葡聚糖凝膠測蛋白質分子量(專業(yè)版)
【正文】 ,第九頁，共十頁。nqu225。因此不同型號的凝膠介質，有它一定的使用范圍。 d224。ng)蛋白質的相對分子量,第一頁，共十頁。內水容積Vi是凝膠孔隙所占的體積，即凝膠顆粒內部所含水相的體積，它可從干凝膠顆粒重量和吸水后的重量求得。,第六頁，共十頁。待沉集的膠面上升到離柱的頂端約5cm處時停止裝柱，關閉出水口，再以洗脫液平衡柱層，直至層析的膠床高不變。假設用分子量的標準蛋白質在一定型號葡聚糖凝膠柱上層析，精確測其洗脫(xǐ tuō)體積，并以洗脫(xǐ tuō)體積Ve對分子量的對數(shù)logMW作圖，可獲得一條標準曲線。L1氯化鉀溶液以每管3ml/10min流速洗脫，用自動局部收集器收集流出液。 二、裝柱 層析柱必須粗細均勻，通常柱愈長，別離效果愈好，但柱過長，反而(fǎn 233。中等分子〔分子大小在上述兩種極限之間〕所需洗脫液體積介于兩者之間，Ve＝V0＋KdVi〔0Kd1〕， Kd為分配系數(shù)，它表示一種物質在孔隙內的滲透程度，相當于這種物質在孔隙內所占體積和孔隙總體積的比值。ng zh224。例如，G25為每克凝膠膨脹(p233。 當樣品流經(jīng)凝膠柱時，大于孔隙的大分子完全不滲入到凝膠內部，只需V0體積的洗脫液便可將其由一端洗脫到另一端；相反，如果樣品體積小于孔
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