【正文】 ( √ )14．RNA不能做為遺傳物質(zhì)。④回文順序 ⑤以上都正確? ( ⑤ )①DNA的修復作用 ①它們的壽命比大多數(shù)細胞液的RNA為短 ②在3’端有一個多聚腺苷酸(polyA)長尾，是由DNA編碼的 ③它們存在于細胞核的核仁外周部分 ④鏈內(nèi)核苷酸不發(fā)生甲基化反應 ⑤有大約四分之三成份將被切除棹，以形成mRNA16．DNA復制的精確性遠高于RNA的合成，這是因為( ②④ )。 ①只有存在DNA時，RNA聚合酶才能催化磷酸二酯鍵的形成。16．用于RNA生物合成的DNA模板鏈稱為___反意義鏈____或____負鏈___。用蛋白水解酶作用DNA聚合酶I，可將其分為大、小兩個片段，其中__大_____片段叫Klenow片段，具有__5’→3’聚合酶作用_____和___3’→5’外切酶____作用，另外一個片段具有__5’→3’外切酶 _____活性。6．簡述基因工程的基本操作步驟及其應用意義。2．描述大腸桿菌DNA聚合酶I在DNA生物合成過程中的作用。25．DNA重組(rebination)：DNA重組是指在真核生物減數(shù)分裂過程中，細菌細胞的轉(zhuǎn)化中、病毒轉(zhuǎn)導中等發(fā)生的DNA片段的交換或插入。 Temin(1960)首次從勞氏肉瘤病毒中發(fā)現(xiàn)。6．單鏈DNA結(jié)合蛋白(singlestrand( √ )8．在大腸桿菌中，一種氨基酸只對應于一種氨酰tRNA合成酶。 ①已達到mRNA分子的盡頭 ②具有特異的tRNA識別終止密碼子 ③終止密碼子本身具有酯酶作用，可水解肽酰與tRNA之是的酯鍵 ④終止密碼子被終止因子(RF)所識別11．蛋白質(zhì)生物合成中的終止密碼是( ①④⑤ )。l0．每形成一個肽鍵要消耗____4____個高能磷酸鍵，但在合成起始時還需多消耗____1____個高能磷酸鍵。RNA空間構象9．原核細胞和真核細胞在合成蛋白質(zhì)的起始過程有什么區(qū)別。4．簡述三種RNA在蛋白質(zhì)生物合成中的作用。3．密碼的簡并性(degeneracy)：—個氨基酸具有兩個以上密碼子的現(xiàn)象。 c、對那些吸收了重組DNA的受體細胞進行篩選和鑒定。氨基蝶呤對葉酸還原酶有抑制作用，因此不能生長。 側(cè)切割產(chǎn)生339。④對含有重組DNA的細胞進行大量培養(yǎng)，檢測外援基因是否表達。3．原核生物中有三種起始因子分別是（IF1）、（ IF2 ）和（IF3 ）。產(chǎn)生這一應急反應的信號是鳥苷四磷酸(ppGpp)和鳥苷五磷酸（pppGpp）。7．模體：蛋白質(zhì)分子空間結(jié)構中存在著某些立體形狀和拓撲結(jié)構頗為類似的局部區(qū)域8．信號肽：在蛋白質(zhì)合成過程中N端有15~36個氨基酸殘基的肽段，引導蛋白質(zhì)的跨膜。20．融合蛋白：真核蛋白的基因與外源基因連接，同時表達翻譯出的原基因蛋白與外源蛋白結(jié)合在一起所組成的蛋白質(zhì)。典型的DNA重組實驗通常包含以下幾個步驟：①提取供體生物的目的基因（或稱外源基因），酶接連接到另一DNA分子上（克隆載體），形成一個新的重組DNA分子。23．限制性內(nèi)切酶的切割方式有三種類型分別是（在對稱軸539。 5．雜交瘤細胞系的產(chǎn)生與篩選？脾B細胞+骨髓瘤細胞，加聚乙二醇（PEG）促進細胞融合，HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)（內(nèi)含次黃嘌呤、氨基蝶呤、T）生長出來的脾B骨髓瘤融合細胞繼續(xù)擴大培養(yǎng)。②CAP還能抑制RNA聚合酶與DNA中其它位點的結(jié)合，從而提高與其特定啟動子結(jié)合的概率。向胚胎干細胞導入外源基因，然后植入到待孕雌鼠子宮，發(fā)育成幼鼠，雜交獲得純合鼠。 (4)變偶假說：密碼的專一性主要由頭兩位堿基決定，第三位堿基重要性不大，因此在與反密碼子的相互作用中具有一定的靈活性。首先氨酰tRNA結(jié)合到核糖體的A位，然后，由肽酰轉(zhuǎn)移酶催化與P位的起始氨基酸或肽?；纬呻逆I，tRNAf或空載tRNA仍留在P位．最后核糖體沿mRNA5’→3’方向移動一個密碼子距離，A位上的延長一個氨基酸單位的肽酰tRNA轉(zhuǎn)移到P位，全部過程需延伸因子EFTu、EFTs，能量由GTP提供。