【正文】 即：遞氫體和遞電子體按一定順序排列所組成的鎖鏈。 細(xì)胞能量循環(huán)：即 ATP 循環(huán)， ATP 水解成 ADP，釋出自由能，驅(qū)動(dòng)需要自由能的吸能反應(yīng)， ADP 與 Pi又可利用營(yíng)養(yǎng)物經(jīng)生物氧化時(shí)產(chǎn)生的能量重新磷酸化為 ATP。參與遞氫， 參與生物氧化作用。 ③ 分子中含有較多的修飾成分，稀有堿基比例 10％左右。C之間 增色效應(yīng)： DNA變性后， A260值增加。這是通過(guò)不可逆的共價(jià)鍵的斷裂使無(wú)活性的胰蛋白酶原被激活為有活性的胰蛋白酶。 ?如何求 ?。 ―張力 ‖與 ―形變 ‖效應(yīng)：酶與底物結(jié)合，底物分子也會(huì)發(fā)生扭曲變形，使底物分子的某些鍵的鍵能減弱，產(chǎn)生鍵扭曲，降低了反應(yīng)活化能，激活形成過(guò)渡態(tài)。主要包括醛縮酶、水化酶（脫水酶）及脫氨酶等。 寡聚酶：兩個(gè)或兩個(gè)以上亞基以非共價(jià)鍵結(jié)合蛋白質(zhì)酶。 酶的最適溫度：酶活性最高時(shí)的溫度 ,也即酶促反應(yīng)速度最大時(shí)的溫度。 ④ 甘氨酸和亮氨酸： pH7． 0 甘氨酸、亮氨酸凈電荷接近零，亮氨酸非極性大，甘氨酸先洗脫。 以生物學(xué)功能專一性為依據(jù)：親和層析等 ，早期和晚期的分離純化方法有何不同 ? 分離純化流程中，早期和晚期分離純化方法的不同： ? 早期分離純化 :粗提取液（物質(zhì)成份復(fù)雜，物理化學(xué)性質(zhì)相近的物質(zhì)很多，目的產(chǎn)物濃度很?。?，所選方法要求快速、粗放；能較大地縮小體積；分辨力不必太高；負(fù)荷能力要大。 ?有什么生理意義 ? 可解離的基團(tuán)： N端氨基、 C端羧基、側(cè)鏈氨基、羧基、羥基、巰基、咪唑基、胍基等。的回折形成發(fā)夾形狀；一般四個(gè)氨基酸組成，常見(jiàn)氨基酸： Pro,Gly,Asp,Asn,Trp；第 1個(gè)氨基酸殘基的 C=O與第 4個(gè)殘基的 NH之間形成氫鍵。 酸水解法： 6mol/LHCl110℃ 加熱回流 16~24h,完全水解， Trp 被破壞， Gln,Asn酰胺基水解變成 Glu,Asp(Glx,Asx)近年來(lái)用甲基磺酸代替鹽酸。 超濾：利用 壓力或離心力使小分子溶質(zhì)通過(guò)半透膜而蛋白質(zhì)被截留在膜上而分離的一種技術(shù)。 蛋白質(zhì)四級(jí)結(jié)構(gòu)：蛋白質(zhì)分子內(nèi)非共價(jià)鍵連接的各自具有獨(dú)立三級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽亞基的種類、數(shù)量以及各個(gè)亞基在蛋白質(zhì)分子內(nèi)的空間排布和相互作用。 C端：多肽鏈具游離的羧基的一端。 蛋白質(zhì)的稀有氨基酸：非編碼 氨基酸，標(biāo)準(zhǔn)氨基酸的衍生物。 2．生物化學(xué)經(jīng)歷了哪幾個(gè)發(fā)展階段？各個(gè)時(shí)期研究的主要內(nèi)容是什么？試舉各時(shí)期一二例重大成就。 Sanger 反應(yīng)：堿性條件下氨基酸 αNH2 的 H 原子被 2,4二硝基氟苯的烴基二硝基苯基取代生成二硝基苯基氨基酸（黃色）的烴基化反應(yīng)。）旋轉(zhuǎn)的旋轉(zhuǎn)角度 φ角和 CaC 鍵在（－ 180176。 血紅蛋白：由四個(gè)三級(jí)結(jié)構(gòu)幾乎與肌紅蛋白相同的亞基（ α2β2）和四個(gè)血紅素輔基組成的 能結(jié)合氧并使氧從肺轉(zhuǎn)運(yùn)到外周組織的球狀寡聚蛋白。 