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正文內(nèi)容

臨床微生物室sop(留存版)

  

【正文】 標(biāo)本保存采集標(biāo)本后立即送到實(shí)驗(yàn)室,不能及時(shí)送檢可置室溫,放置時(shí)間不應(yīng)超過2h。 斜面接種法 此法主要用于鑒定或保存菌種,或觀察細(xì)菌的某些生化特性和動(dòng)力。、巧克力瓊脂平板、中國(guó)藍(lán)平板的第一區(qū),然后用接種環(huán)劃第二、第三區(qū)...。35`C培養(yǎng)24小時(shí)后觀察是否有細(xì)菌生長(zhǎng),無細(xì)菌生長(zhǎng)為合格。 樣本的接收 樣本接收人員應(yīng)嚴(yán)格按照〈〈標(biāo)本接收、標(biāo)識(shí)程序〉〉、〈〈標(biāo)本拒收程序〉〉對(duì)樣本接收或拒收,并記錄。 4. 程序 微生物室所開設(shè)的檢測(cè)項(xiàng)目應(yīng)參加實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)計(jì)劃。 按制造商的要求檢測(cè)并記錄儀器的運(yùn)行情況,定期進(jìn)行校準(zhǔn)。 操作規(guī)程 規(guī)定檢驗(yàn)申請(qǐng)、標(biāo)本采集開始到發(fā)出檢測(cè)結(jié)果報(bào)告為止的全過程的操作規(guī)程和管理程序。3. 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不能高聲談笑,不準(zhǔn)吸煙、飲食,不要用手指觸摸頭、面等部位以免造成污染。,應(yīng)立即用肥皂洗手并沖洗干凈,再外用消毒藥水,如誤入口內(nèi),應(yīng)立即吐出,并用1:1000高錳酸鉀溶液或3%雙氧水漱口,必要時(shí)根據(jù)實(shí)際情況服用有關(guān)藥物。2. 一般藥敏實(shí)驗(yàn)用的標(biāo)準(zhǔn)菌ATCC2592ATCC25923和ATCC27853,菌種保管應(yīng)有專人負(fù)責(zé),保存于冰箱中,確保菌種安全。 江西省新余市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版 本 號(hào):文件標(biāo)題:微生物實(shí)驗(yàn)室安全工作制度文件狀態(tài):受控文件編號(hào):修改日期:2013年1月30日文件種類:程序文件生效日期:2013年6月30日編 制 者:王騰勇批 準(zhǔn) 者:賀愛民審 核 者:賀愛民發(fā) 放 號(hào):微生物實(shí)驗(yàn)室安全工作制度。不符合要求時(shí)應(yīng)拒收。試劑檔案內(nèi)容包括:試劑名稱、批號(hào)、數(shù)量、生產(chǎn)商、接收日期、失效日期、儲(chǔ)存條件、試劑說明書、相關(guān)質(zhì)控文件及接收人員簽字等。5. 實(shí)驗(yàn)室每天用紫外線進(jìn)行消毒空氣,作好記錄,并定期檢測(cè);接種環(huán)(針)使用后應(yīng)立即在火焰燈上燒灼滅菌;沾有活菌的玻片、試管等玻璃制品應(yīng)立即放在鋼精鍋內(nèi)統(tǒng)一高壓滅菌;檢測(cè)剩余的標(biāo)本及接觸過微生物的平板、鑒定板(條)等塑料制品均用黃色塑料袋裝好,置黃色桶內(nèi),統(tǒng)一滅菌處理。5. 無菌物品如棉簽、棉球、紗布及其容器應(yīng)在有效期內(nèi)使用,開啟后使用時(shí)間不得超過24小時(shí)。二、檢驗(yàn)科在生物安全防范管理工作中應(yīng)達(dá)到以下要求:1. 細(xì)菌室工作人員須穿工作服,戴工作帽,必要時(shí)穿隔離衣、戴口罩、手套。3. 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不能高聲談笑,不準(zhǔn)吸煙、飲食,不要用手指觸摸頭、面等部位以免造成污染。記錄驗(yàn)收結(jié)果,并在試劑外包裝上標(biāo)明接收時(shí)間及接收人員簽名,保存質(zhì)量保證書。 培養(yǎng)基 成品培養(yǎng)基 由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)評(píng)估、訂購(gòu)。 