【正文】 含穿心蓮中藥制劑的分析 結(jié)構(gòu)中含有 α 、 β 不飽和內(nèi)酯，其紫外吸收光譜為λmax223nm ，可利用此結(jié)構(gòu)特性進(jìn)行鑒別和含量測定 。 紫外光譜特征u化合物的結(jié)構(gòu)中羰基和芳環(huán)形成較強(qiáng)的共軛體系，因此在紫外光區(qū)具有很強(qiáng)的特征吸收，紫外吸收光譜一般在 300nm左右（ lgε 為 4左右）有最大吸收，吸收峰的位置與取代基有很大關(guān)系。u高效液相色譜法 芳香族酸類和其他具有紫外吸收的酸類，可用高效液相色譜法進(jìn)行含量測定，如綠原酸、沒食子酸、桂皮酸、丹參素、阿魏酸等。u采用含有無機(jī)鹽水溶液，如 水溶液制備硅膠薄層板，使硅膠薄層吸附能力降低，斑點(diǎn)集中，對分離有所改善，樣品承載量顯著提高。 三萜皂苷類單體成分含量測定（ 1）薄層色譜法u樣品經(jīng)適當(dāng)?shù)奶崛?、純化后，用薄層色譜法分離，可排除其他組分的干擾，常用于測定中藥制劑中的皂苷元或單體皂苷，定量方法可采用薄層洗脫 — 比色法或薄層掃描法。u三萜皂苷元能溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿等有機(jī)溶劑，而不溶于水。u 直接測定 : 黃酮類化合物具有特定的紫外吸收峰 ,含黃酮類化合物的原料藥及部分制劑經(jīng)一定的提取純化后 ,可直接于最大吸收波長處測定其吸收度 ,以蘆丁等為對照品計算其含量 .u 顯色測定 : 黃酮類化合物顯色以后顯色物與背景最大吸收波長差別較大 ,可消除背景 (即陰性空白 )的干擾 ,以提高本法的選擇性及靈敏度 .常用鋁鹽作顯色試劑 .五、黃酮類單體成分的含量測定薄層色譜法 樣品經(jīng)有機(jī)溶劑或水提取后，可用硅膠、纖維素或聚酰胺進(jìn)行層析，達(dá)到分離目的。 （ 3）酸堿性 酸性： 黃酮類化合物因分子中多有酚羥基，故顯酸性，可溶于堿性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺中。在含蒽醌類化合物的中藥制劑分析中應(yīng)用日趨增多。u堿性條件下的呈色反應(yīng)：羥基蒽醌類在堿性溶液中會引起顏色改變并加深。本品按干燥品計算，每 1g含生物堿以鹽酸小糪堿 (C20H18ClNO4)計，不得少于 30mg。 ③ 氣相色譜法中藥中生物堿分析 （ 1）總堿分析① 定性鑒別 由于中藥制劑中成分復(fù)雜，有些成分如蛋白質(zhì)、多肽和鞣質(zhì)等也可與試劑生成沉淀而造成假陽性結(jié)果，因此，制備樣品供試液時必須凈化處理，除去干擾成分，方能用沉淀反應(yīng)進(jìn)行中藥制劑中生物堿類成分的鑒別 . ② 總生物堿的含量測定 化學(xué)分析法 化學(xué)分析法包括重量分析法和容量分析法。u季銨型生物堿、有氮氧配位鍵的生物堿易溶于水，u液體生物堿及一些小分子固體生物堿則既溶于水也可溶于有機(jī)溶劑。u 生物堿結(jié)構(gòu)中如有手性碳原子或為手性分子的具有旋光性，并大多與生物堿的生理活性有關(guān)，通常左旋體比右旋體生理活性強(qiáng)。（ 2） 單體生物堿的含量測定 ① 薄層色譜法 此法簡便、快捷。取本品粉末（過三號篩） ，精密稱定，置索氏提取器中，加鹽酸 甲醇（ 1： 100）適量，加熱回流至提取液無色，提取液濃縮后移至 25ml量瓶中，加乙醇稀釋至刻度，搖勻。 （ 2）酸堿性u 蒽醌類化合物分子中多具有酚羥基，故具有一定酸性，在堿性水溶液中易溶，但加酸酸化時又可重新沉淀析出，所謂堿提取 — 酸沉淀即是根據(jù)這個道理進(jìn)行的。 