【正文】 只有明確動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的目的 ,才能避免實(shí)驗(yàn)的盲目性 ,真正做到有的放矢 ,少走彎路 ,節(jié)約經(jīng)費(fèi)和時(shí)間 ,從而達(dá)到科學(xué)、節(jié)儉和高效。 。 生物學(xué)活性的節(jié)律 （ Biological activity rhythms） Factors influence animal experiment ?? sensitivity and reproducibility 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本技術(shù) 主要內(nèi)容 ? 抓取與固定 ? 編號(hào)方法 ? 給藥方法 ? 采血方法 ? 麻醉方法 ? 處死方法 ? 職業(yè)安全 ? 無害化處理 Animal Restraint ? MouseAvoid grasping and pulling the tip of the tail Rat ? Tail should be lifted only at the base and for short period,tail skin may tear Restrainer of Mice and Rat Guinea pig ? Hold with two hands Rabbit ? Use two hands for lifting and should not be restrained by the ears Restrainer of Rabbit Dog 性別鑒定 Fur coloringpicric acid ? 染色法：一般適用于短期實(shí)驗(yàn)，大小鼠常用。 ? 飼料蛋白質(zhì)水平不僅影響體長(zhǎng)、尾長(zhǎng)、生長(zhǎng)曲線，而且影響臟器重量和臟器指數(shù)。 一個(gè)籠子中可以放多少只動(dòng)物？ 經(jīng)驗(yàn)告訴我們是每籠 25只動(dòng)物變異最低，動(dòng)物單籠飼養(yǎng)變異高，當(dāng)每籠動(dòng)物數(shù)量超過 5只時(shí)變異同樣迅速攀升。某些木材，如柚木和桃花心木本身有毒，有一些木材釋放出化學(xué)物質(zhì)可能影響動(dòng)物的酶系統(tǒng)。當(dāng)籠具上下排列時(shí)，動(dòng)物所受的光照強(qiáng)度會(huì)有很大差別。 LD50值在不同的房間溫度條件下相差了 35倍， LD50值在動(dòng)物熱穩(wěn)定區(qū)內(nèi)最高，表明動(dòng)物在這時(shí)對(duì)該試驗(yàn)物質(zhì)的耐受性最強(qiáng)。 ?1969年 Rygaard首先將 人結(jié)腸腺癌 移植裸小鼠獲得成功 。 Induced Tumor Animal Model Methods 實(shí)體瘤移植 腫瘤細(xì)胞皮下接種 —— 710d處死荷瘤動(dòng)物 —— 選擇生長(zhǎng)良好、無壞死液化的瘤組織 —— 23mm3+生理鹽水或其它營(yíng)養(yǎng)液 —— 無菌套管針抽吸 ——接種同種受體動(dòng)物右前腋窩皮下。 ?是生物研究中的重要方法之一，也是從動(dòng)物身上獲得有關(guān)情報(bào)資料的唯一手段。 異位誘發(fā)： 將與致癌物接觸后的動(dòng)物組織或器官埋置于該動(dòng)物或另一正常動(dòng)物皮下而產(chǎn)生的該組織或器官的腫瘤。 Classification of Immunodeficiency Animal ?Congenital Immunodeficiency animal （先天性） ? Tlymphocyte deficiency animal ： nude mice,nude rats ? B lymphocyte deficiency animal ： CBA/N mice ? NK cell deficiency animal ： Beige mice ? Severe bined immunedeficiency： SCID mice ?Acquired immunodeficiency syndrom（ 獲得性 ） primate,mice and cat AIDS model Tlymphocyte Deficiency Animal History of Nude Mice ?1962年英國(guó)格拉斯哥醫(yī)院 Grist在非近交系的小鼠中偶然發(fā)現(xiàn)有個(gè)別 小鼠無毛 。 如果環(huán)境溫度降至低于熱平衡區(qū)溫度的下限，動(dòng)物的代謝率將呈線性增長(zhǎng)。一些品系的大鼠每天的光照低于 8小時(shí)就不發(fā)情，如果每天光照時(shí)間超過 14小時(shí) 它們將持續(xù)發(fā)情而不排卵。不透明籠具可能最適于動(dòng)物生長(zhǎng)，盡管這些籠具給實(shí)驗(yàn)觀察帶來不便，而且觀察在不透明籠具中的動(dòng)物可能會(huì)打擾它們。 大多數(shù)動(dòng)物已經(jīng)形成了對(duì)人類的不信任 ， 傾向于逃離人類 。 1. 