【正文】 β轉角的特定構象在一定程度上取決于它的氨基酸組成。 第四節(jié) 蛋白質結構測定與多肽人工合成 一、一級結構的研究方法 二、研究蛋白質構象的方法 三、肽的人工合成 一、一級結構的研究方法 1．測定氨基酸的組成 2．蛋白質的 N末端和 C末端的測定 3．二硫鍵的拆開和肽鏈的分離 4．肽鏈的部分水解和肽段的分離 5．肽段氨基酸順序的測定 6．二硫鍵位置的確定 1．測定氨基酸的組成 確定蛋白質所含氨基酸的種類，并明確每種氨基酸有多少。 ①肼解法 （ 2） C末端分析方法 ②羧肽酶水解法 ? 能從多肽鏈的 C端逐個的水解。 ? 可根據 不同的反應時間測出酶水解所釋放出的氨基酸種類和數量，從而知道蛋白質的 N末端殘基順序 。 亞基通常由一條多肽鏈組成，有時含兩條以上的多肽鏈，單獨存在時一般沒有生物活性。 氫鍵 （ 3） β轉角 蛋白質分子中，肽鏈經常會出現 180176。 例如，鏈中有脯氨酸，則螺旋被中斷，產生一個“結節(jié)”。 目前已確定蛋白質具有一級結構、二級結構，三級結構和四級結構等四個主要結構層次。 （ 1） α螺旋 ③每個螺旋周期包含 基，螺距為 nm，每個氨基酸沿螺旋軸的長度上升 nm。平行的 β片層結構中，兩個殘基的間距為 nm；反平行的 β片層結構，則間距為 nm。一個分子中的結構域區(qū)間以共價鍵相連。 N H 2 C H C O R 2 N C S N H C H C O R 2 N C H C O R 1 H H N H S : C C H C O R 1 H N N H C H C O R 2 S N H C N H O C R 1 C H N C O C H N H S C R 1 苯異硫氰酸酯 苯乙內酰硫脲 N H 2 C H C O R 2 + + + （ 1） N末端測定方法 ③丹磺酰氯法 ?在堿性條件下，丹磺酰氯（二甲氨基萘磺酰氯）可以與 N端氨基酸的游離氨基作用，得到丹磺酰 氨基酸。 A和 B來自胰臟； C來自柑桔葉； Y來自面包酵母 。 ? 在酸性條件下水解，得到黃色 DNP氨基酸。 1．蛋白質分子的二級結構 α螺旋 β折疊片 β轉角 無規(guī)卷曲 1．蛋白質分子的三級結構 蛋白質三級結構是指上述蛋白質的 α螺旋、 β折疊以及 β轉角等二級結構受側鏈和各主鏈構象單元間的相互作用，從而進一步卷曲、折疊成