江西省新余市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版 本 號(hào):文件標(biāo)題:紫外線消毒制度文件狀態(tài):受控文件編號(hào):修改日期:2013年1月30日文件種類:程序文件生效日期:2013年6月30日編 制 者:王騰勇批 準(zhǔn) 者:賀愛民審 核 者:賀愛民發(fā) 放 號(hào):紫外線消毒制度1. 微生物實(shí)驗(yàn)室每天工作結(jié)束后需對(duì)環(huán)境進(jìn)進(jìn)行紫外線消毒40分鐘以上,并做好記錄。,并用肥皂和清水洗凈。、持物鉗、鑷子等的消毒液要定期更換。2. 工作人員在工作過程中發(fā)生皮膚破損、化學(xué)試劑燒傷皮膚、眼睛或者病原微生物的感染等必須有做相應(yīng)的處理,上報(bào)醫(yī)務(wù)科,并做記錄。 檢驗(yàn)人員執(zhí)行質(zhì)量管理程序。 要求制定儀器的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。 江西省新余市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版 本 號(hào):文件標(biāo)題:室間質(zhì)量控制管理程序文件狀態(tài):受控文件編號(hào):修改日期:2013年1月30日文件種類:程序文件生效日期:2013年6月30日編 制 者:王騰勇批 準(zhǔn) 者:賀愛民審 核 者:賀愛民發(fā) 放 號(hào):室間質(zhì)量控制管理程序1. 目的 規(guī)范室間質(zhì)量控制管理程序,確保檢驗(yàn)質(zhì)量。 生成微生物檢驗(yàn)標(biāo)本標(biāo)簽 護(hù)士應(yīng)在核對(duì)醫(yī)囑、病人信息和檢驗(yàn)申請(qǐng)信息后,按照〈〈微生物標(biāo)本檢驗(yàn)標(biāo)簽程序〉〉生成申請(qǐng)單和微生物檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)簽,并將微生物檢驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)簽正確張貼于標(biāo)本容器上。 外觀檢查 合格培養(yǎng)基的標(biāo)準(zhǔn):完整、瓊脂附于平板底部,血平板應(yīng)不透明、沒有溶血情況,平板顏色好、濕潤(rùn),無干裂、無污染、無渾濁或沉淀、無凍傷、無過熱現(xiàn)象,瓊脂厚度至少3mm。門診病人要同時(shí)登記住址、聯(lián)系電話等信息。每一區(qū)域的劃線應(yīng)接觸上一區(qū)域的接種線2~3次,使菌量逐漸減少,以形成單個(gè)菌落。如懷疑厭氧菌感染,應(yīng)做床邊接種或接種運(yùn)送培養(yǎng)基。此法可提高陽(yáng)性檢出率。
   直腸拭子 如不易獲得糞便時(shí),或排便困難患者及嬰兒,可用直腸拭子采取,即以無菌棉拭用保存液或生理鹽水濕潤(rùn)后,插入肛門內(nèi)4~5cm(幼兒2~3cm)輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)取出,插入卡布(CaryBlair)運(yùn)送培養(yǎng)基內(nèi)或無菌容器內(nèi)送檢。只有懷疑霍亂弧菌及菌群失調(diào)所致腹瀉時(shí),才作直接涂片檢查(觀察動(dòng)力和菌群比例)。 糞便標(biāo)本有很多雜菌,但不能由此認(rèn)為糞便標(biāo)本的采集就無需注意雜菌污染,為防止污染必須注意標(biāo)本的采集方法。 痰涂片白細(xì)胞10/低倍視野,上皮細(xì)胞25/低倍視野。 結(jié)核分枝桿菌涂片 參見《結(jié)核分枝桿菌檢驗(yàn)操作規(guī)程》。若從患者痰標(biāo)本中查見致病菌或條件致病菌,提示可能有呼吸道細(xì)菌感染。 標(biāo)本保存采集標(biāo)本后立即送到實(shí)驗(yàn)室,不能及時(shí)送檢可置室溫,放置時(shí)間不應(yīng)超過2h,切勿放冰箱,否則影響檢出率。經(jīng)培養(yǎng)48h,仍無細(xì)菌生長(zhǎng)者,報(bào)告“培養(yǎng)2日無細(xì)菌生長(zhǎng)”。 兩側(cè)腎盂尿 由??漆t(yī)生采集,左右側(cè)標(biāo)本必須標(biāo)明,避免混淆而誤診。革蘭陰性菌鑒定卡(GNI+)、革蘭陰性細(xì)菌藥敏卡(GNS)、革蘭陽(yáng)性菌鑒定卡(GPI)、革蘭陽(yáng)性細(xì)菌藥敏卡(GPS)、真菌鑒定卡(YBC)、藥敏紙片、ATB板條等,有效期及儲(chǔ)存條件參見試劑說明書。