【正文】 NA也會與蛋白質(zhì) SDS 復(fù)合物纏繞成大分子而與小分子質(zhì)粒 DNA分離。 實驗內(nèi)容 (P82) :DNA的瓊脂糖凝膠電泳 ： DNA的紫外分光光度法測定 (P39) DNA的提取與純化 (P70堿法 ) 實驗?zāi)康? ?掌握堿裂解法抽提質(zhì)粒的原理、步驟及各試劑的作用 。 電泳時，三者泳動速度大小關(guān)系（？？？） 12 最快 中 最慢 質(zhì)粒 DNA的基本特征： (1) 自主復(fù)制性 ：能獨立于染色體 DNA外自主復(fù)制； (2) 可擴增性 ：嚴(yán)緊型復(fù)制 復(fù)制 15個拷貝 松弛型復(fù)制 復(fù)制數(shù)十個拷貝； (3) 可轉(zhuǎn)移性 ：通過細(xì)菌結(jié)合作用從一個宿主細(xì)胞轉(zhuǎn)移到另一個宿主細(xì)胞； (4) 不相容性 ：具有相似復(fù)制子結(jié)構(gòu)特征的兩種不同質(zhì)粒不能穩(wěn)定地存在于同一受體細(xì)胞內(nèi)。l到新 EP管，加入等體積 500181。 339。 分類 Ⅰ 、 Ⅱ 、 Ⅲ （基因工程技術(shù)中常用 Ⅱ 型） 第一個字母取自產(chǎn)生該酶的細(xì)菌屬名 ， 用大寫； 第二、第三個字母是該細(xì)菌的種名，用小寫； 第四個字母代表株； 用羅馬數(shù)字表示發(fā)現(xiàn)的先后次序。（保護作用） ③ Tris?HCl 能使溶菌液維持溶菌作用的最適 PH范圍（緩沖作用） 21 溶液 II： 由 SDS（ 十二烷基硫酸鈉 ） 與 NaOH 組成 (裂解 、 變性 ) ① SDS的作用是解聚核蛋白并與蛋白質(zhì)分子結(jié)合使之 變性（裂解細(xì)胞和蛋白質(zhì)變性作用） ② NaOH（ PH12）的作用是破壞氫鍵，使 DNA分子變性（ DNA變性作用） 22 溶液 III： HAC(乙酸 )和 KAC(乙酸鉀 )組成的高鹽溶液 (復(fù)性，分離 ) ① HAC溶液 能中和溶液 Ⅱ 的堿性，使染色體 DNA 變性而發(fā)生纏繞，并使質(zhì)粒 DNA復(fù)性。這些載體均需經(jīng)人工構(gòu)建，除去致病基因，并賦予一些新的功能，如有利于進行篩選的標(biāo)志基因、單一的限制酶切點等。 14 理想的克隆載體： (1) 分子質(zhì)量小、多拷貝、松弛控制型 ； (2) 具有多種常用的限制酶的單切點 ； (3) 能插入較大的外源 DNA片段 ； (4) 具有容易操作的檢測表型 。l的 酚與 氯仿 /異