凱氏定氮法： 100g樣品中蛋白質(zhì)含量 (g%)=每克樣品含氮克數(shù) 100 20種基本氨基酸的名稱 、結(jié)構(gòu)及縮寫(xiě)。 平行 (Parallel)： φ＝－ 119176。 ? 穩(wěn)定蛋白質(zhì)膠體系統(tǒng)的因素：分子表面的親水基團(tuán)與周圍水分子結(jié)合形成水化層 (水膜 )；分子表面的親水基團(tuán)可 結(jié)合或釋放 H+,帶一定電荷，水溶液中蛋白質(zhì)顆粒帶相同電荷。 ? 主要影響因素： 離子強(qiáng)度： ～ ～ ； pH值：避免過(guò)酸、過(guò)堿，一般 pH6～ 8，蛋白質(zhì)和酶穩(wěn)定的范圍內(nèi)，常偏離等電點(diǎn)的兩側(cè)； 溫度： 0℃ ～ 5℃ ，溫度耐受力強(qiáng)的蛋白質(zhì)和酶，可提高溫度使雜蛋白變性。 水份：水參加水解、酶解、水合和加合，加速氧化、聚合、離解和霉變。 CNBr 處理得到 ① Ala、 Gly、 Lys、 Thr； ② Gly、 Met、 Ser、 Tyr：（ Gly、 Ser、Tyr） –Met； ② 在 ① 前得（ Gly、 Ser、 Tyr） –Met–（ Ala、 Gly、 Lys、 Thr） 胰蛋白酶處理得到 ① Ala、 Gly； ② Gly、 Lys、 Met、 Ser、 Thr、 Tyr：（ Gly、 Met、Ser、 Thr、 Tyr） –Lys； ② 在 ① 前得（ Gly、 Met、 Ser、 Thr、 Tyr） –Lys–（ Ala、Gly） 糜蛋白酶處理得到 ① Gly、 Tyr； ② Ala、 Gly、 Lys、 Met、 Ser、 Thr： ① Gly–Tyr；① 在 ② 前得 Gly–Tyr–（ Ala、 Gly、 Lys、 Met、 Ser、 Thr） DNFB反應(yīng)可產(chǎn)生 DNPGly： N–末端為 Gly 與肼無(wú)水條件下加熱， Gly解離出來(lái)： C–末端為 Gly Gly–Tyr與（ Gly、 Ser、 Tyr） –Met：（ Gly–Tyr–Ser） –Met （ Gly、 Met、 Ser、 Thr、 Tyr） –Lys與 Gly–Tyr–Ser–Met：（ Gly–Tyr–Ser–Met–Thr）–Lys （ Gly、 Met、 Ser、 Thr、 Tyr） –Lys–（ Ala、 Gly）： Gly–Tyr–Ser–Met–Thr–Lys–（ Ala、 Gly） C–末端為 Gly： Gly–Tyr–Ser–Met–Thr–Lys–（ Ala–Gly） 該肽的氨基酸順序： Gly–Tyr–Ser–Met–Thr–Lys–Ala–Gly 酶化學(xué)習(xí)題 一 .名詞解釋 酶：生物活細(xì)胞產(chǎn)生的、具有催化能力的以蛋白質(zhì)為主要成分的生物催化劑 全酶：脫輔酶蛋白與輔因子金屬離子或有機(jī)小分子化合物結(jié)合形成的結(jié)合酶 輔酶：與酶蛋白以非共價(jià)鍵疏松結(jié)合 ,容易被透析或超濾法除去輔因子如 TPP、NAD 等。 Vmax減小，表觀 Km不變。 系統(tǒng)命名法：底物名稱（底物全部列出，用冒號(hào) :分隔） +反應(yīng)性質(zhì) +酶的命名法。鍵 (Bond)專一性：對(duì)于鍵兩端的基團(tuán)沒(méi)有嚴(yán)格的要求。 催化作用過(guò)程： ① 底物多肽鏈芳香族氨基酸羧基形成的肽鍵與酶活性中心結(jié)合② 敏感鍵羰基 C 定向接近催化三聯(lián)體 Asp102–His57–Ser195 的 Ser195 羥基 O③His57 奪走 Ser195 羥基 H， Ser195 羥基 O 親核攻擊敏感鍵羰基 C 形成帶氧陰離子 的四面體中間物（轉(zhuǎn)換態(tài)）。 最適溫度、最適 pH 不是酶的特征常數(shù)，會(huì)受到酶的濃度、底物以及緩沖液的種類等因素的影響。 