【正文】 毒素生成、細(xì)菌繁殖?！　?duì)肉制品加工廠，患局部化膿感染的禽、畜尸體應(yīng)除去病變部位，經(jīng)高溫或其他適當(dāng)方式處理后進(jìn)行加工生產(chǎn)?！　∧蜔岷怂崦冈囼?yàn)：將24小時(shí)肉湯培養(yǎng)物沸水浴處理15min，用接種環(huán)劃線刺種于甲苯胺蘭DNA平板，36177。C培養(yǎng)2448小時(shí)。腸毒素可耐受100176。此外，剩飯、油煎蛋、糯米糕及涼粉等引起的中毒事件也有報(bào)道。甲基紅反應(yīng)陽性，VP反應(yīng)弱陽性。金黃色葡萄球菌及檢驗(yàn)一、生物學(xué)特性　　典型的金黃色葡萄球菌為球型，顯微鏡下排列成葡萄串狀。③使用營養(yǎng)肉湯(蛋白胨水)進(jìn)行后增菌(4h)，使沙門氏菌的數(shù)量大大增加。采用微量滴定板作為固態(tài)基質(zhì)使反應(yīng)形式標(biāo)準(zhǔn)化，并促成其自動(dòng)化。由于沒有任何一種培養(yǎng)基可以全面地保持所有食品基質(zhì)或各種沙門氏菌血清型，所以，較適當(dāng)?shù)淖龇ň褪鞘褂脙煞N培養(yǎng)基平行地進(jìn)行試驗(yàn)。雖然這些方法本身證明是可靠的，但卻很費(fèi)力、耗時(shí)，需要4～7天才能完成。已知的腸道沙門氏菌有2000種之多，有幾種已經(jīng)在測(cè)序中，屆時(shí)大家彼此對(duì)照起來看，就更有意思了。美國人對(duì)這種病菌一點(diǎn)都不陌生，每年全國大約報(bào)告40000例沙門氏菌感染病例。科學(xué)家希望，這種單一的口味會(huì)使它比較容易對(duì)付，只要阻斷它感染人類的途徑，就有希望根除這種疾病。故測(cè)定vi抗體有助于對(duì)傷寒帶菌者的檢出。h抗原刺激機(jī)體主要產(chǎn)生lgg抗體。o抗原刺激機(jī)體主要產(chǎn)生lgm抗體。沙門氏菌抗原構(gòu)造與分類　　o抗原　　為脂多糖，性質(zhì)穩(wěn)定。其中與人體疾病有關(guān)的主要有甲組的副傷寒甲桿菌，乙組的副傷寒乙桿菌和鼠傷寒桿菌，丙組的副傷寒丙桿菌和豬霍亂桿菌，丁組的傷寒桿菌和腸炎桿菌等。放置培養(yǎng)物于培養(yǎng)容器內(nèi)并加蓋FDA印章封口，此培養(yǎng)物的記錄(以上E11)放在搬運(yùn)箱內(nèi)，但不要放在加蓋FDA印章的容器內(nèi)。如果上述試驗(yàn)仍為陰性，把該培養(yǎng)物定為無動(dòng)力菌株。并按下列原則對(duì)培養(yǎng)物進(jìn)行分類：a. 用商品化試劑盒擬定為沙門氏菌的培養(yǎng)物，若沙門氏菌菌體（O）血清學(xué)試驗(yàn)陽性與沙門氏菌鞭毛（H）血清學(xué)試驗(yàn)陽性的則報(bào)告為沙門氏菌。 9. 沙門氏菌屬的擬定性鑒定。陽性反應(yīng)：能生長，通常伴隨顏色由綠色變蘭色。絕大多數(shù)沙門氏菌VP試驗(yàn)陰性，即整個(gè)肉湯不呈粉紅至紅色變化。2h。b、 菌體(O)群試驗(yàn). 如有各群菌體（O）抗血清，包括Vi，代替沙門氏菌多價(jià)菌體（O）抗血清，按上述五，5a試驗(yàn)。這一區(qū)域的下部加1滴生理鹽水。4) 沙門氏菌血清學(xué)鞭毛（H）試驗(yàn)。因偶爾會(huì)出現(xiàn)未接種的丙二酸鹽肉湯在存放期間變蘭（陽性反應(yīng)），所以應(yīng)有未接種的丙二酸鹽肉湯管作對(duì)照。從24h色氨酸培養(yǎng)物移取3mm接種環(huán)一環(huán)轉(zhuǎn)種到KCN肉湯管中。大多數(shù)沙門氏菌呈陽性實(shí)驗(yàn)結(jié)果，表現(xiàn)為內(nèi)部發(fā)酵管中產(chǎn)氣和培養(yǎng)基變酸（黃色）。沙門氏菌因堿性反應(yīng)，則使整個(gè)培養(yǎng)基呈紫色。 