【正文】 ( √ )14．RNA不能做為遺傳物質(zhì)。④回文順序 ⑤以上都正確? ( ⑤ )①DNA的修復(fù)作用 ①它們的壽命比大多數(shù)細(xì)胞液的RNA為短 ②在3’端有一個(gè)多聚腺苷酸(polyA)長尾，是由DNA編碼的 ③它們存在于細(xì)胞核的核仁外周部分 ④鏈內(nèi)核苷酸不發(fā)生甲基化反應(yīng) ⑤有大約四分之三成份將被切除棹，以形成mRNA16．DNA復(fù)制的精確性遠(yuǎn)高于RNA的合成，這是因?yàn)? ②④ )。 ①只有存在DNA時(shí)，RNA聚合酶才能催化磷酸二酯鍵的形成。16．用于RNA生物合成的DNA模板鏈稱為___反意義鏈____或____負(fù)鏈___。用蛋白水解酶作用DNA聚合酶I，可將其分為大、小兩個(gè)片段，其中__大_____片段叫Klenow片段，具有__5’→3’聚合酶作用_____和___3’→5’外切酶____作用，另外一個(gè)片段具有__5’→3’外切酶 _____活性。6．簡述基因工程的基本操作步驟及其應(yīng)用意義。2．描述大腸桿菌DNA聚合酶I在DNA生物合成過程中的作用。25．DNA重組(rebination)：DNA重組是指在真核生物減數(shù)分裂過程中，細(xì)菌細(xì)胞的轉(zhuǎn)化中、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)中等發(fā)生的DNA片段的交換或插入。 Temin(1960)首次從勞氏肉瘤病毒中發(fā)現(xiàn)。6．單鏈DNA結(jié)合蛋白(singlestrand( √ )8．在大腸桿菌中，一種氨基酸只對(duì)應(yīng)于一種氨酰tRNA合成酶。 ①已達(dá)到mRNA分子的盡頭 ②具有特異的tRNA識(shí)別終止密碼子 ③終止密碼子本身具有酯酶作用，可水解肽酰與tRNA之是的酯鍵 ④終止密碼子被終止因子(RF)所識(shí)別11．蛋白質(zhì)生物合成中的終止密碼是( ①④⑤ )。l0．每形成一個(gè)肽鍵要消耗____4____個(gè)高能磷酸鍵，但在合成起始時(shí)還需多消耗____1____個(gè)高能磷酸鍵。RNA空間構(gòu)象9．原核細(xì)胞和真核細(xì)胞在合成蛋白質(zhì)的起始過程有什么區(qū)別。4．簡述三種RNA在蛋白質(zhì)生物合成中的作用。3．密碼的簡并性(degeneracy)：—個(gè)氨基酸具有兩個(gè)以上密碼子的現(xiàn)象。 c、對(duì)那些吸收了重組DNA的受體細(xì)胞進(jìn)行篩選和鑒定。氨基蝶呤對(duì)葉酸還原酶有抑制作用，因此不能生長。 側(cè)切割產(chǎn)生339。④對(duì)含有重組DNA的細(xì)胞進(jìn)行大量培養(yǎng)，檢測(cè)外援基因是否表達(dá)。3．原核生物中有三種起始因子分別是（IF1）、（ IF2 ）和（IF3 ）。產(chǎn)生這一應(yīng)急反應(yīng)的信號(hào)是鳥苷四磷酸(ppGpp)和鳥苷五磷酸（pppGpp）。7．模體：蛋白質(zhì)分子空間結(jié)構(gòu)中存在著某些立體形狀和拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)頗為類似的局部區(qū)域8．信號(hào)肽：在蛋白質(zhì)合成過程中N端有15~36個(gè)氨基酸殘基的肽段，引導(dǎo)蛋白質(zhì)的跨膜。20．融合蛋白：真核蛋白的基因與外源基因連接，同時(shí)表達(dá)翻譯出的原基因蛋白與外源蛋白結(jié)合在一起所組成的蛋白質(zhì)。