【正文】 測(cè)定 ?體內(nèi)藥物分析 芳胺 含量 （一）亞硝酸鈉滴定法 芳伯氨基 水解后芳伯氨基 苯佐卡因 醋氨苯砜 鹽酸普魯卡因 及注射液 及片劑 鹽酸普魯卡因胺 及其片劑與注射液 (2021) 酸性條件 芳胺含量亞 基本 原理 Ar— NHCOR + H2O ? Ar—NH2 + RCOOH Ar—NH2 + NaNO2 + 2HCl Ar—N2+Cl + NaCl + 2H2O H＋ 水解后芳伯氨基 重氮鹽 芳伯氨基 定量 反應(yīng) 水解后芳伯氨基 含量 亞硝酸 2. 測(cè)定的主要條件 ?? ?（ 1） 加入適量溴化鉀加快反應(yīng)速度 ?? ?（ 2） 加過(guò)量鹽酸加速反應(yīng) ?（ 3） 滴定的溫度 ?（ 4） 滴定管尖端插入液面下滴定 含量 亞硝酸 (1)加入適量溴化鉀加快反應(yīng)速度 重氮化反應(yīng)歷程 ： NaNO2 + HCl ?? HNO2 + NaCl HNO2 + HCl ?? NOCl + H2O Ar—N H2 慢 Ar— N H — N O 快 Ar— N= N — OH 快 Ar—N2+CL 堿性越弱，反應(yīng)速度快 （為什么？） 反應(yīng)快慢的 內(nèi)因 堿性弱，與鹽酸成鹽少，游離堿的濃度高，反應(yīng)速度快 NO +Cl _含量 亞硝酸 適量溴化鉀加快反應(yīng)速度 KBr HCl HNO2 + HBr ?? NOBr + H2O （ 1） HNO2 + HCl ?? NOCl + H2O （ 2） 平衡常數(shù) K1 ? 300 K2 （溴化鉀可以加快反 應(yīng)速度的 外因 ） K2 K1 含量 亞硝酸 (2)加過(guò)量鹽酸加速反應(yīng) （外因） ?（ 1）重氮化反應(yīng)速度加快 ?（ 2）重氮鹽在酸性溶液中穩(wěn)定 ?（ 3）防止生成偶氮氨基化合物 ArN2+Cl? + H2NAr ? ArN=NNHAr + HCl 若酸度過(guò)大 阻礙芳伯氨基的游離 反應(yīng)速度 ? HNO2 分解 芳胺類(lèi)藥物與鹽酸的 mol比： 1? ? 6 含量 亞硝酸 （ 3）滴定的溫度 －－室溫（ 10 ℃ ~30 ℃ ） ? 溫度 ? （ 10 ℃ ） 重氮化反應(yīng)速度 ?（ ） ? 溫度 ? ? 亞硝酸、 重氮鹽分解 (2倍 ) 分解 Ar— N2+Cl +H2O ?? Ar— OH +N2?+HCl ∴ 測(cè)定一般在低溫下進(jìn)行 . 太慢 室溫 含量 亞硝酸 (4)滴定管尖端插入液面下滴定 重氮化反應(yīng) ?分子反應(yīng)、慢 避免 亞硝酸揮發(fā)和分解 滴定管尖端插入液面下約 2/3處 一次將大部分亞硝酸滴定液在攪拌下迅速加入 將滴定管尖端提出液面 ，少量水淋洗尖端，再緩緩滴定 近終點(diǎn)，在最后一滴加入后攪拌 1?5分鐘，確定終點(diǎn)是否真正到達(dá) 含量 亞硝酸 ?永停滴定法 (中國(guó) (終點(diǎn)時(shí)過(guò)量亞硝酸在電極上發(fā)生氧化還原反應(yīng) ) ?電位法 (美國(guó) ) ?外指示劑法 (中國(guó) ) 碘化鉀 淀粉糊劑或試紙 缺點(diǎn) : 操作煩瑣 ,終點(diǎn)不易掌握 ?內(nèi)指示劑法 缺點(diǎn) :滴定過(guò)程中指示劑可能被亞硝酸氧化破壞 , 有的重氮鹽有色 , 觀察終 點(diǎn)顏色變化比較困難 ?? 