【正文】 就 SARS 病毒疫苗的研究，已完成了疫苗候選基因的可行性論 證， S 蛋白中和抗原位點(diǎn)的確認(rèn)和 運(yùn)用生物信息學(xué)技術(shù)對(duì) SARS 病毒表面蛋白（ S 和 M蛋白）的免疫原性的強(qiáng)弱分析，人工合成了三種強(qiáng)免疫原性的多肽疫苗。 SARS 病毒的基因序列及其基因的編碼序列的初步闡明，為本研究打下了良好的基礎(chǔ)和增強(qiáng)了本研究的可行性。 項(xiàng)目負(fù)責(zé)人：歐陽(yáng)文 聯(lián)系電話(huà)： 07318618151 13974934441 SARS 病毒多肽、基因及基因重 組疫苗的研究 一、項(xiàng)目概況 （一）國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀與發(fā)展趨勢(shì) 自 20xx 年 11 月 16 日在廣東發(fā)現(xiàn)第一例傳染性非典型肺炎患者以來(lái)，疫情已在全國(guó)乃至全世界范圍內(nèi)擴(kuò)散。 用 SYBR 實(shí)時(shí) PCR 檢測(cè)非典，敏感性和特異性與熒光定量 PCR 相似，但 試劑成本只有熒光定量 PCR 的 25%。三是檢查病毒核酸，是本病早期診斷研究的方向。 該芯片將覆蓋 SARS 冠狀病毒的全部基因組序列，并且有約 35%的重復(fù)覆蓋率，因此預(yù)計(jì)可以更靈敏、更全面地檢測(cè) SARS 病毒。 三、現(xiàn)有工作進(jìn)展 1. 已經(jīng)在實(shí)驗(yàn)室水平從血漿中純化出電泳級(jí)純的 IgA 產(chǎn)品 克，按每升血漿5 克的 IgA 計(jì)算，得率為 65%，可用于制備 30 支藥品成品。中藥盡管在防治SARS 中起到積極作用，但由于其成分復(fù)雜，特異性有待證實(shí)；現(xiàn)批準(zhǔn)進(jìn)入臨床研究的 IFNα2b、 IFNω 氣霧劑是一類(lèi)細(xì)胞因子，通過(guò)激活局部的粘膜免疫功能，達(dá)到間接的防治作用，而且，由于其半衰期較短，能否進(jìn)入粘 膜有效活化免疫細(xì) 胞尚難預(yù)料。 通過(guò) 研究銀和稀土在二氧化鈦晶格缺陷中的分布狀態(tài)、抗菌劑的結(jié)構(gòu)、粒度及粒度分布等特征及其與抗菌劑殺菌性能之間的關(guān)系，提高二氧化鈦的激發(fā)光催化波長(zhǎng)、改善二氧化鈦及銀的殺菌效果、解決抗菌劑銀的的發(fā)黑現(xiàn)象。國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)有 ISO846，日本標(biāo)準(zhǔn)有 JISZ29111992，美國(guó)標(biāo)準(zhǔn)有 ASTMG211990 等；但我國(guó)仍然沒(méi)有制訂國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。 國(guó)外研究表明， 5甲基 1苯基 2（ 1H）吡啶酮（ I， R＝ H）具有預(yù)防和治療肺纖維化的作用，其抗纖維化活性已在活體實(shí)驗(yàn)中得到證實(shí)；它能抑制 TGFβ , PDGF, bFGF 等多種細(xì)胞因子的表達(dá)，并能顯著抑制膠原的合成以及纖維基質(zhì)的聚集，阻止生物組織的纖維化。同時(shí)制備單克隆抗體（ 9 月完成）。 2． 所研制的 SARS 快速診斷試紙操作簡(jiǎn)便 、 反應(yīng)特異而快速 ， 不受醫(yī)療條件、設(shè)備的限制，為車(chē)站、碼頭、機(jī)場(chǎng)、邊境、條件差的醫(yī)院等病人的診斷提供了行之有效的手段。 更多內(nèi)容歡迎蒞臨： 中南大學(xué)非典型肺炎防治 招商項(xiàng)目簡(jiǎn)介 中 南 大 學(xué) 二〇〇三年五月 目 錄 1． SARS 快速診斷試紙的研制…………………………（ 1） 2． SARS 流行的環(huán)境因素分析及預(yù)警系統(tǒng)研究 ………（） 3．