SpicerEdwards血清試驗(yàn)用這個(gè)實(shí)驗(yàn)可代替多價(jià)H血清試驗(yàn)，也可用來對(duì)于多價(jià)H血清反應(yīng)不明顯的培養(yǎng)物的進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)。2小時(shí)（供次日試驗(yàn)用）。b、 可選的尿素酶試驗(yàn)（快速法）。2小時(shí)。在LIA中呈酸性底層反應(yīng)和在TSI中呈斜面堿性，底層酸性的培養(yǎng)物，均視為可疑的沙門氏菌分離物，應(yīng)進(jìn)一步做生化和血清學(xué)試驗(yàn)。2小時(shí)。如果經(jīng)48177。非典型的沙門氏菌菌落形態(tài):不存在典型的或可疑的沙門氏菌菌落時(shí)，按如下步驟檢驗(yàn)非典型的沙門氏菌菌落。2小時(shí)培養(yǎng)后的BS瓊脂上，則挑取2個(gè)或更多個(gè)典型菌落。菌落呈蘭綠至蘭色，帶或不帶黑色中心。 ，對(duì)于冷藏食品的前增菌和低水份食品的選擇性增菌(僅SC和TTB肉湯)方法。TTB肉湯在35177。℃（水浴、循環(huán)的、溫度可調(diào)）中培養(yǎng)24177。例如。2小時(shí)。用磁力攪拌器劇烈攪拌酶/肉湯混合物時(shí)，通過無菌玻璃漏斗迅速倒入25g待檢樣品。177。充分混勻，于室溫下靜置60分鐘。將瓶蓋旋松1/4轉(zhuǎn)后，將樣品混合物置35℃培養(yǎng)24177。如果混合物為粉狀，研磨過或已粉碎的，則不用攪拌。177。177。這些表面活性劑要使用最少的量，剛好產(chǎn)生氣泡。%亮綠水溶液，混勻，把瓶蓋松開約1/4圈置于35℃培養(yǎng)24177。無菌稱取25g樣品于滅菌的帶螺旋帽的廣口瓶或其它合適的容器內(nèi)，樣品的前增菌培養(yǎng)基用含K2SO4的TSB肉湯(1000mlTSB肉湯中加入5g K2SO4，%)，將K2SO4加入TSB肉湯中，分裝每瓶225ml，121℃高壓滅菌15min，滅菌后，無菌測(cè)定其容量。以下試驗(yàn)按D,111進(jìn)行。搖勻，用PH試紙測(cè)PH值，如果需糾正PH值，用無菌1N NaOH或1N 177。加入225ml無菌的乳糖肉湯均質(zhì)2分鐘。把瓶蓋松開約1/4圈，置于35℃培養(yǎng)24177。2h，按D111繼續(xù)。2h，按D111繼續(xù)。以下試驗(yàn)按D,111進(jìn)行。此溶液的配制如下：取8ml %的次氯酸鈉溶液和1gSDS加入992ml蒸餾水中溶解即可。小心地蓋緊瓶蓋，室溫靜置60177。根據(jù)樣品的組成成份不同，添加足夠的肉湯培養(yǎng)基保持1:9的比例，除非特殊說明，例如，蛙腿等不需準(zhǔn)確稱量檢測(cè)的樣品，需采用特殊的方法。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，用一種或幾種新的培養(yǎng)基來取代BAM中推薦的培養(yǎng)基是不理想的?？谙闾菢悠泛驮鼍鉁?：9的比例進(jìn)行混合，得到的混合物非常粘，不易被吸管吸出。第四個(gè)改變是蛋殼表面滅菌步驟的改變。2h和48177。 Applied NutritionBacteriological Analytical Manual April 2003 沙 門 氏 菌 檢 測(cè)FDA分析手冊(cè)(2003年3月)第5章章節(jié)內(nèi)容 簡介 設(shè)備和材料 培養(yǎng)基和試劑 樣品的制備 沙門氏菌的分離培養(yǎng) 沙門氏菌的鑒定 快速檢測(cè)方法(附錄1) 參考文獻(xiàn)簡介在第8版的BAM手冊(cè)中，沙門氏菌的檢測(cè)方法有了幾個(gè)改變。除口香糖外的所有食品，RV培養(yǎng)基替代了SC培養(yǎng)基。