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第八章食品中致病菌和病毒(留存版)

2025-09-15 13:19上一頁面

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【正文】 平 板血 平 板B a i r d P a r k e r 平 板觀 察 溶 血涂 片 染 色 血 漿 凝 固 試 驗(yàn)報(bào) 告 3 6 ℃ 177。 檢驗(yàn)方法 1)常規(guī)肉毒梭菌的檢出 GB/T 2022 2) PCR法 食 品毒 素 檢 測(cè)增 菌 , 產(chǎn) 毒 培 養(yǎng)3 0 ℃ , 5 d報(bào) 告( 一 )毒 素 檢 測(cè)報(bào) 告( 二 )觀 察 生 長(zhǎng) 性 狀 ,染 色 鏡 檢分 離 培 養(yǎng)觀 察 菌 落 性 狀 ,染 色 鏡 檢增 菌 , 產(chǎn) 毒 培 養(yǎng)3 0 ℃ , 5 d毒 素 檢 測(cè) 培 養(yǎng) 檢 查報(bào) 告 ( 三 )報(bào)告(一):檢樣含某型肉毒毒素 報(bào)告(二):檢樣含某型肉毒梭菌 報(bào)告(三):由樣品分離的菌株為某型肉毒梭菌 致病性弧菌 弧菌屬共有 37個(gè)種(變種),其中已明確又 12個(gè)種對(duì)人類有致病作用。鑒于國(guó)外對(duì)出口食品中多種致病性弧菌的要求和重視,有必要探討“同一程序同時(shí)檢測(cè)多種弧菌”方法。電鏡觀察需要的樣品量為 106~ 107個(gè)病毒顆粒 /mL排泄物。 ? 目前認(rèn)為病毒性肝炎病原體至少有五種,包括甲型肝炎病毒( HAV)、乙型肝炎病毒( HBV)、丙型肝炎病毒( HCV)、丁型肝炎病毒( HDV)、戌型肝炎病毒( HEV),它們的特性、傳播途徑、臨床經(jīng)過均不完全相同,但它們均能引起肝炎病變。由于種類的不同,瘋牛病的潛伏期長(zhǎng)短不同,一般在 2到 30年之間。 受瘋牛病危害的不僅是牛,人若食用了被污染了的牛肉、牛脊髓等,也有可能染上致命的新型克-雅氏癥。高致病性禽流感最為嚴(yán)重,發(fā)病率和死亡率均高,感染的雞群常?!叭姼矝]”。 1999年 7月 Moynagh等報(bào)道了三種理想的方法: 單抗檢測(cè) PrPSC的免疫印跡法( Prionics) 多克隆抗體檢測(cè) PrPSC的化學(xué)發(fā)光 ELISA( Enfer)法 在變性和濃縮后用兩種單抗檢測(cè) PrPSC的夾心免疫法( CEA) 禽流感病毒 ? 禽流感是禽流行性感冒的簡(jiǎn)稱,它是一種由甲型流感病毒的一種亞型(也稱禽流感病毒)引起的傳染性疾病,被國(guó)際獸疫局定為甲類傳染病,又稱真性雞瘟或歐洲雞瘟。英國(guó)是發(fā)生瘋牛病最多的國(guó)家, 1999年統(tǒng)計(jì)占總發(fā)病數(shù)的 99%。 ? 另外,檢查方法還有補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附和免疫黏附血凝試驗(yàn)等方法。高敏感的 RTPCR方法依賴于 PCR引物的設(shè)計(jì)。 ? 自 2022年以來,日本每年冬季都會(huì)爆發(fā)諾瓦克病毒,其中一些和牡蠣 (生蠔 )和生海鮮有關(guān)。 用 PCR方法檢測(cè)產(chǎn)腸毒素的霍亂弧菌敘述了霍亂腸毒素cholera Toxin (T)基因 ( 2) AOAC官方分析方法 牡蠣中的霍亂弧菌:升溫富集法( ) 創(chuàng)傷弧菌的脂肪酸氣相色譜鑒定法 AOAC.