對(duì)采食量的影響 ? 飼料組成不同導(dǎo)致的能量濃度差異，直接影響采食。這些周期的長(zhǎng)度可為數(shù)毫秒、數(shù)小時(shí)、數(shù)天、或數(shù)年。 麻醉的意義：第一是善待動(dòng)物，第二是提高動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的 效率。其他放射性廢棄物，應(yīng)進(jìn)行中、長(zhǎng)期安全包裝后送放射性廢物處理站處理。動(dòng)物質(zhì)量許可證： 京 SCXK 2022008。 。玻璃管動(dòng)物標(biāo)簽閱讀器的最佳閱讀距離為 712CM， 不要太近或太遠(yuǎn) 動(dòng)物體內(nèi)色素標(biāo)簽 ? 熒光標(biāo)記是不易溶于水，經(jīng)過分解的植物材料，性能穩(wěn)定，與蛋白質(zhì)可以保持良好的平衡。 4. 對(duì)免疫功能的影響 ? VitA不足，免疫功能明顯下降。老鼠們反復(fù)地做著同一動(dòng)作。 墊料的物理?xiàng)l件也可能影響試驗(yàn) ， 如 ， 小的粒子和灰塵可刺激粘膜 ， 鋒利的顆?？纱唐破つw 。強(qiáng)光可使雄性大鼠腎上腺的重量增加，給小鼠超過 500 lux的光照，會(huì)導(dǎo)致哺乳母鼠忽視其新生幼仔和它們的死亡。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)： 40%70% 氣候因素對(duì)動(dòng)物試驗(yàn)的影響 空氣相對(duì)濕度（ Relative air humidity） 高濕： ?80%85%人和動(dòng)物都將停止生長(zhǎng)； ?高濕容易引起代謝紊亂； ?利于微生物滋生； ?氨易溶于水，濕度高，室內(nèi)氨濃度增加。 ?裸鼠自發(fā)現(xiàn)以來 ， 廣泛應(yīng)用于腫瘤學(xué) 、 免疫學(xué)和病毒學(xué)等多個(gè)學(xué)科的研究 。 有些腫瘤需要接種在特定的部位 （ 對(duì)雌激素依賴的人乳腺癌MCF7 細(xì)胞系 ， 接種乳腺脂肪墊才能成活 ） 。 ?標(biāo)準(zhǔn)化動(dòng)物系指經(jīng)遺傳學(xué)、微生物學(xué)、環(huán)境及營(yíng)養(yǎng)控制而繁育的動(dòng)物。 Tumor Animal Model Induced tumor animal model 使用致癌因素在實(shí)驗(yàn)條件下誘發(fā)動(dòng)物發(fā)生腫瘤的動(dòng)物模型。 ? 注射生物及生物制品引起 β 細(xì)胞破壞，如鼠腦炎、心肌炎病毒 M型變異可誘發(fā)若干品系的成年小鼠糖尿病。 甚至可以說沒有環(huán)境控制就沒有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。 and ammonia and other gasses, %)。 理化因素對(duì)動(dòng)物試驗(yàn)的影響 有害氣體 動(dòng)物設(shè)施建筑 動(dòng)物設(shè)施設(shè)備 居住因素對(duì)動(dòng)物試驗(yàn)的影響 防止外部污染 Isolation 居住因素對(duì)動(dòng)物試驗(yàn)的影響 防止公害外 泄 containment 居住因素對(duì)動(dòng)物試驗(yàn)的影響 我們難以使房間內(nèi)籠具的環(huán)境條件完全相等，因此，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)在籠架中自由的分布，尤其對(duì)照組動(dòng)物和給藥組動(dòng)物在籠架的位置應(yīng)是自由分布的。 盡管經(jīng)過了眾多世代的選擇培育 ， 實(shí)驗(yàn)大鼠的這種活動(dòng)性需求依然存在 。 ?不同品種和品系的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物其壽命各不相同，有的以日，有的以月，有的以年計(jì)算。 對(duì)營(yíng)養(yǎng)研究的影響 病原微生物感染對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的影響 ? 病毒感染 ? 細(xì)菌感染 ? 寄生蟲感染 病原微生物的影響 仙臺(tái)病毒感染 仙臺(tái)病毒感染肺病變 對(duì)麻醉實(shí)驗(yàn)和吸入毒理學(xué)研究等產(chǎn)生嚴(yán)重干擾 小鼠肝炎病毒感染 裸鼠的肝臟病變 waste syndrome 出現(xiàn)消耗性疾病，給腫瘤免疫學(xué)研究造成嚴(yán)重干擾 淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒 ? LCMV is transmitted by the mon house mouse, Mus musculus, which sheds the virus in its urine. Humans bee infected by inhaling aerosolized particles of rodent excrement, by ingesting food contaminated with the virus or by direct contact of mucus membranes with infected fluids (lab and pets). 