參考文獻(xiàn)1 CNASGL23《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用指南》, 20082周庭銀編著. 臨床微生物學(xué)診斷與圖解. 第二版. 上海: 上??茖W(xué)技術(shù)出版社, 20073 葉應(yīng)嫵, 王毓三, . 第3版 .南京: 東南大學(xué)出版社, 20064 Murray PR. Manual of Clinical Microbilogy. 9th ed. Washington: ASM Press, 20075 ISO15189:2007《醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則》, 2007 江西省新余市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版 本 號(hào):文件標(biāo)題:尿液標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件狀態(tài):受控文件編號(hào):修改日期:2013年1月30日文件種類:程序文件生效日期:2013年6月30日編 制 者:王騰勇批 準(zhǔn) 者:賀愛民審 核 者:賀愛民發(fā) 放 號(hào):尿液標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1. 目的規(guī)范尿液標(biāo)本細(xì)菌學(xué)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程,確保檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。 新生隱球菌涂片檢查 取腦脊液的離心沉淀物作墨汁負(fù)染色,或取腦脊液的離心沉淀物接種于沙氏培養(yǎng)基上,置于35℃培養(yǎng)2~5日,根據(jù)菌落特性,涂片染色鏡檢作出報(bào)告。3. 標(biāo)本 標(biāo)本類型 腦脊液。 未檢出致病菌時(shí)應(yīng)報(bào)告“正常菌群”。6. 檢驗(yàn)步驟接收標(biāo)本后,立即對(duì)標(biāo)本進(jìn)行編號(hào)、登記。
   在留取痰之前,用清水反復(fù)漱口,應(yīng)從氣管深部咳出痰,吐入無菌容器內(nèi)。
   真菌培養(yǎng) 參見《結(jié)核分枝桿菌檢驗(yàn)操作規(guī)程》。 接種針、接種環(huán)、電熱灼燒器、顯微鏡、孵育箱、CO2 培養(yǎng)箱等。胸腔感染的病原菌以結(jié)核分枝桿菌多見,其次是金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、大腸埃希菌和銅綠假單胞菌等;腹腔感染的病原菌以腸道細(xì)菌如大腸埃希菌、糞腸球菌,以及結(jié)核分枝桿菌多見;心包炎和關(guān)節(jié)腔液以金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、大腸埃希菌和銅綠假單胞菌等多見。 涂片檢查 膿性標(biāo)本直接涂片。以接種針挑取細(xì)菌培養(yǎng)物,插入半固體培養(yǎng)基的中央,穿刺至培養(yǎng)基底部,然后沿原穿刺線退出接種針。參考文獻(xiàn)1 周庭銀編著,臨床微生物學(xué)診斷與圖解(第二版).上??茖W(xué)技術(shù)出版社,20072 葉應(yīng)嫵,王毓三,:東南大學(xué)出版社,2006 江西省新余市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版 本 號(hào):文件標(biāo)題:標(biāo)本接種標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件狀態(tài):受控文件編號(hào):修改日期:2013年1月30日文件種類:程序文件生效日期:2013年6月30日編 制 者:王騰勇批 準(zhǔn) 者:賀愛民審 核 者:賀愛民發(fā) 放 號(hào):標(biāo)本接種標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程1. 目的 規(guī)范標(biāo)本接種標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程,確保檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。