【正文】 柱層析 ? 分配層析是根據(jù)欲分離組分在兩種互不混溶（或部分混溶）溶劑間溶解度的差異來(lái)實(shí)現(xiàn)的。 ? 最佳的硅膠活化條件為在 105~110degC加熱 30 min。 吸附柱層析 ? 保留時(shí)間和保留體積：組分在柱上的保留特性可用 保留時(shí)間 和 保留體積 來(lái)表示。 茨維特使用的實(shí)驗(yàn)裝置 色層分析法的種類 ? 按流動(dòng)相和固定相的性質(zhì)不同，色層分析可分為：氣固層析法、氣液層析法、液固層析法和液液層析法； ? 按固定相所處的狀態(tài)不同可分為：柱層析、紙層析和薄層層析； ? 按層析分離的原理不同可分為：吸附層析、分配層析、離子交換層析、凝膠層析等 色層分析法的種類 名稱 分離原理 吸附層析法 固定相是固體吸附劑，各組份在吸附劑表面的吸附能力不同 分配層析法 各組份在流動(dòng)相和靜止液相中的分配系數(shù)不同 離子交換層析法 固定相是離子交換劑，各組份與離子交換劑親和力不同 凝膠層析法 固定相是多孔凝膠，各組份的分子大小不同，因而在凝膠中受阻滯的程度不同 親和層析法 固定相只能與一種待分離組份專一結(jié)合，以此和無(wú)親和力的其經(jīng)組份分離 柱層析 ? 吸附柱層析：根據(jù)等分離物質(zhì)在固體吸附劑表面吸附能力的強(qiáng)弱來(lái)加以分離分析的技術(shù) ? 分配柱層析：根據(jù)欲分離組分在兩種互不混溶（或部分混溶）的溶劑間溶解度的差異來(lái)進(jìn)行分離的技術(shù) 吸附柱層析 ? 固液兩相中處于液相中的物質(zhì)在固液兩相的界面發(fā)生密集現(xiàn)象稱為 吸附 ，利用吸附劑對(duì)不同物質(zhì)具有不同吸附力使混合物得到分離的現(xiàn)象就叫 吸附層析 。 ? 由于脫水過(guò)程受到許多因素的影響，因此每批生產(chǎn)的氧化鋁，其表面積和表面孔穴結(jié)構(gòu)并不一致，活性也并不相同。 流動(dòng)相及其選擇 ? 為了使試樣中吸附能力稍有差異的各組分相分離，就必須根據(jù) 試樣的性質(zhì) ， 吸附劑的活性 ，選擇 適當(dāng)極性的流動(dòng)相 。通常流動(dòng)相應(yīng)預(yù)先用水飽和以防止把吸附于擔(dān)體上的水分帶走；通常還需加入醋酸、氨水等弱酸、弱堿，以抵制抑制被分離組分離解。 薄層層析法的速率理論 ? 平均塔板高度可表示為： ? 其中 Z0為液面與原點(diǎn)間的距離， a, b, c為三個(gè)常數(shù)，對(duì)于一定的層析系統(tǒng)和一定的溶質(zhì)（即被分離組分），它們的值不變。 各種特制薄層 各種特制薄層 ? 高效薄層：由顆粒十分細(xì)小，粒度十分均勻，一般直徑為 5~7mm的硅膠吸附劑，加上高度惰性的粘合劑，鋪成的質(zhì)地十分致密、均勻、平滑的高效薄層預(yù)制板。硅膠 GF254指既含煅石膏又含熒光指示劑的硅膠；不含粘合劑只含熒光指示劑的硅膠稱為硅膠HF254+366， 254nm (ZnSiO4?Mn)，366nm(ZnS ? CdS ? Ag) 薄層層析的吸附劑和薄層 ? 反相鍵合固定相的硅膠： 薄層層析的吸附劑和薄層 ? 鋪層方法：干法鋪層（氧化鋁干板）；濕法鋪層 ? 預(yù)制薄層板，燒結(jié)板（因玻璃粉混合燒結(jié)，可經(jīng)洗滌后重復(fù)使用），厚薄層板 各種特制薄層 ? 混合薄層：由兩種不同的吸附劑混合而成。點(diǎn)樣斑點(diǎn)在 2~3mm左右為佳，如試樣較稀，可等溶劑揮發(fā)后再在同一點(diǎn)多次點(diǎn)樣 ? 展開(kāi)可使用上升法（展開(kāi)較慢）、下降法（適用于小比移值試樣）、徑向法、雙向法（如氨基酸分離） 紙層析的顯色 ? 有色物質(zhì)可直接觀察 ? 無(wú)色物質(zhì)可用各種物理或化學(xué)方法顯色：紫外照射、利用顯色劑（酸堿指示劑、茚三酮）、還原劑（ SnCl2還原貴金屬離子金鉑鈀銠等） 薄層層析法 ? 薄層層析是在紙層析和柱層析的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種色層法。纖維素上有許多羥基，吸附水后成為固定相。 常用的吸附劑及其選擇 ? 聚酰胺： 常用的吸附劑及其選擇 ? 聚酰胺：一般說(shuō)來(lái)，能形成氫鍵基團(tuán)較多的溶質(zhì)，其吸附能力較大；對(duì)位、間位取代基團(tuán)都能形成氫鍵時(shí)，吸附能增大，鄰位的使吸附能力減?。环枷愫司哂休^多共軛雙鍵時(shí)，吸附能力增大；能形成分子內(nèi)氫鍵者，吸附能力減小。氧化鋁具有 吸附能力強(qiáng) 、 分離能力強(qiáng) 的優(yōu)點(diǎn)。 色層法的發(fā)現(xiàn) ? 俄國(guó)植物學(xué)家茨維特（ Tswett） 1906年提出色譜（ Chromatography）的概念， Tswett讓植物色素的石油醚萃取液流經(jīng)裝有碳酸鈣的管柱，并繼續(xù)以純凈的石油醚加以洗脫，得到三種顏色的 5個(gè)色帶。氧化鋁因生產(chǎn)時(shí)條件的不同可分為 中性 、 酸性 和 堿性 三