蛋白質(zhì)分子量測(cè)定方法研究進(jìn)展(專業(yè)版)
【正文】 DMr1110 ?? 利用超速離心沉降法測(cè)蛋白質(zhì)的分子量是在 較低轉(zhuǎn)速 下進(jìn)行的（ 800020220r/min）。 TOF的原理是離子在電場(chǎng)作用下加速飛過(guò)飛行管道，根據(jù)到達(dá)檢測(cè)器的飛行時(shí)間不同而被檢測(cè)即 測(cè)定離子的質(zhì)荷比（ M/Z）與離子的飛行時(shí)間成正比 ，檢測(cè)離子 。 SDSPAGE凝膠電泳 ? 優(yōu)點(diǎn) ：操作簡(jiǎn)單，容易掌握，成本低，分辨率高，重復(fù)效果好。 ? 缺點(diǎn) ：對(duì)于電荷異常或者構(gòu)象異常的蛋白、帶有較大輔基的蛋白及一些結(jié)構(gòu)蛋白測(cè)定的分子質(zhì)量不太可靠，而且電泳結(jié)束后還需要染色，染色，脫色比較耗時(shí)。 （ MALDIMS） 優(yōu)點(diǎn)： （ 1）同 ESIMS 一樣對(duì) 樣品的消耗很少 ； （ 2） MALDIMS 的最 高分辨率 不斷提高，甚至超過(guò) ESIMS； （ 3）有利于對(duì)復(fù)雜混合物的分析，且能忍受較高濃度的鹽、緩沖劑和其他難揮發(fā)成分， 降低了對(duì)樣品預(yù)處理的要求 ； （ 4） MALDITOF 質(zhì)譜對(duì)生物大分子分子量的 測(cè)定范圍 是所有測(cè)試技術(shù)中 最廣 。離心開(kāi)始時(shí)，分子顆粒發(fā)生沉降，一段時(shí)間以后，沉降的結(jié)果造成了濃度梯度，因而產(chǎn)生了蛋白質(zhì)分子反向擴(kuò)散運(yùn)動(dòng)，當(dāng)反向擴(kuò)散與離心沉降達(dá)到平衡時(shí)，濃度梯度就固定不變了，但是目前由于 操作繁瑣 ，已經(jīng)不在一般實(shí)驗(yàn)室使用。 D：輻射能量 輻射失活法作為一種獨(dú)特的蛋白質(zhì)分子量測(cè)定方法，具有獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)，尤其是在 膜蛋白 研究方面，提供了一個(gè)測(cè)定膜蛋白分子量和研究其結(jié)構(gòu)的手段，但由于高能射線使用的局限性，在生化研究中不常用。 將它與經(jīng)典的脈沖化工作方式的飛行時(shí)間質(zhì)譜儀（ TOF）直
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