配對（莖環(huán)結(jié)構）（同左）7．氨酰tRNA合成酶對___氨基酸_______和相應的__tRNA______有高度的選擇性。 ①將一個氨基酸連接到另一個氨基酸上 ②把氨基酸帶到mRNA位置上 ③將mRNA接到核糖體上 ④增加氨基酸的有效濃度8．關于核糖體的移位，敘述正確的是( ③ )。( )5．線粒體和葉綠體的核糖體的亞基組成與原核生物類似。DNA聚合酶是多功能酶，除具有聚合作用外，還具有其它功能，不同DNA聚合酶所具有的功能不同。13．半不連續(xù)復制(Semidiscontinuous replication)：在DNA復制過程中，一條鏈的合成是連續(xù)的，另一條鏈的合成是不連續(xù)的，所以叫做半不連續(xù)復制。SOS反應主要包括兩個方面：DNA損傷修復(SOS修復或稱誘導修復)和誘變效應?！?’，這一過程叫RNA復制。病毒的單鏈RNA在病毒進入寄主細胞后被釋放出來，此 RNA帶有與模板互補的tRNA引物，病毒的逆轉(zhuǎn)錄酶以此RNA為模板，從引物的3’OH端，按堿基互補原則以5’→ 3’方向合成DNA鏈()，形成RNA—DNA雜交分子，然后逆轉(zhuǎn)酶發(fā)揮 RNA水解酶活性，水解雜交分子中的RNA鏈，最后以新合成的DNA鏈()為模板，合成另一條 DNA鏈(+)，形成雙鏈DNA分子(為病毒)整合到寄主基因組中，隨寄主細胞的轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)生病毒 RNA(+)，此RNA可翻譯病毒蛋白質(zhì)，可作為后代病毒RNA。13．誘變劑大致分為__物理誘變劑_____、_化學誘變劑______、__生物誘變劑_____三種類型。(四)選擇題1．DNA以半保留方式復制，如果一個具有放射性標記的雙鏈DNA分子，在無放射性標記的環(huán)境中經(jīng)過兩輪復制。 ①Met ②S—腺苷甲硫氨酸 ③甲酰甲硫氨酸 ④MettRNA 13．關于大腸桿菌DNA聚合酶I的下列論述哪些是正確的( ①②③ )。( √ )11．DNA聚合酶I切除引物RNA屬3’→ 5’外切酶作用，切除錯配的核苷酸屬5’→ 3’外切酶作用。( √ )17．大腸桿菌DNA聚合酶Ⅲ只起聚合作用，不能校對錯配堿基。⑤以上都正確( ④ )①堿基替換 ②磷酸酯鍵斷裂 ③堿基丟失④形成共價連接的嘧啶二聚體 ⑤堿基插入30. 能編碼多肽鏈的最小DNA單位是( ⑤ )①順反子 ②操縱子 ③啟動子 ④復制子 ⑤轉(zhuǎn)錄子 (五)是非題 1．大腸桿菌DNA生物合成中，DNA聚合酶I主要起聚合作用。外切酶活力，而RNA聚合酶無相應活力③脫氧核苷酸之間的氫鍵配對精確性高于脫氧核苷酸與核苷酸之間的配對④DNA聚合酶有5’→ 3’外切酶活力，RNA聚合酶無此活性17．有關逆轉(zhuǎn)錄酶的論述哪些是正確的( ①②④ )。 ④在多數(shù)情況下，只有一條DNA鏈作為模板。19．某DNA雙螺旋中，單鏈5’… ATCGCTCGA … 3’為有意義鏈，若轉(zhuǎn)錄mRNA，其中堿其排列順序為5’… __ AUCGCUCGA _____… 3’。4．真核生物DNA聚合酶有__DNA聚合酶α_____，___DNA聚合酶β____，___DNA聚合酶γ____，__DNA聚合酶δ_____。7．試比較轉(zhuǎn)錄與復制的區(qū)別?！?’外切酶活性，用以校對復制的正確性，當出現(xiàn)錯配堿基時，切除錯配堿基直到正確配對為止；DNA聚合酶I不是DNA復制和校正中的主要聚合酶，它的功能主要是修復。28．模板鏈(template strand)[又稱負()鏈，反意義鏈(antisense strand)]：轉(zhuǎn)錄過程中用作模板的這條DNA鏈，稱模板鏈。16．突變(mutation)：基因組DNA順序上的任何一種改變都叫做突變。 7．DNA連接酶(DNA ligase)：是專門催化雙鏈DNA中缺口共價連接的酶，不能催化兩條游離的單鏈DNA鏈間形成磷酸二酯鍵。( √ )11．每種氨基酸只能有一種特定的tRNA與之對應。 ①氨基酸必須活化 ②需要消耗能量 ③每延長一個氨基酸必須經(jīng)過進位、轉(zhuǎn)肽、移位、稅落四個步驟 ④合成肽鏈由C端向N端不斷延長 ⑤新生肽鏈需加工才能成為活性蛋白質(zhì)15．