【正文】 柱層析 ? 分配層析是根據(jù)欲分離組分在兩種互不混溶（或部分混溶）溶劑間溶解度的差異來實現(xiàn)的。 ? 最佳的硅膠活化條件為在 105~110degC加熱 30 min。 吸附柱層析 ? 保留時間和保留體積：組分在柱上的保留特性可用 保留時間 和 保留體積 來表示。 茨維特使用的實驗裝置 色層分析法的種類 ? 按流動相和固定相的性質不同，色層分析可分為：氣固層析法、氣液層析法、液固層析法和液液層析法； ? 按固定相所處的狀態(tài)不同可分為：柱層析、紙層析和薄層層析； ? 按層析分離的原理不同可分為：吸附層析、分配層析、離子交換層析、凝膠層析等 色層分析法的種類 名稱 分離原理 吸附層析法 固定相是固體吸附劑，各組份在吸附劑表面的吸附能力不同 分配層析法 各組份在流動相和靜止液相中的分配系數(shù)不同 離子交換層析法 固定相是離子交換劑，各組份與離子交換劑親和力不同 凝膠層析法 固定相是多孔凝膠，各組份的分子大小不同，因而在凝膠中受阻滯的程度不同 親和層析法 固定相只能與一種待分離組份專一結合，以此和無親和力的其經組份分離 柱層析 ? 吸附柱層析：根據(jù)等分離物質在固體吸附劑表面吸附能力的強弱來加以分離分析的技術 ? 分配柱層析：根據(jù)欲分離組分在兩種互不混溶（或部分混溶）的溶劑間溶解度的差異來進行分離的技術 吸附柱層析 ? 固液兩相中處于液相中的物質在固液兩相的界面發(fā)生密集現(xiàn)象稱為 吸附 ，利用吸附劑對不同物質具有不同吸附力使混合物得到分離的現(xiàn)象就叫 吸附層析 。 ? 由于脫水過程受到許多因素的影響，因此每批生產的氧化鋁，其表面積和表面孔穴結構并不一致，活性也并不相同。 流動相及其選擇 ? 為了使試樣中吸附能力稍有差異的各組分相分離，就必須根據(jù) 試樣的性質 ， 吸附劑的活性 ，選擇 適當極性的流動相 。通常流動相應預先用水飽和以防止把吸附于擔體上的水分帶走；通常還需加入醋酸、氨水等弱酸、弱堿，以抵制抑制被分離組分離解。 薄層層析法的速率理論 ? 平均塔板高度可表示為： ? 其中 Z0為液面與原點間的距離， a, b, c為三個常數(shù)，對于一定的層析系統(tǒng)和一定的溶質（即被分離組分），它們的值不變。 各種特制薄層 各種特制薄層 ? 高效薄層：由顆粒十分細小，粒度十分均勻，一般直徑為 5~7mm的硅膠吸附劑，加上高度惰性的粘合劑，鋪成的質地十分致密、均勻、平滑的高效薄層預制板。硅膠 GF254指既含煅石膏又含熒光指示劑的硅膠；不含粘合劑只含熒光指示劑的硅膠稱為硅膠HF254+366， 254nm (ZnSiO4?Mn)，366nm(ZnS ? CdS ? Ag) 薄層層析的吸附劑和薄層 ? 反相鍵合固定相的硅膠： 薄層層析的吸附劑和薄層 ? 鋪層方法：干法鋪層（氧化鋁干板）；濕法鋪層 ? 預制薄層板，燒結板（因玻璃粉混合燒結，可經洗滌后重復使用），厚薄層板 各種特制薄層 ? 混合薄層：由兩種不同的吸附劑混合而成。點樣斑點在 2~3mm左右為佳，如試樣較稀，可等溶劑揮發(fā)后再在同一點多次點樣 ? 展開可使用上升法（展開較慢）、下降法（適用于小比移值試樣）、徑向法、雙向法（如氨基酸分離） 紙層析的顯色 ? 有色物質可直接觀察 ? 無色物質可用各種物理或化學方法顯色：紫外照射、利用顯色劑（酸堿指示劑、茚三酮）、還原劑（ SnCl2還原貴金屬離子金鉑鈀銠等） 薄層層析法 ? 薄層層析是在紙層析和柱層析的基礎上發(fā)展起來的一種色層法。纖維素上有許多羥基，吸附水后成為固定相。 常用的吸附劑及其選擇 ? 聚酰胺： 常用的吸附劑及其選擇 ? 聚酰胺：一般說來，能形成氫鍵基團較多的溶質，其吸附能力較大；對位、間位取代基團都能形成氫鍵時，吸附能增大，鄰位的使吸附能力減??；芳香核具有較多共軛雙鍵時，吸附能力增大；能形成分子內氫鍵者，吸附能力減小。氧化鋁具有 吸附能力強 、 分離能力強 的優(yōu)點。 色層法的發(fā)現(xiàn) ? 俄國植物學家茨維特（ Tswett） 1906年提出色譜（ Chromatography）的概念， Tswett讓植物色素的石油醚萃取液流經裝有碳酸鈣的管柱，并繼續(xù)以純凈的石油醚加以洗脫，得到三種顏色的 5個色帶。氧化鋁因生產時條件的不同可分為 中性 、 酸性 和 堿性 三