典型的DNA重組實(shí)驗(yàn)通常包含以下幾個(gè)步驟：①提取供體生物的目的基因（或稱外源基因），酶接連接到另一DNA分子上（克隆載體），形成一個(gè)新的重組DNA分子。23．限制性內(nèi)切酶的切割方式有三種類型分別是（在對(duì)稱軸539。 5．雜交瘤細(xì)胞系的產(chǎn)生與篩選？脾B細(xì)胞+骨髓瘤細(xì)胞，加聚乙二醇（PEG）促進(jìn)細(xì)胞融合，HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)（內(nèi)含次黃嘌呤、氨基蝶呤、T）生長出來的脾B骨髓瘤融合細(xì)胞繼續(xù)擴(kuò)大培養(yǎng)。②CAP還能抑制RNA聚合酶與DNA中其它位點(diǎn)的結(jié)合，從而提高與其特定啟動(dòng)子結(jié)合的概率。向胚胎干細(xì)胞導(dǎo)入外源基因，然后植入到待孕雌鼠子宮，發(fā)育成幼鼠，雜交獲得純合鼠。 (4)變偶假說：密碼的專一性主要由頭兩位堿基決定，第三位堿基重要性不大，因此在與反密碼子的相互作用中具有一定的靈活性。首先氨酰tRNA結(jié)合到核糖體的A位，然后，由肽酰轉(zhuǎn)移酶催化與P位的起始氨基酸或肽?；纬呻逆I，tRNAf或空載tRNA仍留在P位．最后核糖體沿mRNA5’→3’方向移動(dòng)一個(gè)密碼子距離，A位上的延長一個(gè)氨基酸單位的肽酰tRNA轉(zhuǎn)移到P位，全部過程需延伸因子EFTu、EFTs，能量由GTP提供。配對(duì)（莖環(huán)結(jié)構(gòu)）（同左）7．氨酰tRNA合成酶對(duì)___氨基酸_______和相應(yīng)的__tRNA______有高度的選擇性。 ①將一個(gè)氨基酸連接到另一個(gè)氨基酸上 ②把氨基酸帶到mRNA位置上 ③將mRNA接到核糖體上 ④增加氨基酸的有效濃度8．關(guān)于核糖體的移位，敘述正確的是( ③ )。( )5．線粒體和葉綠體的核糖體的亞基組成與原核生物類似。DNA聚合酶是多功能酶，除具有聚合作用外，還具有其它功能，不同DNA聚合酶所具有的功能不同。13．半不連續(xù)復(fù)制(Semidiscontinuous replication)：在DNA復(fù)制過程中，一條鏈的合成是連續(xù)的，另一條鏈的合成是不連續(xù)的，所以叫做半不連續(xù)復(fù)制。SOS反應(yīng)主要包括兩個(gè)方面：DNA損傷修復(fù)(SOS修復(fù)或稱誘導(dǎo)修復(fù))和誘變效應(yīng)?！?’，這一過程叫RNA復(fù)制。病毒的單鏈RNA在病毒進(jìn)入寄主細(xì)胞后被釋放出來，此 RNA帶有與模板互補(bǔ)的tRNA引物，病毒的逆轉(zhuǎn)錄酶以此RNA為模板，從引物的3’OH端，按堿基互補(bǔ)原則以5’→ 3’方向合成DNA鏈()，形成RNA—DNA雜交分子，然后逆轉(zhuǎn)酶發(fā)揮 RNA水解酶活性，水解雜交分子中的RNA鏈，最后以新合成的DNA鏈()為模板，合成另一條 DNA鏈(+)，形成雙鏈DNA分子(為病毒)整合到寄主基因組中，隨寄主細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)生病毒 RNA(+)，此RNA可翻譯病毒蛋白質(zhì)，可作為后代病毒RNA。13．誘變劑大致分為__物理誘變劑_____、_化學(xué)誘變劑______、__生物誘變劑_____三種類型。(四)選擇題1．DNA以半保留方式復(fù)制，如果一個(gè)具有放射性標(biāo)記的雙鏈DNA分子，在無放射性標(biāo)記的環(huán)境中經(jīng)過兩輪復(fù)制。 ①M(fèi)et ②S—腺苷甲硫氨酸 ③甲酰甲硫氨酸 ④MettRNA 13．