下列哪些內(nèi)容屬于蛋白質(zhì)合成后的加工、修飾( ②③④⑤ )。13．原核生物的核糖體由_____30S_______小亞基和____50S________大亞基組成，真核生物核糖體由___40S______小亞基和_______60S________大亞基組成。多條肽鏈（或不同蛋白）15. 試比較原核生物與真核生物的翻譯。11．蛋白質(zhì)的高級結(jié)構是怎樣形成的? 提示：蛋白質(zhì)的高級結(jié)構是由氨基酸的順序決定的，不同的蛋白質(zhì)有不同的氨基酸順序，各自按一定的方式折疊而成該蛋白質(zhì)的高級結(jié)構。 (3)rRNA 核糖體的組分，在形成核糖體的結(jié)構和功能上起重要作用，它與核糖體中蛋白質(zhì)以及其它輔助因子一起提供了翻譯過程所需的全部酶活性。6．移碼突變(frameshift mutation)：在mRNA中，若插入或刪去一個核苷酸，就會使讀碼發(fā)錯誤，稱為移碼，由于移碼而造成的突變、稱移碼突變?？股乜剐院Y選、抗性的插入失活、蘭白斑篩選 或PCR篩選、差式篩選、DNA探針 多數(shù)克隆載體均帶有抗生素抗性基因（抗氨芐青霉素、四環(huán)素）。由于它缺少形成3/5/磷酸二脂鍵所需要的3OH，一旦參入到DNA鏈中，此DNA鏈就不能進一步延長。在電泳中最前面的是（ SC構型 ）。b、具有熱穩(wěn)定性的酶如：TagDNA聚合酶。6．分子生物學的研究內(nèi)容主要包含（結(jié)構分子生物學 ）、（基因表達與調(diào)控 ）、（ DNA重組技術 ）三部分。12．DNA探針：是帶有標記的一段已知序列DNA，用以檢測未知序列、篩選目的基因等方面廣泛應用。3．CAP：環(huán)腺苷酸（cAMP）受體蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP與CRP結(jié)合后所形成的復合物稱激活蛋白CAP（cAMP activated protein ）4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互補序列，常是限制性酶切位點。17．順式作用元件：在DNA中一段特殊的堿基序列，對基因的表達起到調(diào)控作用的基因元件。有G時轉(zhuǎn)錄從（ S2 ）開始，無G時轉(zhuǎn)錄從（ S1 ）開始。21．RNA聚合酶Ⅱ的基本轉(zhuǎn)錄因子有、TFⅡA、TFⅡB、TFIID、TFⅡE他們的結(jié)合順序是： （ D、A、B、E ）。e、根據(jù)基因工程的特殊要求加裝特殊的基因元件 4．舉例說明差示篩選組織特異cDNA的方法？制備兩種細胞群體，目的基因在其中一種細胞中表達或高表達，在另一種細胞中不表達或低表達，然后通過雜交對比找到目的基因。因此RNA聚合酶難以與其結(jié)合。ES細胞的培養(yǎng)：分離胚泡的內(nèi)層細胞團進行培養(yǎng)。增加或刪除某個核苷酸會發(fā)生移碼突變。蛋白質(zhì)合成可分四個步驟，以大腸桿菌為例： (1)氨基酸的活化：游離的氨基酸必須經(jīng)過活化以獲得能量才能參與蛋白質(zhì)合成，由氨酰tRNA合成酶催化，消耗1分子ATP，形成氨酰tRNA。結(jié)果發(fā)現(xiàn)只有一個肽段的差異，測得其基酸順序如下：核酸（Nucleic acids） 蛋白質(zhì)（Proteins）4．植物細胞中蛋白質(zhì)生物合成可在____核糖體____、____線粒體____和____葉綠體_______三種細胞器內(nèi)進行。 ①RF ②RF一1 ③RF一2 ④RF一3 5．能與tRNA反密碼子中的I堿基配對的是( ④ )。( )2．密碼子在mRNA上的閱讀方向為5’→ 3’。最初由Crick(1958)提出，經(jīng)后人的不斷補充和修改，現(xiàn)包括反轉(zhuǎn)錄和RNA復制等內(nèi)容。 11．前導鏈(1eading strand)：在DNA復制過程中，以親代鏈(3’→ 5’為模板時，子代鏈的合成 (5’→ 3’)是連續(xù)的．這條能連續(xù)合成的鏈稱前導鏈。22．切除修復(excision repair)：在一系列