污染移植腫瘤，影響腫瘤學(xué)研究 犬細(xì)小病毒感染 免疫功能受到抑制，犬死亡。適用于大、小鼠。絕不可自行處理和隨意扔掉。 實(shí)驗(yàn)第 7天，頸椎脫臼處死動(dòng)物， ***。 。一般情況下，動(dòng)物的耐受性比人大，也就是單位體重動(dòng)物的用藥量比人要大。 1. 動(dòng)物早期營(yíng)養(yǎng)狀況 動(dòng)物早期營(yíng)養(yǎng)狀況對(duì)課題營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)測(cè)定產(chǎn)生影響。 它們每一個(gè)動(dòng)作的目的就是為了不停地重復(fù)整套動(dòng)作，而且做得那么認(rèn)真執(zhí)著，與精神病人的表現(xiàn)一模一樣，毫無二致。嚴(yán)格控制的動(dòng)物生存條件有利于獲得有意義的和可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，但是，對(duì)于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，嚴(yán)格控制的環(huán)境條件帶給它們一個(gè)顯著偏離自然的環(huán)境和生活。 理化因素對(duì)動(dòng)物試驗(yàn)的影響 所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的聽力均超過人類，人類的聽力范圍是 15000～ 20,000 Hz，而大鼠可測(cè)聲音高至 100,000 Hz. 噪聲（ Noise） 理化因素對(duì)動(dòng)物試驗(yàn)的影響 噪聲（ Noise） 噪音是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)的常見原因。其實(shí)，最值得關(guān)注的是籠具中的氣體或微氣候，這與籠具設(shè)計(jì)、籠具通風(fēng)、墊料材料和房間的通風(fēng)換氣密切相關(guān)。 SHO（ SCID Hairless Outbred） ? 人們一直想讓 SCID小鼠擁有裸鼠無毛的優(yōu)點(diǎn) ? Charles River Lab的研究人員自 2022年開始就著手培育無毛的 SCID小鼠，他們通過 Crl:HAPrkdcscid和 Crl:SKH1Hrhr這兩個(gè)品系雜交，最終在 2022年得到了兩條染色體上均帶有 SCID基因的 無毛封閉群小鼠模型 SHO（ SCID Hairless Outbred） . ? 2022年 6月，實(shí)驗(yàn)人員通過對(duì)比的方法將人前列腺癌細(xì)胞株 PC3分別接種到 SCID和 SHO身上，研究發(fā)現(xiàn)， SHO除去具有與 SCID小鼠相同的腫瘤生長(zhǎng)特性之外，還摒除了 Nu/Nu裸鼠接種 PC3時(shí)出現(xiàn)的皮膚潰瘍現(xiàn)象。當(dāng)豚鼠再次接觸此抗原時(shí)， IgE介導(dǎo)發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，使細(xì)胞脫顆粒，釋放出活性化學(xué)物質(zhì)如組胺、嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子等，作用于支氣管引起氣道高反應(yīng)致哮喘。太老的動(dòng)物的各器官老化，代謝功能下降，只在老年醫(yī)學(xué)研究中使用； ?體重 在正常營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)和飼養(yǎng)條件下，體重與年齡有一定的相關(guān)性； ?性別 許多實(shí)驗(yàn)證明，同一品種（系）不同性別的動(dòng)物對(duì)外界刺激的反應(yīng)不一致。 經(jīng)濟(jì)性原則 無菌兔 人類疾病動(dòng)物模型 What is the Animal Model? ? an animal model in which normative biology or behavior can be studied, or in which a spontaneous or induced pathological process can be investigated, and in which the phenomenon in one or more respects resembles the same phenomenon in humans or other species of animal. ?醫(yī)學(xué)研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)象和相關(guān)材料。 血小板活性因子 (PAF)誘發(fā) ： 目前已知的唯一能引起氣道高反應(yīng)性炎癥介質(zhì)。 Ot