【正文】 影響外植體的分化，最后變褐死亡的現(xiàn)象。 濕度 培養(yǎng)瓶內(nèi)相對濕度通常是 100%，而環(huán)境中的相對濕度會(huì)直接影響培養(yǎng)基的水分蒸發(fā)。 ? 馬鈴薯連續(xù)光照，葡萄要求短日照。 （ 4） 工具用后應(yīng)及時(shí)滅菌 ， 避免交叉污染 。 ? 幼穗、花蕾、花藥 ：飽和漂白粉上清液 1020分鐘 ? 莖段、莖尖 ： %升汞 510分鐘 ? 成熟胚： 次氯酸鈉 1530分 （活性氯 %）（＞ = % ） ? 厚種皮種子： %升汞 30分 60分，幻胚次氯酸鈉 90120分 升汞處理方法： 升汞＋ Na2S－－－絮狀沉淀（至絮狀沉淀不再產(chǎn)生為止）－－＋ FeSO4（中和過多的 Na2S ） ? 材料消毒前常用 70%酒精漂洗： 70%具較強(qiáng)穿透力和殺菌力，濕潤表面，驅(qū)盡茸毛間氣泡，使藥劑殺菌效果好。 接種時(shí)除去外部韌皮組織，只接內(nèi)部的分生組織。 ? 幼穗、花蕾、花藥 ：飽和漂白粉上清液 1020分鐘 ? 莖段、莖尖 ： %升汞 510分鐘 ? 成熟胚： 次氯酸鈉 1530分 （活性氯 %）（＞ = % ） ? 厚種皮種子： %升汞 30分 60分，幻胚次氯酸鈉 90120分 ? 表面活性劑，抽氣、攪拌或超聲振動(dòng)，使消毒劑與材料充分接觸。如特別不潔的外植體，可先用加有洗滌劑的水清洗 1015分鐘，再用流水沖洗干凈。胚胎培養(yǎng)或脫毒在 。 植株管理中應(yīng)注意： ⑴ 避免昆蟲危害 許多昆蟲如蚜蟲 、 螨類和飛虱是許多植物病蟲害的傳播媒介 ， 會(huì)引起植物組織的潛在感染 。一般情況下， 幼年組織比老年組織具有較高的形態(tài)發(fā)生能力 ，生理年齡越老的組織或器官，越接近發(fā)育上的成熟，其再生能力逐漸減弱甚至完全失去再生能力。 選取適宜的外植體；常用外植體有莖尖、莖段、節(jié)間、葉片、葉柄等。第三章 外植體選擇和滅菌 一般來說，無論何種類型的細(xì)胞工程技術(shù)，起始階段均涉及外植體取材、滅菌、接種與培養(yǎng)等基本過程。 ? 在選擇植物外植體進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí)，還要求 考慮待培養(yǎng)材料的來源是否有保證，是否容易成苗； 同時(shí)要考慮到該外植體，特別是經(jīng)過脫分化產(chǎn)生的愈傷組織， 是否會(huì)引起不良變異 ，喪失原品種的優(yōu)良性狀。 (四 )器官的生理狀態(tài)和發(fā)育年齡 1幼年組織具有較高的形態(tài)發(fā)生能力 作為外植體的器官，其生理狀態(tài)和發(fā)育年齡直接影響形態(tài)發(fā)生。 供體植株的管理 取自室外的外植體材料 ， 供體植株的管理十分重要 ， 這與外植體培養(yǎng)時(shí)的污染率密切相關(guān) 。 選取材料的大小一般在 。 預(yù)處理 先對植物材料進(jìn)行修剪整理，去掉不需要部分，將準(zhǔn)備使用的植物材料（外植體）在流水中沖洗 2060分鐘，備用。但時(shí)間太長會(huì)損傷材料。 晴天取材，下午取材，經(jīng)日曬過可殺死部分細(xì)菌或真菌。（選擇消毒劑，濃度、時(shí)間） 藥劑：能自動(dòng)分解成低毒性或容易除去的藥劑，如次氯酸鈉能分解成殺菌的氯氣，并易散失，是常用的，低濃度氯化汞效果好但難除；多次無菌水沖洗，用鑷子翻動(dòng)使藥液均勻。 （ 3） 迅速將切割分離下的所需組織 、 細(xì)胞 、器官 ， 放入培養(yǎng)基上 ， 及時(shí)蓋上瓶蓋 。除特殊要求外 ， 一般都采用日光燈作光源 ， 光照強(qiáng)度 10005000Lx， 根據(jù)不同植物或器官需要 ， 可以每天連續(xù)光照 1216小時(shí) 。 變溫處理對有些植物器官發(fā)生有促進(jìn)作用 ， 如豌豆 。維持適宜的氧氣和二氧化碳濃度，防止有害氣體的積累。 2 培養(yǎng)基 成分 培養(yǎng)基成分中的無機(jī)鹽、蔗糖濃度、激素水平等對褐變的程度的影響尤為重要。因此，初期培養(yǎng)要在黑暗或弱光下進(jìn)行。主要原因是： ⑴激素濃度 BA濃度提高，導(dǎo)致玻璃化苗的產(chǎn)生。 （ 4）增加 光照，包括 自然光照 10001800lx，控制光照時(shí)間 812h。 c. 外源 CTK與生長素必須維持適當(dāng)比例以改變內(nèi)源激素平衡，促進(jìn)器官