查格夫法則（ Chargaff‘ srules）： 194650， Chargaff提出：在所有的 DNA中，A=T， G=C 即 A+G=T+C， 6氨基 =6酮基； DNA 的堿基組成具種特異性，即不同生物物種的 DNA具有自己獨(dú)特的堿基組成，但沒(méi)有組織和器官特異性。每 10個(gè)核苷酸形成一個(gè)螺旋，螺矩 。 二 .簡(jiǎn)答題 ?如何分類 ?長(zhǎng)期缺乏維生素會(huì)有哪些缺乏癥？ 特點(diǎn)：既不供給能量，也不構(gòu)成組織成分，參與體內(nèi)物質(zhì)代謝與調(diào)節(jié)；體內(nèi)不能合成或合成甚微，必須由食物供給；需要量很少 ，但不可缺少，長(zhǎng)期缺乏會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)維生素缺乏癥。 ?在代謝中有什么作用 ? 羧化酶 的輔酶，是羧基（ COO）的傳遞體，在 CO2固定反應(yīng)中起重要作用。主要產(chǎn)能階段，釋出約總能量的 2/3，大多以 ATP貯存。 煙酰胺脫氫酶類（ NAD+） ——NADH：還原型輔酶 連接三羧酸循環(huán)和呼 吸鏈， NAD+接受代謝產(chǎn)物脫下的氫得到還原型輔酶NADH——線粒體呼吸鏈主要電子供體之一，將氫交給黃素蛋白。另外蛋白質(zhì)的分解代謝中，氨基酸經(jīng)脫氨作用可生成氨。 ?在代謝中有什么作用 ? 維生素 B6。 mRNA的結(jié)構(gòu)有什么特點(diǎn) ? 真核：?jiǎn)雾樂(lè)醋印?5＇ 末端有 ―帽子 ‖、 3＇ 末端有 polyA片段和非編碼區(qū)。 ③ 堿基嚴(yán)格配對(duì)： AT（兩個(gè)氫鍵）； GC（三個(gè)氫鍵），兩條鏈互補(bǔ)。 (變構(gòu)酶 )有何特點(diǎn) ? 特點(diǎn)： ① 一般是寡聚酶； ② 具有別構(gòu)效應(yīng)； ③ v對(duì) [S]不呈直角雙曲線，是 S形曲線。 ③ pH穩(wěn)定性：在一定的 pH范圍內(nèi)酶是穩(wěn)定的。 多個(gè)基元催化形式協(xié)同作用。 ① 結(jié)構(gòu)專一性： 絕對(duì)專一性：只作用于一個(gè)特定的底物。酶只作用于某一種或某一類特定的底物；反應(yīng)條件溫和：常溫、常壓和接近中性酸堿度水溶液中進(jìn)行；酶易失活：使蛋白質(zhì)變性的因素（如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿高溫等）能使酶變性失去活性；酶活力可調(diào)節(jié)控制：酶 和代謝物的區(qū)域化分布；變構(gòu)調(diào)節(jié)、共價(jià)修飾調(diào)節(jié)和酶原激活；酶含量的調(diào)節(jié)（誘導(dǎo)、阻遏和降解）；激素調(diào)節(jié)等；某些酶催化活力與輔酶、輔基及金屬離子有關(guān)；酶促反應(yīng)無(wú)副反應(yīng)。 Vmax不變，表觀 Km增大。與肼無(wú)水條件下加熱， Gly解離出來(lái)。 ? 空氣：潮解、微生物污染和自動(dòng)氧化。 ⑦ 產(chǎn)物的濃縮，干燥和保存。 原膠原蛋白： 3 條左手螺旋多肽鏈相互纏繞形成右手超螺旋分子，長(zhǎng) 300nm，直徑為 ；靠鏈間氫鍵以及螺旋和超螺旋的反向盤(pán)繞維持超螺旋結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。上升 ；第 N個(gè)氨基酸殘基的羰基氧與第 N＋ 4個(gè)氨基酸殘基的氨基氫形成氫鍵，走向平行于螺旋軸； R側(cè)鏈基團(tuán)伸向螺旋的外側(cè)，其大小、形狀及電荷等影響此結(jié)構(gòu)形成。 二 .簡(jiǎn)答題 ? 生物學(xué)功能：生物催化 (酶 )；代謝調(diào)