【正文】 白飼料的開發(fā) 則使用了 固態(tài)發(fā)酵大米黃酒糟 ??8 。 在 黃酒糟的研究 開發(fā)利用 過程中本著 變廢為寶的角度， 需要開創(chuàng)一條 既可減 少 環(huán)境污染，又可以節(jié)黃酒糟蛋白提取工藝研究 3 約 資源 、降低生產(chǎn)成本 的 新思路。 因為酒糟蛋白原本就可以通過堿提的方法制得，在堿酶的高提取率中，部分應(yīng)歸功于堿提的作用。以 4000r/min的速度離心 10min，棄上清液 收集沉淀物。按照 500u/g、 1000u/g、 1500u/g、 20xxu/g、2500u/g 的加酶量添加堿性 內(nèi)切 蛋白酶，水浴振蕩 2h，在反應(yīng)過程中不斷加酸或堿，維持反應(yīng) 液中 pH 在設(shè)定值 11177。0 .1 范圍 內(nèi)。 試驗結(jié)果分析 加酶量對蛋白提取率的影 響 圖 2 加酶量對蛋白質(zhì)提取率的影響 由圖 2 可 知 ， 當(dāng) 加酶量從 500u/g增至 20xxu/g時，蛋白提取率 也隨之 平穩(wěn)增長。 因為當(dāng) 料液比過低時 ， 反應(yīng)體系會比較黏稠，流動性差 ，黃酒糟不能很好地與蛋白酶結(jié)合，反應(yīng)不能充分進行 。 黃酒糟蛋白提取工藝研究 15 4 結(jié)論 本試驗在對多種植物蛋白提取方法進行研究比較的基礎(chǔ)上，為了提高黃酒糟蛋白的提取率，先是采用了水洗除雜，然后纖維素酶酶解 進行原材料預(yù)處理，接著再 進行黃酒糟蛋白酶法提取工藝路線。感恩之情難以用語言量度，請允許我 謹以最樸實的話語致以最崇高的敬意。在這個美好的季節(jié)里，我在電腦上敲出最后一 段話 ，心中涌現(xiàn)的不是想象已久的歡欣，卻是難以言喻的失落。 十年樹木，百年樹人。 此外， 我的試驗和論文 最終 能夠 得以順利完成，也 要感謝所 有授我以業(yè)的大學(xué) 老師 。本試驗的指標是越大越好，即蛋白質(zhì)提取率也越高。 黃酒糟蛋白提取工藝研究 11 反應(yīng)時間對蛋白提取率的影響 圖 5 反應(yīng)時間對蛋白質(zhì)提取率的影響 由圖 5 可 知 ，在反應(yīng)的前 3h， 隨著時間的延長， 蛋白質(zhì)的提取率 穩(wěn)步上升 ；在 3h之后，蛋白提取率增長緩慢。然后再用標準酸溶液進行滴定，滴定所用無機酸的量相當(dāng)于被測樣品中的氨的量（滴定）， 根據(jù) 所測得的氨量即 可計算 出 樣品 的 氮含量。按照 20xxu/g的加酶量添加堿性內(nèi)切 蛋白酶， 在 40℃ 、 45℃ 、 50℃ 、 55℃ 的溫度下 下 水浴振蕩 2h，在反應(yīng)過程中不斷加酸或堿，維持反應(yīng) 液中 pH 在設(shè)定值 11177。標準蛋白質(zhì)溶液配制的濃度為 。 ? 纖維素酶水解 經(jīng)過水洗之后， 黃 酒糟中還有一些 粗纖維等 不溶性物質(zhì) 未能 有效除去，只 能通過酸法或酶法來降解。所以說酶法提取蛋白質(zhì) 是植物蛋白提取乃至未來食品 與生化 工藝發(fā)展方向 的指標 ??3 。 黃酒糟蛋白質(zhì)含量豐富、質(zhì)量較 好 ， 水不溶性的 谷蛋白 是其中含量最大的 ； 而且和 大米蛋白 相比較 ，黃酒糟中的蛋白 具有 堿溶解性較低 的優(yōu)點 。 而且 在這么多的酒糟研究中， 啤 酒糟的研究占了 絕大 多數(shù) 。 黃酒糟的各種成分主要來自釀酒原料。 Alcalase。 黃酒糟蛋白提取工藝的可行性分析 ................................................ 錯誤 !未定義書簽。 其中 氨基酸種類齊全，谷氨酸 的 含量最高，其次為亮氨酸和天冬氨酸。汪建國等人通過酸水解黃酒糟方式生產(chǎn)復(fù)合氨基酸 ??9 。同時， 因為 黃酒糟、白酒糟和啤酒糟中的組 成 含量也比較相似 ，這樣 深入 對 黃酒糟蛋白的研究開發(fā) 也就為其他酒糟的 開發(fā) 利用提供了可參考的 重要 依據(jù) ??13 。堿性 內(nèi)切 蛋白酶 對天然底物的專一性甚強， 有終端疏水性氨基酸 的 專一性，主要裂解疏水性氨基酸 的終端 如：亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸等，而疏水性氨基酸在終端比在肽鏈間的苦味小 ??14 。 最后干燥處理。0 .1 范圍 內(nèi)。反應(yīng)結(jié)束后在沸水浴中加熱 15min 進行酶滅活處理， 然后調(diào)整 pH 至 7，以 4000r/min 的速度離心 10min，收集上清液 ??3 。但黃酒糟蛋白提取工藝研究 10 當(dāng)加酶量 大于 20xxu/g時，蛋白提取率增長 趨勢 減緩。當(dāng) 料液比過高時則降低了酶的相對濃度，使其與底物碰撞的幾率大大降低 。 針對黃酒糟組織致密，粗纖維含量高的成分特點 ，使用堿性內(nèi)切蛋白酶 通過酶水解植物蛋白將 其中的 蛋白分解成氨基酸和分子量較小 但溶解性很好的 的短肽而提取出 來。 光陰荏苒 一揮間 ， 厲兵秣馬又四年 ，生命中最美好的四年大學(xué)生活就這樣將近尾聲。 