蒽醌類單體成分的測定u中藥制劑中蒽醌類單體成分的測定一般要將樣品水解后再進(jìn)行測定，測定方法主要有薄層掃描法和高效液相色譜法。（ 2）溶解度 u 黃酮類化合物的溶解度因結(jié)構(gòu)及存在狀態(tài)（苷或苷元，單糖苷、雙糖苷或三糖苷）不同而有很大差異。 三、定性鑒別顯色反應(yīng) 黃酮類化合物的顏色反應(yīng)多與分子中的酚羥基及 γ 吡喃酮環(huán)有關(guān)。? 游離三萜類化合物通常多不溶于水，而與糖結(jié)合成苷后，則大多可溶于水，振搖后可生成膠體溶液，并有持久性似肥皂溶液的泡沫，故有三萜皂苷之稱。u用比色法測定中藥制劑中總皂苷或總苷元的含量時，可選用單體皂苷或皂苷元作對照品，但要注意測定單體皂苷或皂苷元與總皂苷的換算系數(shù)。 第六節(jié)、多糖、有機(jī)酸類成分分析一、多糖的鑒別與含量測定多糖的鑒別（ 1） 薄層色譜法? 多糖可采用酸水解法將其水解成較小片段，然后進(jìn)行薄層色譜鑒別。 具有熒光的物質(zhì)如綠原酸、阿魏酸等，可不必顯色，在熒光燈下觀察熒光。（ 2）與酚羥基反應(yīng) 具有酚羥基取代的香豆素類在水溶液中可與 FeCl3試劑產(chǎn)生顏色。 六、單萜及二萜類成分分析 含芍藥苷中藥制劑的分析（ 1）定性鑒別u可用硅膠 GF254薄層板分離后于紫外光燈（ 254nm）下直接觀察，但斑點(diǎn)色澤較淺，也可用顯色劑顯色后進(jìn)行鑒別。 u 穿心蓮總內(nèi)酯的測定 可根據(jù)內(nèi)酯結(jié)構(gòu)在 pH=8以上水解開環(huán)的性質(zhì)，用氫氧化鈉水解，以酸回滴剩余堿間接測定總內(nèi)酯含量；u 穿心蓮單體內(nèi)酯的測定 薄層分離后用紫外分光光度法、薄層掃描、高效液相色譜法測定應(yīng)用示例桂枝茯苓丸中肉桂酸的含量測定處方組成：桂枝、茯苓、牡丹皮、赤芍、桃仁色譜條件和系統(tǒng)適用性試驗：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈 %磷酸溶液（ 30： 70）為流動相；檢測波長為 285nm。u香豆素的熒光性質(zhì)在薄層色譜中可用于定性鑒別和定量分析。 溶解性：大多易溶于水、甲醇，可溶于乙醇、丙酮、正丁醇。? 再將其酸水解后進(jìn)行高效液相色譜法測定，確定其組成（單糖的種類及比例），以單糖的量推算多糖的量。u蒸發(fā)光散射檢測器（ ELSD）用于高效液相色譜法檢測三萜皂苷類成分的應(yīng)用日漸廣泛。薄層色譜法u由于皂苷類成分大多無明顯的紫外吸收，故經(jīng)薄層色譜分離，然后選用適當(dāng)?shù)娘@色劑顯色觀察，是皂苷定性鑒別中最常用的方法。 高效液相色譜法 由于黃酮類化合物在紫外區(qū)有較強(qiáng)的吸收，使用HPLC法檢測靈敏度較高，故該法在黃酮類單體成分的定量分析中最常用。 （ 4）顯色反應(yīng)u 還原反應(yīng)：與鹽酸 — 鎂粉（或鋅粉）反應(yīng)，u 金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)：黃酮類化合物分子中多有下列結(jié)構(gòu)，故常可與鋁鹽、鉛鹽、鋯鹽、鎂鹽等試劑反應(yīng)，生成有色絡(luò)合物。? 黃酮類化合物最集中的是被子植物，類型最全，結(jié)構(gòu)最復(fù)雜，含量也高。u與對亞硝基二甲基苯胺反應(yīng)： 9位或 10位未取代的羥基蒽酮類化合物，尤其是 1， 8二羥基衍生物，酮基對位的亞甲基上的氫很活潑，可與對亞硝基二甲基苯胺反應(yīng)，縮合產(chǎn)生各種顏色。 這些化合物在中藥中可游離存在，也可與糖結(jié)合成苷，稱為蒽苷。? 分光光度法 目前多用單波長光度法，測定波長可選用待測生