() 美國(guó) midi公司生產(chǎn)的 shelock微生物鑒定系統(tǒng)。 ? 肉毒梭菌在自然界的分布具有某種區(qū)域性差異,顯示出生態(tài)上的差異傾向。 ? 血漿凝固酶是鑒別葡萄球菌有無致病性的重要指標(biāo)。標(biāo)記的DNA:RNA雜交作用 GENPROBE發(fā)光儀檢測(cè)。 ④ 生物化學(xué)篩選: 排除大多數(shù)非沙門氏菌,也提供了沙門氏菌培養(yǎng)物菌屬的初步鑒定。 ( 1)傷寒、副傷寒 由沙門氏屬中的傷寒桿菌和甲、乙、丙型副傷寒桿菌引起。以 BGLB產(chǎn)氣為陽性。 2h,觀察是否產(chǎn)氣。 5 革蘭氏染色: 取 18h營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)物作革蘭氏染色。 1℃ , 1824h 挑取 510個(gè)可疑菌落接種 MUGLST ↓36177。 ? 改良山梨醇麥康凱瓊脂( TCSMAC):山梨醇麥康凱瓊脂加入過濾除菌的 1%亞碲酸鉀溶液,使終濃度 ,頭孢克污,使終濃度為 。 腸出血性大腸桿菌( Enterohemorrhagic E. coli)。 ?在普通培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)。 ?腸致病性大腸桿菌( Enteropathogenic E. coli, EPEC)是嬰兒腹瀉的主要病原菌,具有高度傳染性,嚴(yán)重者可致死,成人少見。 分離 ? 將 mEC肉湯培養(yǎng)物 10倍遞增稀釋。 2 MRVP培養(yǎng)基: 在 36177。 ? 試驗(yàn)方法:將待試純培養(yǎng)物小量接種于試驗(yàn)培養(yǎng)基管,于 36177。 1℃ 培養(yǎng) 24177。 沙門氏菌屬( Salmonella) ?沙門氏菌是引起食物中毒的重要病原菌。 ( 4)慢性腸炎 沙門氏桿菌可引起慢性、持久性腸炎。 在 TSI瓊脂中,典型的沙門氏菌培養(yǎng)物可使斜面呈堿色(紅色),底層呈酸色(黃色),產(chǎn)生 H2S(瓊脂變?yōu)楹谏┗虿划a(chǎn)生 H2S。靶順序?yàn)?rRNA。 1 ℃ , 2 4 h 3 6 ℃ 177。在這 12種致病菌種,最重要的,也是問題最多的是 O1型霍亂弧菌、非 O1型霍亂弧菌、副溶血性弧菌和創(chuàng)傷弧菌。 檢驗(yàn)程序 25g樣品 +225mL APW(1% NaCl ) 增菌 ↓37℃ 816h 取 10mL加入雙倍 APW ↓37℃ 68h 選擇 選擇培養(yǎng)基 TCBS(霍利斯用非選擇性的羊血球瓊脂) ↓37℃ 24h 定弧菌 取黃色或綠色菌落做 G染色、氧化酶、動(dòng)力 ↓ O/129(150ug)、 D甘露糖 分組 初步鑒定 : 0% NaCl , 1% NaCl、硝酸鹽還原、精氨酸雙水解酶、賴氨酸脫羧、鳥氨酸脫羧、 (氧化酶 ) 分成 5組 ↓ 確證 最后鑒定 病毒 諾瓦科病毒( Norwalk virus) ? 1972年首次發(fā)現(xiàn)。這個(gè)技術(shù)僅在發(fā)病早期適用。 項(xiàng)目 甲型肝炎 乙型肝炎 丙型肝炎 丁型肝炎 戌型肝炎 病毒 HAV HBV HCV HDV HEV 病毒分類 微小核糖核酸病毒 嗜肝脫氧核糖核酸病毒 黃病毒 (缺陷病毒) 杯狀病毒 病毒大小 27nm 42nm 30~ 60nm 40nm 27~ 34nm 基因 ss
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