沒錯 ，隨著論文的 結(jié)束 ， 也 意味著我生命中最純美的學(xué)生時代即將結(jié)束，盡管百般不舍， 但 這一天終究會在熙熙攘攘的喧囂中 毅然決然 的來臨。它賦予了學(xué)習(xí)者更大的自主性和更廣闊的思維空間，同時也對學(xué)習(xí)者提出了更高的要求。 畢竟 “ 經(jīng)師易得，人師難求 ” ， 在此 我要對老師再一次 表示 真摯 地感謝和深深的 敬 意。從方差分析 表 6 中 可 知，只有加酶量、 pH兩個因素在試驗設(shè)計水平上表現(xiàn)出顯著。因此該堿性內(nèi)切蛋白酶的最適反應(yīng)溫度是在 45~50℃ 之間。經(jīng)強堿堿化使之分解放出氨， 用水蒸氣蒸餾法 將氨蒸至 無機酸溶 液中 （蒸餾）。 （ 3） 反應(yīng)溫度對蛋白提取率的影響 準確稱取 經(jīng)處理過的黃 酒糟 ，按照 1:8 的 料 水比加水， 于 50℃ 的 水 浴鍋內(nèi)保溫，而后調(diào)整 pH 值到 11(采用 1mol/L的 NaOH 調(diào)整 )。 若查不到待測蛋白質(zhì)的 光吸收 值，則可選用一種與待測蛋白質(zhì)的酪氨酸和色氨酸含量相近的蛋白質(zhì)作為標準蛋白質(zhì)，用標準曲線法進行測定。 ? 水洗除雜 準確稱取 黃 酒糟 粉末 ，按 1:6 的 比例加水，攪拌使 黃 酒糟 粉末 均勻分散于水中，在 60℃ 的 溫度下水浴振蕩 30min，之后以 4000r/min 的速度離心 5min，棄上清液 。 酶法水解 反應(yīng) 條件溫和、副反應(yīng) 較 少、有害物質(zhì) 產(chǎn)生少 、水解程度 也 容易控制，特別是 對 營養(yǎng) 物質(zhì)成分 的保留 上 ，具有不可比擬的優(yōu)點 。植物蛋白具有較高的營養(yǎng)價值，是人們賴以生存的一類數(shù)量龐大的蛋白質(zhì)資源 。 目前， 酒 糟的研究方向 主要集中在酒糟液的分析測定 和性能比較 、酒糟液的分離和處 理、酒糟分離液和酒糟渣的綜合開發(fā)利用等方面。 我國擁 有黃酒生產(chǎn)企業(yè) 500 多家，因此，黃酒糟的數(shù)量 是 相當(dāng)可觀 的 。 [關(guān)鍵詞 ] 黃酒糟蛋白；堿性 內(nèi)切 蛋白酶；蛋白提取率；提取工藝 黃酒糟蛋白提取工藝研究 ii The Extraction Technology of Protein from Rice Wine Grains ? Biological Engineering Major Abstract: Rice wine originated in China. Rice wine grains that is the main byproduct of rice wine brewing industry is also a rich resource of protein. But its energy is relatively low , has much insoluble material and can’t be used directly,causing a great waste of protein single factor and orthogonal experiment,the optimum conditions for enzymic extraction of protein can be determined and they were:enzyme dosage 20xxu/g, pH 10, temperature 50℃ ,reaction time 2h and the ratio of stuff to water 1: these conditions ,the protein extraction rate was %. Key words: The rice wine grains protein。 本課題的研究內(nèi)容 .......................................................................................................... 3 2 試驗材料與方法 .................................................................................................................... 4 試驗材料 ......................................................................................................................... 4 試驗原料 ................................................................................................................... 4 試驗試劑 ..................................................................................................