【正文】 fringilla下午 20:43:42三月 21MOMODA20231意志堅(jiān)強(qiáng)的人能把世界放在手中像泥塊一樣任意揉捏。下午 20:43:42三月 21楊柳散和風(fēng)，青山澹吾慮。 11下午 20:43:42三月 21沒(méi)有失敗，只有暫時(shí)停止成功！。 11 合適的克隆位點(diǎn) 單克隆位點(diǎn)和多克隆位點(diǎn)靜夜四無(wú)鄰，荒居舊業(yè)貧。 （ 3）、多克隆位點(diǎn)區(qū)（ MCS） 由人工合成的多個(gè)單一酶切位點(diǎn)構(gòu)成。TcS)a.Ⅲ 型 :Ⅰ 型 ：轉(zhuǎn)錄起始區(qū)（調(diào)控序列 +啟動(dòng)子） +酶切反應(yīng)時(shí)仍未被作用的 pBR322或 pUC18分子 b. 酶切后的載體分子經(jīng)自我連接又形成載體分子普通型載體 pBR322的結(jié)構(gòu)圖pUC18和 pUC19載體（ 2）、表達(dá)型載體（ expression 病毒型載體 — 環(huán)狀、線狀、 ss和 dsDNA分子，形成病毒顆粒 （ 3） .混合型載體 — 具質(zhì)粒和病毒特性，特性的轉(zhuǎn)換依賴(lài)于宿主細(xì)胞生物學(xué)特性 根據(jù)載體功能劃分AAs，基因產(chǎn)物裝配為四聚體后才有酶活。Cmlr氨芐青霉素抗性基因 （ 這種指示可以是選擇性的（ Ampr這樣的兩種質(zhì)粒稱(chēng)為不親和質(zhì)粒。AHOPAGCTTTCGAPAOH3’TTCGAA5’5’AOHDNA連接酶5’5’dNTP（三）、 TaqI的兩倍 DNA聚合酶polI的特點(diǎn) 具 3’→5’ 外切酶活性I四、 DNA聚合酶（一）、 DNA聚合酶 I（ polI）2)DNA分子上將形成切口，不同類(lèi)型二價(jià)陽(yáng)離子對(duì)兩條鏈上切口位置形成有以下影響： Mg或 Ca2+539。4a3c1a3OH339。539。斷口 (cut)339。斷口缺口 (gap)反應(yīng)底物：互補(bǔ) dsDNAM． TaqI（ TCGmA） HindII（ GTPyPuAC）：GTCAAC， GTTAAC， GTCGmAC， GTTGAC3.b.２） 2.（五）、 C1.AvaIａ）切點(diǎn)在識(shí)別順序之外的，如： FokI Fok粘性末端能與另一個(gè)相同的粘連末端相連接，任何兩個(gè)具有相同識(shí)別位點(diǎn)的 DNA分子經(jīng)限制酶切割后能夠重新連接成新的重組 DNA分子。T(II)— Streptomycesand中藥基因組 —— 利用現(xiàn)代生物技術(shù)研究分析中藥對(duì)人體（細(xì)胞）基因表達(dá)（蛋白質(zhì)）的影響。5遺傳疾病 1072元 /ug白細(xì)胞介素 2在基因工程技術(shù)對(duì)編碼蛋白質(zhì)的基因的了解基礎(chǔ)上，對(duì)蛋白質(zhì)的氨基酸序列、結(jié)構(gòu)和功能進(jìn)行分析，進(jìn)而通過(guò)對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、氨基酸序列和翻譯后的修飾等手段改變甚至創(chuàng)造出新的和更有效的蛋白質(zhì)。作名詞時(shí)指含有某目的 DNA片段的重組 DNA分子或含有該重組分子的無(wú)性繁殖系 .作動(dòng)詞時(shí)是指基因的分離與重組過(guò)程。基因與載體的重組與導(dǎo)入受體細(xì)胞第六節(jié) 利用 DNA體外重組或 PCR擴(kuò)增技術(shù)從某種生物基因組中分離感興趣的基因，或是用人工合成的方法獲取基因，然后經(jīng)過(guò)一系列切割，加工修飾，連接反應(yīng)形成重組 DNA分子，再將其轉(zhuǎn)入適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞，以期獲得基因表達(dá)的過(guò)程 .基因工程 (gene engineering)常和以下名稱(chēng)混用遺傳工程 (geic從這些篩選出來(lái)的受體細(xì)胞克隆，提取出已經(jīng)得到擴(kuò)增的目的基因，供進(jìn)一步分析研究使用。蛋白質(zhì)功能預(yù)測(cè)和分析生物制藥產(chǎn)業(yè)化特點(diǎn)高技術(shù) ：高層次人才，高新技術(shù)手段，多學(xué)科滲透高投入 ：在國(guó)外，一個(gè)生物藥品平均要投入 1~3億美元，并隨著開(kāi)發(fā)難度的增大 ,有逐步增高的趨勢(shì)長(zhǎng)周期 ：國(guó)際上，一個(gè)新的生物藥品需要 6~8年時(shí)間高風(fēng)險(xiǎn) :種植面積迅猛發(fā)展。中藥化學(xué)組 ：中藥有效成分包括較單一的成分和多種成分核酸連接酶 — 用 于 DNA和 RNA的連接 III型 ： 修飾酶與Ｉ型酶相同， hsdＭ與 hsdＳ基因產(chǎn)物結(jié)合成一亞單位，限制酶是獨(dú)立存在的。　