【正文】 板（培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長(zhǎng)時(shí)，可破壞菌落周?chē)募t細(xì)胞，使其褪色．如圖為定性檢測(cè)鮮牛奶中是否存在金黃色葡萄球菌的操作流程，請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題． （ 1）用 % NaCl 肉湯培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)的主要目的是 增加 金黃色葡萄球菌的數(shù)量 ．按培養(yǎng)基功能分類(lèi)，血平板屬于 鑒別 培養(yǎng)基． （ 2）操作中在血平板上的接種方法是 平板劃線法或稀釋涂布平板法 ，接種操作前后需要對(duì)接種工具進(jìn)行 灼燒 滅菌． （ 3）多次規(guī)范操作、重復(fù)實(shí)驗(yàn)，血平板上均出現(xiàn) 周?chē)嬖谕该魅? 的菌落，初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌，但鮮牛奶供應(yīng)商仍認(rèn)為此菌并非鮮牛奶所攜帶，因此，需要對(duì)本次操作進(jìn)行完善，完善的方案是 設(shè)置不加鮮牛奶其他操作均相同的對(duì)照組 ． （ 4）按細(xì)胞結(jié)構(gòu)分類(lèi)，金黃色葡萄球菌屬于 原核 生物． 【考點(diǎn)】 I1：微生物的分離和培養(yǎng)． 【分 析】 培養(yǎng)基按功能分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基： ① 選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的不需要的微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要的微生物生長(zhǎng)，培養(yǎng)、分離出特定的微生物（如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽） ② 鑒別培養(yǎng)基：根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品，鑒別不同種類(lèi)的微生物，如可用伊紅﹣美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌（若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤） 無(wú)菌技術(shù)：消毒和滅菌 消毒 滅菌 概念 使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子） 使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子） 常用方法 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法 灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌 適用對(duì)象 操作空間、某些液體、雙手等 接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等 微生物常見(jiàn)的接種的方法 ① 平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫 箱里培養(yǎng)．在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌 落． ② 稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落． 【解答】 解：（ 1） %NaCl 溶液為高濃度的鹽溶液，其可以對(duì)微生物進(jìn)行選擇，而金黃色葡萄球菌是一種具有高度耐鹽性的微生物，其可以在高濃度的鹽溶液中生存下來(lái)．因此，用 % NaCl 肉湯培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)的主要目的是增加金黃色葡萄球菌的數(shù)量．根據(jù)題干信息 “金黃色葡萄球菌在血平板（培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長(zhǎng)時(shí)，可破壞菌落周?chē)募t細(xì)胞，使其褪色． ”可知，按培養(yǎng)基功能分類(lèi)，血平板屬于鑒別培養(yǎng)基． （ 2）使用 接種環(huán)進(jìn)行接種應(yīng)該只用平板劃線法；平板劃線法采用的接種工具是接種環(huán)，而稀釋涂布平板法采用的接種工具是涂布器，對(duì)這兩種接種工具的滅菌方法都是灼燒滅菌． （ 3）根據(jù)題意， “金黃色葡萄球菌在血平板（培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長(zhǎng)時(shí)，可破壞菌落周?chē)募t細(xì)胞，使其褪色 ”，所以如果經(jīng)多次規(guī)范操作、重復(fù)實(shí)驗(yàn)，血平板上均出現(xiàn)透明圈的菌落，說(shuō)明初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌；但這個(gè)實(shí)驗(yàn)要設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)，即設(shè)置不加鮮牛奶其他操作均相同的對(duì)照組． （ 4）如何判斷細(xì)菌：帶 “菌 ”字的生物中， “菌 ”字前有 “桿 ”“球 ”“弧 ”“螺旋 ”等表 示形態(tài)的字的都是細(xì)菌，如大腸桿菌、肺炎雙球菌、葡萄球菌、霍亂弧菌等都是細(xì)菌，葡萄球菌屬于細(xì)菌，屬于原核生物． 