抗纖維化化合物 py02d 的開(kāi)發(fā) ………………（） 4．預(yù) 防 SARS 的二氧化鈦載銀改性納米抗菌材料開(kāi)發(fā) ………………（） 5．防治 SARS 的 IgA 氣霧劑的制備 ……………………（） 6． SARS 冠狀病毒全基因 組 檢測(cè) 芯片 ……………………（） 7． SYBR實(shí)時(shí) PCR早期診斷傳染性非典型肺炎的研究 ……（） 8. 病毒過(guò)濾面罩應(yīng)用于 SARS防治的研究 ………………（） 9. SARS 病毒多肽、基因及基因重組疫苗的研究 ………（） SARS 快速診斷試紙的研制 一、 研究項(xiàng)目簡(jiǎn)介 研究現(xiàn)狀分析： 1． SARS 已席卷 32 個(gè)國(guó)家和地區(qū)，其中我國(guó)也已廣泛受累，為受累最嚴(yán)重的國(guó)家。 ，所研制的 SARS 快速診斷試紙將有廣闊的國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)。 4） 將制備的多克隆抗體或單克隆抗體用膠體金標(biāo)記（于 7 月份完成），并進(jìn)行質(zhì)控。這一化合物的臨床試驗(yàn)也已經(jīng)通過(guò)美國(guó) FDA 批準(zhǔn)，進(jìn)入 III 期臨床階段，用于抗腎和肺纖維化疾病的治療。抗菌材料的開(kāi)發(fā)與應(yīng)用 80 年代起始于日本、歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家。 以病毒（如SARS）等為研究對(duì)象，采用微生物的培養(yǎng)方法考察抗菌劑 對(duì) SARS 等病毒接觸性的殺菌效果，建立抗菌效果的數(shù)據(jù)庫(kù)及相應(yīng)抗菌性能 的 評(píng)價(jià)體系，并建立一套國(guó)家評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。疫苗的研制，由于測(cè)序結(jié)果一完成就發(fā)現(xiàn)了多種變異 SARS 病毒，若為變異速度快的病毒，制造疫苗的困難將會(huì)更大。 2. 中南大學(xué)湘雅藥學(xué)院已經(jīng)進(jìn)行了氣霧劑配方的研制。更為重要的是，在檢測(cè) SARS病毒的同時(shí)可給出 SARS 病毒基因組的更詳細(xì)的信息，這對(duì)于監(jiān)測(cè)和比較各地SARS 冠狀病毒不同分離株之間的變異以及病毒在傳播過(guò)程中可能發(fā)生的自然變異具有重要意義。目前 Genbank 上已報(bào)告 12 株 SARS病毒的全序列或部分序列，為檢查 SARS 病毒核酸典定了基礎(chǔ)。與常規(guī) PCR 相比，不僅敏感性和特異性顯著提高，而且檢測(cè)速度更快，但試劑成本相同。面對(duì)新出現(xiàn)的傳染病，有很多未知問(wèn)題需要研究解決。 （二） 主要研究?jī)?nèi)容 ⑴ 根據(jù)已公布的 SARS 病毒 S 蛋白基因合成并擴(kuò)增 S 蛋白中和 抗原位點(diǎn)的基因片段，和嘗試構(gòu)建 S 蛋白的全基因。并進(jìn)行了動(dòng)物接種 研究。 有基因克隆、表達(dá)、疫苗研究的相關(guān)基礎(chǔ)。本攻關(guān)小組將進(jìn)行 SARS 病毒基因重組和多肽疫苗的研究。 四、 研發(fā) 費(fèi)用： 面罩密封性及排水性能改造 3 萬(wàn)元 病毒過(guò)濾器雙向過(guò)濾改造 2 萬(wàn)元 產(chǎn)品效果及舒適性能鑒定 4 萬(wàn)元 市場(chǎng)調(diào)查 萬(wàn)元 合 計(jì) 萬(wàn)元 五、 生產(chǎn)投資估算：核心技術(shù)病毒過(guò)濾器僅在組裝的基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn)的提前下，生產(chǎn)投資估算約為 150 萬(wàn)（不包括廠房）。 