對(duì)193個(gè)LIA斜面進(jìn)行試驗(yàn)，培養(yǎng)24177。在新版的手冊(cè)（BAM7）中，%SDS的次氯酸鈉溶液(含Cl200PPM)中30分鐘。從選擇性平板上挑菌落說明更明白和科學(xué)。2℃ 冰箱：4177。如果冷凍樣品必須軟化來獲得待檢部分，盡可能縮短解凍的時(shí)間，使竟?fàn)幘荷L最少，并減小對(duì)沙門氏菌的損傷。把瓶蓋松開約1/4圈，置于35℃培養(yǎng)24177。無菌稱取25g于無菌的三角瓶中或其它合適的容器內(nèi)，加入225ml含硫酸鐵的TSB肉湯(1L TSB中加入35mg硫酸鐵)，混勻，室溫靜置60177。c、 煮硬的蛋（雞蛋、鴨蛋或其他種類的蛋）。全脂奶粉。5min，旋松塞子，不需混勻和調(diào)整PH，35℃培養(yǎng)24177。豆粉。振蕩混勻，用PH試紙測(cè)PH值，如果需糾正PH值，用無菌1N NaOH或1N 177。以下試驗(yàn)按D,111進(jìn)行。搖勻，用PH試紙測(cè)PH值，如果需糾正PH值，用無菌1N NaOH或1N 177。將它們稀釋至無毒的程度后，再進(jìn)行檢測(cè)。1椰子無菌操作稱取25g樣品于滅菌帶螺旋帽的廣口瓶中(500ml)或其它合適的容器內(nèi)，蓋緊瓶塞，室溫下靜置60177。2h。以下試驗(yàn)按D,311進(jìn)行。以下試驗(yàn)按D,111進(jìn)行。177。1田雞腿（此方法用于國內(nèi)的和國外的所有田雞腿檢驗(yàn)）將15對(duì)田雞腿放入滅菌塑料袋內(nèi)，并用滅菌乳糖肉湯浸沒，其比例樣品比乳糖肉湯為1:9(見以上A，2324)。2小時(shí)。接下去按下面D，111進(jìn)行。2小時(shí)。蓋緊瓶蓋在室溫下靜置60分鐘。接下來的試驗(yàn)按D,111進(jìn)行?！妫ㄋ　⒀h(huán)的、溫度可調(diào)）中培養(yǎng)24177?？谙闾牵篠C和TTB肉湯在35℃培養(yǎng)24177。2小時(shí)。許多沙門氏菌培養(yǎng)物可有大的光澤黑色中心或呈幾乎全部黑色的菌落。2小時(shí)。2小時(shí)培養(yǎng)后，沒有典型的沙門氏菌菌落，則挑取2個(gè)或更多個(gè)非典型的沙門氏菌菌落。 用滅菌接種針輕輕地接觸每個(gè)菌落中心部位，接種TSI斜面，先在斜面上劃線，再于底層穿刺。在LIA瓊脂中，典型的沙門氏菌培養(yǎng)物其試管底層呈堿性（紫色）反應(yīng)。如果TSI中培養(yǎng)物沒有呈現(xiàn)沙門氏菌的典型反應(yīng)（斜面堿性，底層酸性），再從未擬定陽性的選擇性平板上另外挑取可疑菌落，象上面四，8節(jié)所述的接種TSI和LIA斜面。沙門氏菌菌落有時(shí)可使培養(yǎng)基中其它細(xì)菌所造成的膽鹽沉淀區(qū)透明。棄去所有呈陽性結(jié)果的培養(yǎng)物，保留所有陰性反應(yīng)的（培養(yǎng)基不變色）培養(yǎng)物，為進(jìn)一步研究試驗(yàn)用。制成鹽水對(duì)照，將各混合物于4850℃水浴培養(yǎng)，每隔15分鐘觀察一次初步結(jié)果，并于1小時(shí)讀數(shù)最終結(jié)果。如果所做的LIA試驗(yàn)是滿意的，則不需重復(fù)試驗(yàn)。b、 %衛(wèi)茅醇的紫色肉湯基礎(chǔ)液。整個(gè)培養(yǎng)基呈紅色（有酚紅指示劑）或紫色（有溴甲酚紫指示劑）。2小時(shí)，但24h后觀察反應(yīng)。大多數(shù)沙門氏菌培養(yǎng)物在此肉湯中為陰性反應(yīng)（綠色或不變色）。 沙門氏菌血清學(xué)菌體（O）試驗(yàn)。在另一區(qū)域內(nèi)菌懸液和抗血清液混合。如在25g分析樣品中有一個(gè)TSI培養(yǎng)物被劃為沙門氏菌，則該25g分析樣品的其他TSI培養(yǎng)物就無需進(jìn)一步試驗(yàn)。