2. 范圍 血液、骨髓標(biāo)本。 無廠商特別說明時(shí),不同批號(hào)的試劑不可混用。 結(jié)果上報(bào)截止日期之前嚴(yán)禁將質(zhì)控標(biāo)本送至其他單位代做。 商品化培養(yǎng)基應(yīng)嚴(yán)格驗(yàn)收,并保存質(zhì)控合格證明文件。參見《結(jié)果報(bào)告程序》。9. 分離出甲類或乙類傳染病菌株,應(yīng)及時(shí)上報(bào)院感科,未經(jīng)上級(jí)同意不得帶出 實(shí)驗(yàn)室,并由專人處理。 江西省新余市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版 本 號(hào):文件標(biāo)題:尖銳器具安全使用制度文件狀態(tài):受控文件編號(hào):修改日期:2013年1月30日文件種類:程序文件生效日期:2013年6月30日編 制 者:王騰勇批 準(zhǔn) 者:賀愛民審 核 者:賀愛民發(fā) 放 號(hào):尖銳器具安全使用制度1. 除特殊情況下,禁止在實(shí)驗(yàn)室使用針、注射器及其它利器,盡可能使用塑料器材代替玻璃器材。 江西省新余市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室版 本 號(hào):文件標(biāo)題:微生物實(shí)驗(yàn)室消毒隔離措施制度文件狀態(tài):受控文件編號(hào):修改日期:2013年1月30日文件種類:程序文件生效日期:2013年6月30日編 制 者:王騰勇批 準(zhǔn) 者:賀愛民審 核 者:賀愛民發(fā) 放 號(hào):微生物實(shí)驗(yàn)室消毒隔離措施制度,上班前、下班后開紫外燈(40分鐘)進(jìn)行空氣消毒。,接種環(huán)用完后應(yīng)立即火焰滅菌,沾菌吸管、玻片等用后應(yīng)浸泡在消毒液內(nèi)。 設(shè)置試劑警戒線應(yīng)當(dāng)考慮到:試劑供貨周期的長(zhǎng)短;試劑有效期長(zhǎng)短;質(zhì)控試驗(yàn)需要的時(shí)間(要保證新進(jìn)試劑一旦失控時(shí),實(shí)驗(yàn)室仍有足夠試劑保證試驗(yàn)的正常進(jìn)行)。 試劑使用 使用前,工作人員應(yīng)確認(rèn):試劑處于有效期內(nèi)、質(zhì)控合格、標(biāo)識(shí)明確、儲(chǔ)存條件正確、存放合理。職責(zé).、申購(gòu)、驗(yàn)收等管理工作。在進(jìn)行各種檢驗(yàn)時(shí),應(yīng)避免污染,在進(jìn)行特殊傳染病檢驗(yàn)后,應(yīng)及時(shí)進(jìn)行消毒,遇有場(chǎng)地、工作服或體表污染時(shí),應(yīng)立即處理,防止擴(kuò)散,并視污染情況向上級(jí)報(bào)告。. .. . ..臨床微生物室標(biāo)準(zhǔn)操作程序SOP臨床微生物室標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP)目錄檢驗(yàn)科生物安全防范管理制度、紫外線消毒制度1微生物實(shí)驗(yàn)室安全工作制度、病原微生物保存制度2微生物實(shí)驗(yàn)室安全工作制度、病原微生物保存制度2微生物實(shí)驗(yàn)室消毒隔離措施制度、微生物實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本采集運(yùn)輸制度3微生物實(shí)驗(yàn)廢棄物處理制度、尖銳器具安全使用制度3微生物實(shí)驗(yàn)室消毒隔離措施制度、微生物實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本采集運(yùn)輸制度3微生物實(shí)驗(yàn)廢棄物處理制度、尖銳器具安全使用制度3工作人員保護(hù)制度、臨床微生物實(shí)驗(yàn)室消毒防護(hù)制度4微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理制度5微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理制度6室間質(zhì)量控制管理程序7室內(nèi)質(zhì)量控制管理程序8試劑制配質(zhì)檢操作程序
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