例如： HindⅢ 　　前三個(gè)字母來(lái)自于菌種名稱(chēng)H. influenzae， “ ｄ ” 表示菌系為ｄ型血清型； “Ⅲ” 表示分離到的第三個(gè)限制酶。1.5’ＧＧＡＴＧ (Ｎ )93’T２） ５ ’端突起 ，個(gè)數(shù)為２或４個(gè)核苷酸 2.酶切位點(diǎn)與識(shí)別位點(diǎn)不一致，切點(diǎn)常在識(shí)別位點(diǎn)的一側(cè)， 15.甲基化酶的用途 ２） 外切酶活性特點(diǎn)P339。P539。cHOOH339。 用途polIK)1.DNA末端修飾 缺失主要用于 DNA的體外擴(kuò)增，經(jīng) 25次循環(huán)后才進(jìn)入酶的反應(yīng)穩(wěn)定期，一個(gè) DNA5’特點(diǎn)：平端的連接比粘性末端的連接要困難得多，所需的酶量也多T或 DNA連接酶　　　　　　 DNA連接酶的連接反應(yīng) (兩種插入方向 ) +第三節(jié) 分子克隆的質(zhì)粒載體 一、質(zhì)粒的一般生物學(xué)特性；二、質(zhì)粒 DNA的分離與純化；三、質(zhì)粒載體的構(gòu)建及類(lèi)型；四、常用質(zhì)粒載體舉例；一、質(zhì)粒的一般生物學(xué)特性（一）、質(zhì)粒 DNA 質(zhì)粒 是細(xì)菌染色體外能夠自主復(fù)制的環(huán)形雙鏈的 DNA分子。至少有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)，因而至少可在一種生物體中自主復(fù)制。lacZα），絕大多數(shù)為后者。 Cmr基因編碼氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶，使氯霉素 乙?；?，導(dǎo)致乙酰化的氯霉素不能結(jié)合在核糖體上。和 lacZα）為 α鏈編碼的基因稱(chēng)之為lacZα(編碼 145LacZβ普通型載體上述兩例中的非重組子來(lái)源有兩個(gè)：特點(diǎn) :信號(hào)肽鏈編碼區(qū) 4)BamHI片段 (Tcr)實(shí)驗(yàn)對(duì)象（ 1）供體：遺傳背景與 DNA特點(diǎn)等，其中包括染色體 DNA大小，基因大小與結(jié)構(gòu)，堿基組成，目的基因的產(chǎn)物特點(diǎn)以及遺傳物質(zhì)的傳遞方式等。 20:43:4220:43:4220:433/11/2023 三月 20:43:4220:43:4220:433/11/2023 三月 20:43:4220:43:4220:433/11/2023 三月 amet,felisurna20:43:4220:43:421111,20:43:4220:43:421111,20:43:4220:43:421111,DH5αF’ 可供 M13mp系列載體配套使用， M13病毒的感染需要 F’ 的存在3.b.終止子類(lèi)型 :β— 半乳糖苷酶基因的優(yōu)點(diǎn) :四環(huán)素抗性基因編碼一種 399四環(huán)素抗性基因 （ 當(dāng)充任第一作用時(shí)，最好是選擇性標(biāo)記基因；當(dāng)完成第二作用時(shí)，目前多采用非選擇性的 — 檢測(cè)性標(biāo)記基因。?注：前三個(gè)特點(diǎn)必不可少 。Bolivar（二）、質(zhì)粒的拷貝數(shù)與不親和性 質(zhì)粒的拷貝數(shù) 是指某種質(zhì)粒在一個(gè)細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的數(shù)目。AAGCTT3’TTCGAA5’TCGAPOHA3’3’5’和 PCR 分離自水生棲熱菌，分子量為 94,000，最適反應(yīng)溫度 75℃ ， 聚合酶活性， 5’ →3 ’ ,具 3’→5’ 和 5’ →3 ’ 外切酶活性II切口移位，制備 DNA探針A2P539。HO339。一般特點(diǎn)： ClaI（ ATCGmAT） TaqI（ TCGmA）HpaIGkD 。SacI3’GGGCCC5’PAATTC3’5’GOHEcoRI外側(cè)，產(chǎn)生５ ’端突起Nfor中藥臨床藥效 的科學(xué)評(píng)價(jià)與分析方法生物技術(shù)的應(yīng)用2妊娠預(yù)防 3生長(zhǎng)發(fā)育不良癥 呼吸系統(tǒng)疾病 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物 ：生產(chǎn)有用蛋白質(zhì)和高品質(zhì)的畜產(chǎn)品現(xiàn)代生物技術(shù)還包括動(dòng)物、植物細(xì)胞和工程菌的發(fā)酵培養(yǎng)。蛋白質(zhì)組分析酶工程的概念是酶學(xué)與工程學(xué)的相互滲透和結(jié)合所發(fā)展起來(lái)以酶為研究對(duì)象，改造并應(yīng)用酶的特異催化功能。基因操作 (gene第六章 基因工程原理第一節(jié) cloning)。傳統(tǒng)的發(fā)酵工程主要用于微生物。生物制藥；基