只要產(chǎn)酸就視為陽性反應(yīng)。2h。明顯的黃色為陰性結(jié)果。培養(yǎng)物的分類：沙門氏菌培養(yǎng)物應(yīng)具有表1反應(yīng)模式。生化學(xué)商品試劑盒不能用來代替血清學(xué)試驗(yàn)（1）。10. 鞭毛（H）試驗(yàn)陰性培養(yǎng)物的處理：對(duì)一些生化反應(yīng)典型，被認(rèn)為是沙門氏菌，但鞭毛（H）試驗(yàn)陰性的培養(yǎng)物，可能是無動(dòng)力的菌株，或鞭毛抗原發(fā)育不充分，對(duì)此培養(yǎng)物的動(dòng)力測(cè)定方法如下：從TSI斜面上挑取少量的培養(yǎng)物，接種于動(dòng)力試驗(yàn)培養(yǎng)基平板中，在距平板邊緣10mm處一次穿刺23mm深，不要刺到平板底或接種到其他任何部位。除非另有說明，每個(gè)檢驗(yàn)樣品要遞送1個(gè)分離物。對(duì)于提交的樣品需保留一份拷貝。它們除可感染人外，還可感染很多動(dòng)物包括哺乳類、鳥、爬行類、魚、兩棲類及昆蟲。例如乙型副傷寒桿菌有12三個(gè)。h抗原的特異性取決于多肽鏈上氨基酸的排列順序和空間構(gòu)型。不穩(wěn)定，經(jīng)60℃加熱、石碳酸處理或人工傳代培養(yǎng)易破壞或丟失。不過，它們的行為大不相同，基因序列也沒有那么像。危害及影響　　夏天正是新鮮蔬果搶閘上市的時(shí)節(jié)，而在大洋彼岸的美國，這個(gè)夏天卻有不少人因生吃西紅柿被“絆倒”了——據(jù)最近統(tǒng)計(jì)，目前，美國已有30個(gè)州幾百人因生食了從墨西哥進(jìn)口的帶有沙門氏菌的新鮮西紅柿而中毒，患者中至少48人因病情嚴(yán)重住院，其中１人死亡，而“生食療法”被視為一種健康的時(shí)尚，如今聽說生吃蔬果也會(huì)中毒，不少人十分著急：到底該如何預(yù)防？對(duì)此，專家指出，并不是所有的蔬果都越鮮吃越好，其實(shí)生吃蔬果有不少講究，有些菜涼拌前一定要用開水焯一下，徹底除塵去蟲更衛(wèi)生。對(duì)此，周福生教授解釋說，這可能是西紅柿在生長的過程中，由于空氣中紫外線不夠強(qiáng)烈，植物在灌溉過程或因土壤中含有沙門氏菌，這樣才使西紅柿的表皮上沾染了沙門氏菌，加上不少人有生食西紅柿的習(xí)慣，如果沒有清洗干凈，就完全有可能發(fā)生沙門氏菌感染。但至少有三個(gè)因素限制了用于臨床病料的方法應(yīng)用在食品分析上?！　鹘y(tǒng)的培養(yǎng)方法　　用于沙門氏菌分析的傳統(tǒng)方法是食物樣品分步增菌，以增加病原的可檢出率，這種培養(yǎng)方法總體可分4個(gè)不同階段或步驟?！　∫钥贵w為基礎(chǔ)的檢測(cè)方法　　利用抗原抗體反應(yīng)的顯著特異性，來進(jìn)行細(xì)菌的鑒別和血清學(xué)定型，已有半個(gè)多世紀(jì)的歷史。食物樣品經(jīng)適當(dāng)?shù)脑鼍幚?，也可用此法進(jìn)行沙門氏菌檢測(cè)。相比之下，黎兆滾等人的方法可在27h內(nèi)完成，比上述方法縮短了一半的時(shí)間，頗值得推廣應(yīng)用。C，最適生長pH 。　　金黃色葡萄球菌在自然界中無處不在，空氣、水、灰塵及人和動(dòng)物的排泄物中都可找到?！　∧c毒素形成條件：　　存放溫度，在37176。此外，金黃色葡萄球菌還產(chǎn)生溶表皮素、明膠酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等?！　∪旧^察：從平板上挑取可疑性菌落進(jìn)行革蘭氏染色，金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽性，顯微鏡下呈葡萄狀排列無芽胞、莢膜。本試驗(yàn)金黃色葡萄球菌