關(guān)于大腸桿菌DNA聚合酶I的下列論述哪些是正確的( ①②③ )。( √ )11．DNA聚合酶I切除引物RNA屬3’→ 5’外切酶作用，切除錯(cuò)配的核苷酸屬5’→ 3’外切酶作用。( √ )17．大腸桿菌DNA聚合酶Ⅲ只起聚合作用，不能校對(duì)錯(cuò)配堿基。⑤以上都正確( ④ )①堿基替換 ②磷酸酯鍵斷裂 ③堿基丟失④形成共價(jià)連接的嘧啶二聚體 ⑤堿基插入30. 能編碼多肽鏈的最小DNA單位是( ⑤ )①順反子 ②操縱子 ③啟動(dòng)子 ④復(fù)制子 ⑤轉(zhuǎn)錄子 (五)是非題 1．大腸桿菌DNA生物合成中，DNA聚合酶I主要起聚合作用。外切酶活力，而RNA聚合酶無相應(yīng)活力③脫氧核苷酸之間的氫鍵配對(duì)精確性高于脫氧核苷酸與核苷酸之間的配對(duì)④DNA聚合酶有5’→ 3’外切酶活力，RNA聚合酶無此活性17．有關(guān)逆轉(zhuǎn)錄酶的論述哪些是正確的( ①②④ )。 ④在多數(shù)情況下，只有一條DNA鏈作為模板。19．某DNA雙螺旋中，單鏈5’… ATCGCTCGA … 3’為有意義鏈，若轉(zhuǎn)錄mRNA，其中堿其排列順序?yàn)?’… __ AUCGCUCGA _____… 3’。4．真核生物DNA聚合酶有__DNA聚合酶α_____，___DNA聚合酶β____，___DNA聚合酶γ____，__DNA聚合酶δ_____。7．試比較轉(zhuǎn)錄與復(fù)制的區(qū)別。→5’外切酶活性，用以校對(duì)復(fù)制的正確性，當(dāng)出現(xiàn)錯(cuò)配堿基時(shí)，切除錯(cuò)配堿基直到正確配對(duì)為止；DNA聚合酶I不是DNA復(fù)制和校正中的主要聚合酶，它的功能主要是修復(fù)。28．模板鏈(template strand)[又稱負(fù)()鏈，反意義鏈(antisense strand)]：轉(zhuǎn)錄過程中用作模板的這條DNA鏈，稱模板鏈。16．突變(mutation)：基因組DNA順序上的任何一種改變都叫做突變。 7．DNA連接酶(DNA ligase)：是專門催化雙鏈DNA中缺口共價(jià)連接的酶，不能催化兩條游離的單鏈DNA鏈間形成磷酸二酯鍵。( √ )11．每種氨基酸只能有一種特定的tRNA與之對(duì)應(yīng)。 ①氨基酸必須活化 ②需要消耗能量 ③每延長一個(gè)氨基酸必須經(jīng)過進(jìn)位、轉(zhuǎn)肽、移位、稅落四個(gè)步驟 ④合成肽鏈由C端向N端不斷延長 ⑤新生肽鏈需加工才能成為活性蛋白質(zhì)15．下列哪些內(nèi)容屬于蛋白質(zhì)合成后的加工、修飾( ②③④⑤ )。13．原核生物的核糖體由_____30S_______小亞基和____50S________大亞基組成，真核生物核糖體由___40S______小亞基和_______60S________大亞基組成。多條肽鏈（或不同蛋白）15. 試比較原核生物與真核生物的翻譯。11．蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)是怎樣形成的? 提示：蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)是由氨基酸的順序決定的，不同的蛋白質(zhì)有不同的氨基酸順序，各自按一定的方式折疊而成該蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)。 (3)rRNA 核糖體的組分，在形成核糖體的結(jié)構(gòu)和功能上起重要作用，它與核糖體中蛋白質(zhì)以及其它輔助因子一起提供了翻譯過程所需的全部酶活性。6．