【正文】 　2. 容量瓶50ml（1）。= －式中C：蛋白質(zhì)質(zhì)量濃度（mg/ml）；A280nm：蛋白質(zhì)溶液在280nm處測得的吸光度；A260nm：蛋白質(zhì)溶液在260nm處測得的吸光本法對微量蛋白質(zhì)的測定既快又方便，它還適用于硫酸銨或其他鹽類混雜的情況，這時用其他方法測定往往較困難。在280nm處測定各管溶液的吸光度值。但如控制在低濃度范圍內(nèi)，則不影響測定，Lowry法很靈敏，可以對5～100μg蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行很好的顯色反應(yīng)，而如此低的蛋白質(zhì)濃度常常已把干擾物質(zhì)的濃度稀釋到一個不起作用的水平。試劑放置過久，變成綠色時，可再加溴數(shù)滴煮15分鐘，如能恢復(fù)原有的金黃色仍可使用。烯醇化反應(yīng)1．雙縮脲法測定蛋白質(zhì)的原理是什么?其它還有什么方法測定蛋白質(zhì)的含量?2．請用雙縮脲法，設(shè)計一個測定蛋白質(zhì)含量的定量方法(除標(biāo)準(zhǔn)曲線法外)。5H20(.)(.)，／L2．了解染料法、雙縮脲法、Lowry法和紫外吸收法測定原理。本法的缺點是：對于那些與標(biāo)準(zhǔn)蛋白氨基酸組成有較大差異的蛋白質(zhì)，有一定誤差，因為不同的蛋白質(zhì)與染料的結(jié)合是不同的，故該法適合測定與標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)氨基酸組成相近的蛋白質(zhì)。2．標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)溶液： 用標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)晶牛血清清蛋白（BSA）或標(biāo)準(zhǔn)酪蛋白，配制成10g/L的標(biāo)準(zhǔn)蛋白溶液，可用BSA濃度1g/。以測定管的吸光度，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上求得蛋白質(zhì)濃度。反應(yīng)式一?5H2O以測定管吸光度值，查標(biāo)準(zhǔn)曲線求得血清蛋白質(zhì)含量。四、紫外吸收法[實驗原理]此法的特點是測定蛋白質(zhì)含量的準(zhǔn)確度較差，干擾物質(zhì)多，在用標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定蛋白質(zhì)含量時，對那些與標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)中酪氨酸和色氨酸含量差異大的蛋白質(zhì)，有一定的誤差。測定液必須澄清，以免造成結(jié)果誤差。加畢，用紫外分光光度計測A280nm，以吸光度為縱坐標(biāo)，蛋白質(zhì)濃度為橫坐標(biāo)作圖。2. 未知濃度蛋白質(zhì)溶液：用酪蛋白配制，～。如同時測定260nm的光吸收，通過計算可以消除其對蛋白質(zhì)測定的影響。[試劑器材]1．蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)液（1mg/ml）： 準(zhǔn)確稱量經(jīng)微量凱氏定氮法校正的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)配制。此外，蛋白質(zhì)溶液在238nm的光吸收值與肽鍵含量成正比。（3）營養(yǎng)不良或長期消耗性疾病，如嚴(yán)重結(jié)核或長期消耗性疾病。3．樣品：，置于50ml容量瓶中，%NaCl溶液稀釋至刻度處，混勻，為待測血清樣品。3．本法各種蛋白質(zhì)的顯色程度基本相同，重復(fù)性好，幾乎不受溫度影響，唯一缺點是靈敏度較低。1．試管：15150mm干擾這一測定的物質(zhì)主要有：硫酸銨、Tris緩沖液和某些氨基酸等。實驗七[操作步驟]1．測定范圍為1～10mg蛋白質(zhì)。[器材]2．雙縮脲試劑要封閉貯存，防止吸收空氣中的二氧化碳。mg/ml）：精確稱取結(jié)晶牛血清清蛋白25mg，%NaCl溶液中，以容量瓶定容至100ml。（2）蛋白質(zhì)丟失，如嚴(yán)重灼傷時，大量血漿滲出；腎病綜合癥時，尿液中長期丟失蛋白質(zhì)等。吸收高峰在280nm處，其吸光度（即光密度值