故答案為： （ 1）增加金黃色葡萄球菌的數(shù)量 鑒別 （ 2）平板劃線法或稀釋涂布平板法 灼燒 （ 3）周?chē)嬖谕该魅? 設(shè)置不加鮮牛奶其他操作均相同的對(duì)照組 （ 4）原核 【點(diǎn)評(píng)】 本題結(jié)合定性檢測(cè)鮮牛奶中是否存在金黃色葡萄球菌的操作流程圖，考查微生物的培養(yǎng)和鑒定、生物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的知識(shí)，考生識(shí)記微生物培養(yǎng)的過(guò)程、明確生物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的原則（單一變量原則和對(duì)照原則）是解題的關(guān)鍵． [生物 選修 3：現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題 ] 12．（ 2021?商丘三模）埃博拉病毒（ EBO）呈纖維狀， EBO 衣殼外有包膜，包膜上有 5 種蛋白棘突（ VP 系列蛋白和 GP 蛋白），其中 GP 蛋白最為關(guān)鍵，能被宿主細(xì)胞強(qiáng)烈識(shí)別． （ 1）以 EBO 病毒包膜蛋白作為疫苗比較安全，其原因是 蛋白質(zhì)不具侵染性，不會(huì)破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)（或失去了感染能力，但保留了抗原特性） ． （ 2）科研人員利用經(jīng) EBO 免疫后小鼠的 B 淋巴（效應(yīng) B 或漿） 細(xì)胞與鼠的瘤細(xì)胞進(jìn)行雜交，獲得純凈的單一品種抗體，其特點(diǎn)是 特異性強(qiáng)、靈敏度高、反應(yīng)快（產(chǎn)量大） ，可以用此抗 體與藥物制成 “生物導(dǎo)彈 ”，抗擊埃博拉病毒（ EBO）． （ 3）科研人員將 GP 蛋白基因通過(guò) 顯微注射法 （方法）導(dǎo)入牛受精卵中，可以通過(guò) 抗原﹣抗體雜交 技術(shù)從分子水平檢測(cè)轉(zhuǎn)基因是否培育成功．體內(nèi)受精作用進(jìn)行時(shí)防止多精入卵的機(jī)制有 透明帶反應(yīng) 和 卵細(xì)胞膜反應(yīng) ． （ 4）為了從分泌乳汁中生產(chǎn) GP 蛋白，在基因?qū)胧荏w細(xì)胞前，基因的首段必須含有使其僅能在牛的乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的 囊胚 ．早期胚胎在移植入受體母牛子宮之前，必須對(duì)胚胎進(jìn)行性別鑒定，一般是取處于 （乳腺蛋白基因）啟動(dòng)子 時(shí)期的 滋養(yǎng)層 細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)． 【考點(diǎn)】 Q2：基因工程的原理及技術(shù)； RH：?jiǎn)慰寺】贵w的制備過(guò)程； S5：胚胎移植． 【分析】 疫苗一般是減毒或無(wú)毒的抗原，具有抗原性，但不具有感染性． 單克隆抗體的制備過(guò)程： 優(yōu)點(diǎn)為：特異性強(qiáng)，靈敏度高，并可大量制備． 【解答】 解：（ 1）以 EBO 病毒包膜蛋白作為疫苗比較安全，其原因是蛋白質(zhì)不具侵染性，不會(huì)破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，但是具有抗原性． （ 2）經(jīng) EBO 免疫后小鼠體內(nèi)可獲取漿細(xì)胞，其與鼠的瘤細(xì)胞進(jìn)行雜交，獲得純凈的單一品種抗體，即單克隆抗體，其特點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高、反應(yīng)快（產(chǎn)量大）． （ 3）科研人員 將 GP 蛋白基因通過(guò)顯微注射法導(dǎo)入牛受精卵中，可以通過(guò)抗原﹣抗體雜交技術(shù)從分子水平檢測(cè)轉(zhuǎn)基因是否培育成功．體內(nèi)受精作用進(jìn)行時(shí)防止多精入卵的機(jī)制有透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)． （ 4）為了從分泌乳汁中生產(chǎn) GP 蛋白，在基因?qū)胧荏w細(xì)胞前，基因的首段必須含有使其僅能在牛的乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的（乳腺蛋白基因）啟動(dòng)子．早期胚胎在移植入受體母牛子宮之前，必須對(duì)胚胎進(jìn)行性別鑒定，一般是取處于囊胚時(shí)期的滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)． 故答案為： （ 1）蛋白質(zhì)不具侵染性，不會(huì)破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)（或失去了感染能力，但保留了抗原特性） （ 2） B 淋巴 （效應(yīng) B 或漿） 特異性強(qiáng)、靈敏度高、反應(yīng)快（產(chǎn)量大） （ 3）顯微注射法 抗原﹣抗體雜交 透明帶反應(yīng) 卵細(xì)胞膜反應(yīng) （ 4）（乳腺蛋白基因）啟動(dòng)子 囊胚 滋養(yǎng)層 【點(diǎn)評(píng)】 本題考查基因工程和細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作工具、操作步驟，掌握各步驟的相關(guān)細(xì)節(jié)；識(shí)記單克隆抗體的制備過(guò)程，能結(jié)合所學(xué)知識(shí)和題中信息準(zhǔn)確答題，綜合性較強(qiáng)，有一定難度．