【正文】 性、低致病性和非致病性禽流感三大類。人感染禽流感的主要傳播 途徑是接觸染病的雞、鴨，也存在呼吸道傳播的可能。低致病性禽流感可使禽類出現(xiàn)輕度呼吸道癥狀，食量減少，產(chǎn)蛋量下降，出現(xiàn)零星死亡。它是一種傳染性蛋白因子，主要成分是一種蛋白酶抗性蛋白（ PrP）。 截至 2022年 12月底，中國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)瘋牛病。值得注意的是遠(yuǎn)隔千山萬(wàn)水的日本，在 2022年也報(bào)告了亞洲首例瘋牛病。病牛腦組織呈海綿狀病變，并出現(xiàn)步態(tài)不穩(wěn)、平衡失調(diào)、搔癢、煩燥不安等癥狀，通常在 14至 90天內(nèi)死亡。另外，通過血液也可傳播。 甲肝病毒（ HAV） ? 病毒性肝炎是當(dāng)前危害人類健康的疾病之一。實(shí)驗(yàn)需 6d，同時(shí)還需要放射性同位素標(biāo)記。 檢測(cè)方法 （ 1）免疫電鏡法（ IEM） NV被發(fā)現(xiàn)后很長(zhǎng)一段時(shí)間內(nèi)，電鏡一直是檢測(cè)的主要手段，具有直接、可靠的優(yōu)點(diǎn)。另一起病例原因是運(yùn)垃圾船將垃圾倒在正在捕撈貝類的區(qū)域。 致病性弧菌的檢測(cè)方法 以上介紹的方法均是以單一或少數(shù)目標(biāo)菌（ NMKL為四種）為目的的設(shè)計(jì)的程序。 ? 由霍亂弧菌 E1 Tor生物型引起的癥狀較輕，病程也短。 ? 歐美國(guó)家：肉類食品、罐頭食品； ? 日本等沿海國(guó)家：進(jìn)食水產(chǎn)品； ? 我國(guó)內(nèi)地：進(jìn)食發(fā)酵食品（如臭豆腐、豆瓣醬、豆豉等）。它們能同編碼腸毒素有關(guān)的基因序列雜交，這類探針能檢測(cè)腸毒素 A、 B、 C和 E?？蓱?yīng)用 8個(gè)型的凝固酶抗血清進(jìn)行分型試驗(yàn)，用來(lái)研究葡萄球菌的流行病學(xué)情況。產(chǎn)生葡萄球菌腸毒素的還可引起食物中毒。 ③ 熒光酶標(biāo)試劑盒 檢測(cè)彎曲桿菌的探針是用非放射性物質(zhì)標(biāo)記的。 ? 彎曲菌以病原菌和共生菌廣泛存在于動(dòng)物中，家禽家畜是主要的貯存宿主和傳染源，在傳染或帶菌動(dòng)物的腸道和生殖道內(nèi)容物中含有大量的彎曲菌。 ? 選擇性增菌 ? 選擇性平板分離 混勻培養(yǎng)物，用直徑 3mm的接種環(huán)， 1滿環(huán)（ 10ul）分別劃線接種于亞硫酸鉍（ BS）瓊脂、木糖賴氨酸去氧膽酸鹽（ XLD）瓊脂和HEKTONE氏腸道菌（ HE）瓊脂平板上，于 35℃培養(yǎng) 24h后，根據(jù)沙門氏菌在不同選擇性瓊脂平板上的菌落特征挑取典型或可疑菌落。 ? 帶殼蛋類 在流水下用刷子刷洗蛋類，并瀝干。病程較短，一般 2~4d, 可完全恢復(fù)。 ? 沙門氏菌不產(chǎn)生外毒素，但能產(chǎn)生毒力較強(qiáng)的內(nèi)毒素。 ?GeneTARK研制出用浸染棒檢測(cè)大腸桿菌中16SrRNA的探針，樣品需前增菌處理，以異硫氰熒光素（ FITC）標(biāo)記探針，再用辣根過氧化物酶標(biāo)記抗 FITC抗體檢測(cè)雜交復(fù)合物。 1℃ 培養(yǎng) 48177。 ? 證實(shí)試驗(yàn)：挑取平板上的可疑菌落，進(jìn)行革蘭氏染色觀察。 ? 如需要進(jìn)一步檢測(cè) Vero毒素基因的存在，可通過接種 Vero細(xì)胞或 Hela細(xì)胞，觀察細(xì)胞病變進(jìn)行判定，或可使用基因探針檢測(cè)和聚合酶鏈反應(yīng)（ PCR）檢測(cè)法。吲哚的存在可用顯色反應(yīng)表現(xiàn)出來(lái)。 3 Koser氏枸椽酸鹽肉湯： 于 36177。 1℃ 培養(yǎng) 24177。 1℃ 培養(yǎng) 18~24小時(shí)，出現(xiàn)產(chǎn)氣，且無(wú)熒光者，分離到普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂。于 41177。 ?腸出血性大腸桿菌（ Enterohemorrhagic E. coli，EHEC)可引起散發(fā)性或爆發(fā)性出血性結(jié)腸炎。腹瀉常為自限性，一般 2~3d即愈。一般情況下，多不致病，是人和動(dòng)物腸道中的常居菌。