五、經(jīng)費(fèi)預(yù)算： 萬(wàn)元 試劑費(fèi)： 萬(wàn)元（每人檢查 5 種標(biāo)本，每種標(biāo)本用 10 種引物檢查，預(yù)計(jì)檢 查 14000 次，每次試劑成本按 10 元計(jì)） 出差費(fèi)： 萬(wàn)元（收集病人標(biāo)本之所需） 勞務(wù)費(fèi)： 萬(wàn)元 管理費(fèi)： 萬(wàn)元 六、完成時(shí)間： 1 年 七、效益分析 從理論上來(lái)說(shuō)，感染者只要有病毒排出，本法就可檢出，真正實(shí)現(xiàn)早期診斷，不近有利于患者的早期治療，降低病死率，更重要的是早期發(fā)現(xiàn)感染者，實(shí)行早期隔離，防治疫情的擴(kuò)散，為控制本病的流行提供強(qiáng)大的技術(shù)支持，因此，本項(xiàng)目具有重大的社會(huì)效益。二是檢查病毒抗原，這種方法的敏感性不高。并設(shè)計(jì) 一整套 SARS冠狀病毒全基因組 芯片數(shù)據(jù)分析軟件。知識(shí)結(jié)構(gòu)合理，為完成本項(xiàng)目提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支持。 SARS 的病原體目前已經(jīng)被確認(rèn)為是一種變異的冠狀病毒，且已完成基因組序列測(cè)定，但目前尚無(wú)確切有效的抗 SARS 病毒的藥物問(wèn)世。最后通過(guò)優(yōu)化偏鈦酸低溫煅燒工藝，獲得 二氧化鈦載銀改性納米粉體抗菌劑。對(duì)于抗菌性能的測(cè)試和評(píng)價(jià)，目前國(guó)內(nèi)外尚無(wú)統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。因此找到一種新型的有效抗肺纖維化藥物，無(wú) 疑可以取代激素成為一線(xiàn)抗非典型肺炎藥物。 3） 本周（ 5 月 10 日）免疫動(dòng)物（荷蘭兔和 BALB/c 小鼠已經(jīng)備好）， 7 月中旬前收獲 多克隆抗體?？蓹z測(cè)受 試者的咽拭子、痰液、嗽口液、血液和糞便。全球累計(jì)病人 6903 例，死亡 495 例，感染人數(shù)和死亡人數(shù)呈急劇上升趨勢(shì) ， 受累人數(shù)仍在迅速增加，而且呈蔓延之勢(shì)。也將在控制 SARS 疫情中起舉足輕重的作用。 5） 將相應(yīng)的抗體固相化于硝酸纖維膜上（ 5 月 20 日前完成）。 根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道以及前期研究顯示，以 N取代苯基 5甲基 2（ 1H）吡啶酮類(lèi)化合物（ I）具有較強(qiáng)的抗肺纖維化的 活性。如 果以日本使用的抗菌劑為 100 計(jì)，歐美為 1，中國(guó)僅 。 通過(guò)研究 抗菌劑、基體材料的微觀結(jié)構(gòu)及其相容性之間的關(guān)系，優(yōu)選相應(yīng)的基體 材料，制備出以纖維為基體的抗菌材料；并通過(guò)臨床實(shí)驗(yàn)開(kāi)發(fā) 1~2 套防治SARS 等病毒的醫(yī)用制品。且新制備的疫苗其安全性難以保證，近期內(nèi)生產(chǎn)出疫苗用于人體預(yù)防就更難了。 3. 湖南投資集團(tuán)公司組成了專(zhuān) 門(mén)的攻關(guān)小組，已委派專(zhuān)人和藥廠接洽，洽談生產(chǎn)合作事宜。 本項(xiàng)目產(chǎn)品預(yù)計(jì)可以廣泛應(yīng)用于 SARS 患者的早期診斷、疑似病人篩查、動(dòng)物檢疫、環(huán)境監(jiān)測(cè)等，具有良好的開(kāi)發(fā)應(yīng)用前景。檢查病毒核酸又有