未能普遍推廣應(yīng)用 2021 版 的方法為永停滴定法 芳胺含量 亞硝酸鈉 指示終點(diǎn) 永停滴定法 供試品 ?? 攪拌溶解 ?? 雙珀電極 ?? ?? 室溫，液面下滴定 永停滴定 ：可逆電對(duì)滴定不可逆電對(duì) （亞硝酸鈉） （供試品） 電流從無(wú) ?? 有，滴定終點(diǎn) ③ ② KBr 2g 亞硝酸鈉液滴定 ① 過(guò)量 HCl ④ 芳胺 含量 (二 )非水滴定法 ?鹽酸丁卡因 鹽酸利多卡因 ?HCl ?HCl 叔胺氮 ? 弱堿性 鹽酸布比卡因 C O O C H 2 C H 2 N ( C 2 H 5 ) 2C H 3 ( C H 2 ) 3 N HN H C O C H 2 N ( C 2 H 5 ) 2C H 3C H 3芳胺 含量 非水滴定堿量法：溶劑？滴定劑？指示劑？為什么加 Hg(Ac)2? 終點(diǎn)顏色 ? 冰醋酸，高氯酸，結(jié)晶紫，氫鹵酸的干擾 綠色 綠色 蘭色 終點(diǎn)顏色 消除氫鹵酸的干擾 √ √ √ Hg(Ac)2 萘酚苯甲醇 結(jié)晶紫 結(jié)晶紫 指示劑 高氯酸 高氯酸 高氯酸 滴定劑 冰醋酸 冰醋酸 冰醋酸 醋酸酐 溶劑 備注 鹽酸布比卡因 鹽酸利多卡因 鹽酸丁卡因 芳胺 含量 (三 )紫外分光光度法 ?原理： A = CL ?對(duì)乙酰氨基酚 : 溶劑 最大吸收波長(zhǎng) 測(cè)定方法 %NaOH溶液 257nm 中國(guó)藥典 :吸收系數(shù)法 甲醇 水混合溶劑 244nm USP: 對(duì)照品比較法 應(yīng)用 : 原料、片劑、注射液、栓劑、膠囊劑 E 1cm1%E1cm1%酰胺 含量 吸收系數(shù)法 ?需已知 ,最好用 對(duì)照品比較法 ?需選用 不同型號(hào) 不少于五臺(tái) 紫外分光光度計(jì)進(jìn)行測(cè)試 按藥典規(guī)定方法進(jìn)行 校正 （ 波長(zhǎng)、吸收度、雜散光 、吸收池 配對(duì)性、狹縫 對(duì) A影響） 另：對(duì)測(cè)定中所用的 天平、容量瓶、移液管 等也需 校正 。 紅外吸收光譜 苯乙胺 鑒別 二、鑒別試驗(yàn) ?（一）與三氯化鐵反應(yīng) ?（二）與甲醛 硫酸反應(yīng) 酚羥基 性質(zhì) ?（三）氧化反應(yīng) ?（四）紫外特征吸收與紅外特征吸收光譜 （ 苯環(huán) ） ?（五）與亞硝基鐵氰化鈉的反應(yīng) 脂肪伯氨基 性質(zhì) ?（六）雙縮脲反應(yīng) 苯環(huán)側(cè)鏈具有 氨基醇 結(jié)構(gòu) 苯乙胺 鑒別 分子結(jié)構(gòu)中有酚羥基的藥物，如腎上腺素 （一）與三氯化鐵反應(yīng) 有酚羥基的藥物 Fe3+ 有色絡(luò)合物 加入堿性溶液 被高鐵離子氧化 紫色或紫紅色 具體藥物 顯色 詳見(jiàn) P176表 72 （二）與甲醛 硫酸反應(yīng) 硫酸 與甲醛形成具有醌式結(jié)構(gòu)的 有色 化合物 表 7－ 2 苯乙胺類(lèi)藥物與三氯化鐵和甲醛 硫酸反應(yīng)顯色 酰胺 苯乙胺 墨綠色 ，滴加 1％氨試液，顯紫紅色 鹽酸多巴胺 棕色 → 暗紫色 深綠色 ，滴加新制 5％碳酸氫鈉液，顯 藍(lán)紫色 → 紅色 鹽酸異丙腎上腺素 玫瑰紅 → 橙紅 → 深棕紅 紫色 鹽酸去氧腎上腺素 淡紅色 翠綠色 ，加碳酸氫鈉試液顯 藍(lán)色 → 紅色 重酒石酸去甲腎上腺素 紅色 綠色 ，加氨試液顯 紫色 → 紫紅色 腎上腺素 甲醛