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tunel染色檢測細胞凋亡(更新版)

2025-10-10 02:09上一頁面

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【正文】 的核酸水解酶的作用下降解為50300kb的大片段
。用蒸餾水洗3次,前兩次將載玻片提起放下10次,最后1次靜置30s。用濾紙小心吸去載玻片上組織周圍的多余液體,立即在切片上加2滴 TdT酶緩沖液,置室溫1~5min。用PBS洗兩次,每次5min。%甲基綠():;??沟馗咝恋奶禺愋钥贵w與脊椎動物甾體激素的交叉反應不到1%,若此抗體的Fc部分通過蛋白酶水解的方法除去后,則可完全排除細胞Fc受體非特異性的吸附作用。DNA雙鏈斷裂或只要一條鏈上出現(xiàn)缺口而產(chǎn)生的一系列DNA的3’OH末端可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT)的作用下,將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸化酶或生物素形成的衍生物標記到DNA的3’末端,從而可進行凋亡細胞的檢測,這類方法一般稱為脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的缺口末端標記法(TUNEL)。 依賴的核酸內(nèi)切酶作用下,在核小體單位之間被隨機切斷,形成180~200bp核小體DNA多聚體。在所有動物組織中幾乎不存在能與抗地高辛杭體結合的配體,因而非特異性反應很低。洗滌與終止反應緩沖液:氯化鈉 17. 4g;檸檬酸鈉 ;ddH2O 1000ml%二氨基聯(lián)苯(DAB)溶液:DAB 5mg;PBS 10ml,, 臨用前過濾后,%。(2)冰凍組織切片預處理:將冰凍組織切片置10%中性甲醛中,于室溫固定10min后,去除多余液體。用PBS洗兩次,每次5min。 于室溫用甲基綠進行復染1
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