移碼突變(frameshift mutation)：在mRNA中，若插入或刪去一個(gè)核苷酸，就會(huì)使讀碼發(fā)錯(cuò)誤，稱為移碼，由于移碼而造成的突變、稱移碼突變?？股乜剐院Y選、抗性的插入失活、蘭白斑篩選 或PCR篩選、差式篩選、DNA探針 多數(shù)克隆載體均帶有抗生素抗性基因（抗氨芐青霉素、四環(huán)素）。由于它缺少形成3/5/磷酸二脂鍵所需要的3OH，一旦參入到DNA鏈中，此DNA鏈就不能進(jìn)一步延長。在電泳中最前面的是（ SC構(gòu)型 ）。b、具有熱穩(wěn)定性的酶如：TagDNA聚合酶。6．分子生物學(xué)的研究內(nèi)容主要包含（結(jié)構(gòu)分子生物學(xué) ）、（基因表達(dá)與調(diào)控 ）、（ DNA重組技術(shù) ）三部分。12．DNA探針：是帶有標(biāo)記的一段已知序列DNA，用以檢測(cè)未知序列、篩選目的基因等方面廣泛應(yīng)用。3．CAP：環(huán)腺苷酸（cAMP）受體蛋白CRP（cAMP receptor protein ），cAMP與CRP結(jié)合后所形成的復(fù)合物稱激活蛋白CAP（cAMP activated protein ）4．回文序列：DNA片段上的一段所具有的反向互補(bǔ)序列，常是限制性酶切位點(diǎn)。17．順式作用元件：在DNA中一段特殊的堿基序列，對(duì)基因的表達(dá)起到調(diào)控作用的基因元件。有G時(shí)轉(zhuǎn)錄從（ S2 ）開始，無G時(shí)轉(zhuǎn)錄從（ S1 ）開始。21．RNA聚合酶Ⅱ的基本轉(zhuǎn)錄因子有、TFⅡA、TFⅡB、TFIID、TFⅡE他們的結(jié)合順序是： （ D、A、B、E ）。e、根據(jù)基因工程的特殊要求加裝特殊的基因元件 4．舉例說明差示篩選組織特異cDNA的方法？制備兩種細(xì)胞群體，目的基因在其中一種細(xì)胞中表達(dá)或高表達(dá)，在另一種細(xì)胞中不表達(dá)或低表達(dá)，然后通過雜交對(duì)比找到目的基因。因此RNA聚合酶難以與其結(jié)合。ES細(xì)胞的培養(yǎng)：分離胚泡的內(nèi)層細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)。增加或刪除某個(gè)核苷酸會(huì)發(fā)生移碼突變。蛋白質(zhì)合成可分四個(gè)步驟，以大腸桿菌為例： (1)氨基酸的活化：游離的氨基酸必須經(jīng)過活化以獲得能量才能參與蛋白質(zhì)合成，由氨酰tRNA合成酶催化，消耗1分子ATP，形成氨酰tRNA。結(jié)果發(fā)現(xiàn)只有一個(gè)肽段的差異，測(cè)得其基酸順序如下：核酸（Nucleic acids） 蛋白質(zhì)（Proteins）4．植物細(xì)胞中蛋白質(zhì)生物合成可在____核糖體____、____線粒體____和____葉綠體_______三種細(xì)胞器內(nèi)進(jìn)行。 ①RF ②RF一1 ③RF一2 ④RF一3 5．能與tRNA反密碼子中的I堿基配對(duì)的是( ④ )。( )2．密碼子在mRNA上的閱讀方向?yàn)?’→ 3’。最初由Crick(1958)提出，經(jīng)后人的不斷補(bǔ)充和修改，現(xiàn)包括反轉(zhuǎn)錄和RNA復(fù)制等內(nèi)容。 11．前導(dǎo)鏈(1eading strand)：在DNA復(fù)制過程中，以親代鏈(3’→ 5’為模板時(shí)，子代鏈的合成 (5’→ 3’)是連續(xù)的．這條能連續(xù)合成的鏈稱前導(dǎo)鏈。22．切除修復(fù)(excision repair)：在一系列