第八章 食品中致病菌和病毒 腸桿菌科 ?腸桿菌科是存在于人和動(dòng)物腸道或自然界中的一群生物學(xué)性狀很相似的革蘭氏陰性短小桿菌。 ?大腸桿菌 E. coli是腸道正常菌群。 腸產(chǎn)毒性大腸桿菌（ Enterotoxigenic E. coli， ETEC) ?引起嬰幼兒和旅游者腹瀉，出現(xiàn)輕度水瀉，也可呈嚴(yán)重霍亂樣癥狀。 ?EIEC可引起豚鼠角結(jié)合膜炎，臨床上可借此協(xié)助鑒定 EIEC。 增菌培養(yǎng) ? 稱取 25克樣品放入 225mL mEC中，均質(zhì)。 鑒定 ? 挑取 TCSMAC上的可疑菌落，接種 MUGLST，于 36177。 1 色氨酸肉湯 ：在 36177。如培養(yǎng)物變紅色 ,為甲基紅試驗(yàn)陽(yáng)性 ,若變黃色則為陰性反應(yīng)。 靛基質(zhì)（ Indole）試驗(yàn)： ? 某些細(xì)菌能分解蛋白胨中的色氨酸，生成吲哚。 ? 用上述方法在樣品中分離獲得的純菌落，經(jīng)抗 O157:H7標(biāo)準(zhǔn)血清或 EHEC O157:H7膠乳凝集測(cè)試為陽(yáng)性者，報(bào)告檢出腸出血性大腸桿菌 O157:H7。 1℃ 培養(yǎng) 1824h，觀察菌落形態(tài)。 36177。 (2) PCR方法 ?大腸桿菌是食品和水源污染糞便的指示菌?？筛鶕?jù)沙門氏菌的菌體抗原（ O抗原）分群（ A, B, C等），再根據(jù)其鞭毛抗原（ H抗原）分血清型（ 2等）。臨床癥狀主要是胃腸炎。 ? 粉狀樣品 應(yīng)將 225ml增菌液分?jǐn)?shù)次加入，并用滅菌玻棒攪拌成均勻懸液。 （ 1）沙門氏菌的增菌和分離 ? 預(yù)增菌 將制備好的預(yù)增菌試液于 35℃ 培養(yǎng) 24h后，輕輕振搖培養(yǎng)液。 ? 彎曲菌是革蘭氏陰性菌，呈弧形和 S型。 ② PCR法 根據(jù)彎曲菌屬 16sRNA高保守序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物；在合適的反應(yīng)條件和反應(yīng)體系下進(jìn)行反應(yīng)；最后利用電泳觀察結(jié)果。人一旦感染該菌，當(dāng)機(jī)體抵抗力減弱或皮膚受損時(shí)，易被感染，引起傷口化膿、中耳炎、毛囊炎等。大多數(shù)致病性葡萄球菌能產(chǎn)生此酶，而非致病菌不產(chǎn)生。 ③ 大多數(shù)檢測(cè)葡萄球菌的探針是針對(duì)腸毒素的。 ? 肉毒梭菌一年四季均可發(fā)生，發(fā)病主要與飲食習(xí)慣有密切的關(guān)系。 ? 霍亂弧菌引起的疾病叫霍亂。 （ 5） 不同國(guó)家的方法 日本、瑞士等國(guó)均有相應(yīng)檢驗(yàn)方法。 ? 20世紀(jì) 70年代在澳大利亞爆發(fā)了有 2022多人感染諾瓦科病毒。 2022年到 2022年，諾瓦克感染例子幾乎是之前的 3倍。 （ 2）放射免疫和生物素－親和素法（ RIA法） 檢測(cè)抗原與 IEM法相比在靈敏度上沒有明顯差異，但用RIA法能檢測(cè)出急性期和恢復(fù)期之間抗體升高 4倍以上，對(duì)流行病學(xué)調(diào)查更有意義。盡管用于擴(kuò)增的 RdRp區(qū)域基因的引物能擴(kuò)增大多數(shù)的諾瓦科病毒，但由于諾瓦科病毒遺傳多樣性使這些引物很難擴(kuò)增所有的諾瓦科病毒?？赏ㄟ^污染水源、食物、食具和手等方式進(jìn)行傳播，特別是經(jīng)水和食物，可引起爆發(fā)性流行。 瘋牛病－朊病毒 ?瘋牛病 (“mad cow” disease) 學(xué)名為“牛海綿狀腦病” (Bovine Spongiform Encephalopath BSE) ，是一種發(fā)生在牛身上的進(jìn)行性中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變，癥狀與羊瘙癢癥類似，俗稱“瘋牛病”。2022年后，西班牙、瑞典、捷克、希臘、斯洛伐克、芬蘭、奧地利先后“陷落”。截至到 2022年，英國(guó)共屠宰病牛 1100多萬(wàn)頭，經(jīng)濟(jì)損失達(dá)數(shù)百億英鎊 。 ? 朊蛋白是一種以糖蛋白為主體的特殊病原因子，其分子量很小。 非致病性禽流感不會(huì)引起明顯癥狀，僅使染病的禽鳥體內(nèi)產(chǎn)生病毒抗體。