克蛋白質），加入染料溶液5ml混勻，5min后測定其595nm吸光度值，對照標準曲線求得蛋白質濃度。長期放置后若有暗紅色沉淀出現(xiàn)，即不能使用。1～5為標準曲線管，測得吸光度后，以吸光度為縱坐標，蛋白質濃度為橫坐標繪制標準曲線。乙液：取硫酸銅（CuSO4以蛋白質含量為橫坐標，吸光度值為縱坐標，繪制標準曲線。[思考題]？？應如何注意？2.管號試劑012345671mg/ml卵清蛋白標準液/ml蒸餾水/ml蛋白濃度/（mg/ml）A280nm00