【正文】 A—DNA雜交分子，然后逆轉(zhuǎn)酶發(fā)揮 RNA水解酶活性，水解雜交分子中的RNA鏈，最后以新合成的DNA鏈()為模板，合成另一條 DNA鏈(+)，形成雙鏈DNA分子(為病毒)整合到寄主基因組中，隨寄主細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)生病毒 RNA(+)，此RNA可翻譯病毒蛋白質(zhì)，可作為后代病毒RNA。以E．coli為例，DNA復(fù)制過程分三個(gè)階段；①起始：從DNA上控制復(fù)制起始的序列即起始點(diǎn)開始復(fù)制，形成復(fù)制叉，復(fù)制方向多為雙向，也可以是單向，若以雙向進(jìn)行復(fù)制，兩個(gè)方向的復(fù)制速度不一定相同。→3’，這一過程叫RNA復(fù)制。30．不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄(asymmetric transcription)：因?yàn)镽NA的轉(zhuǎn)錄只在DNA的任一條鏈上進(jìn)行，所以把RNA的合成叫做不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄。SOS反應(yīng)主要包括兩個(gè)方面：DNA損傷修復(fù)(SOS修復(fù)或稱誘導(dǎo)修復(fù))和誘變效應(yīng)。17．點(diǎn)突變(Point mutation)：是指一個(gè)或幾個(gè)堿基對(duì)被置換(replacement)，這種置換又分兩種形式：轉(zhuǎn)換(transition)一指用一個(gè)嘌呤堿置換另一個(gè)嘌呤堿，一個(gè)嘧啶堿置換另一個(gè)嘧啶堿；顛換(transversion)一指用嘌呤堿置換嘧啶堿或用嘧啶堿置換嘌呤堿。13．半不連續(xù)復(fù)制(Semidiscontinuous replication)：在DNA復(fù)制過程中，一條鏈的合成是連續(xù)的，另一條鏈的合成是不連續(xù)的，所以叫做半不連續(xù)復(fù)制。8．引物酶及引發(fā)體(primase ＆ primosome)：以DNA為模板，以核糖核苷酸為底物，在DNA合成中，催化形成RNA引物的酶稱為引物酶及引物體。DNA聚合酶是多功能酶，除具有聚合作用外，還具有其它功能，不同DNA聚合酶所具有的功能不同。( √ )13．構(gòu)成密碼子和反密碼子的堿基都只是A、U、C、G。( )5．線粒體和葉綠體的核糖體的亞基組成與原核生物類似。 ①氨基酸分子的活化 ②70S起始復(fù)合物的形成 ③氨酰tRNA進(jìn)入核糖體A位 ④肽鍵形成 ⑤核糖體移位17．原核生物的肽鏈延伸過程有下列哪些物質(zhì)參與( ①②③⑤ )。 ①將一個(gè)氨基酸連接到另一個(gè)氨基酸上 ②把氨基酸帶到mRNA位置上 ③將mRNA接到核糖體上 ④增加氨基酸的有效濃度8．關(guān)于核糖體的移位，敘述正確的是( ③ )。蛋白質(zhì)中可進(jìn)行磷酸化修飾的氨基酸殘基主要為_____Ser______、____Thr_______、___Tyr_______。7．氨酰tRNA合成酶對(duì)___氨基酸_______和相應(yīng)的__tRNA______有高度的選擇性。（1）.起始Met不需甲酰化；（2）.無SD序列，但需要一個(gè)掃描過程；（3）.tRNA先于mRNA與核糖體小亞基結(jié)合；（4）.起始因子比較多；（5）.只一個(gè)終止釋放因子。配對(duì)（莖環(huán)結(jié)構(gòu)）（同左）對(duì)于具有四級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)，其亞基可以由一個(gè)基因編碼的相同肽鏈組成，也可以由不同肽鏈組成，不同肽鏈可以通過一條肽鏈加工剪切形成，或由幾個(gè)不同單順反子mRNA翻譯，或由多順反子mRNA翻譯合成。首先氨酰tRNA結(jié)合到核糖體的A位，然后，由肽酰轉(zhuǎn)移酶催化與P位的起始氨基酸或肽?；纬呻逆I，tRNAf或空載tRNA仍留在P位．最后核糖體沿mRNA5’→3’方向移動(dòng)一個(gè)密碼子距離，A位上的延長(zhǎng)一個(gè)氨基酸單位的肽酰tRNA轉(zhuǎn)移到P位，全部過程需延伸因子EFTu、EFTs，能量由GTP提供。(1)二位點(diǎn)模型 A位：氨酰tRNA進(jìn)入并結(jié)合的部位；P位：起始氨酰tRNA或正在延伸的肽基tRNA結(jié)合部位，也是無載的tRNA從核糖體上離開的部位。 (4)變偶假說：密碼的專一性主要由頭兩位堿基決定，第三位堿基重要性不大，因此在與反密碼子的相互作用中具有一定的靈活性。8．反密碼子(anticodon)：指tRNA反密碼子環(huán)中的三個(gè)核苷酸的序列，在蛋白質(zhì)合成過程中通過堿基配對(duì)，識(shí)別并結(jié)合到mRNA的特殊密碼上。向胚胎干細(xì)胞導(dǎo)入外源基因，然后植入到待孕雌鼠子宮，發(fā)育成幼鼠，雜交獲得純合鼠。但不能區(qū)分是否已重組。②CAP還能抑制RNA聚合酶與DNA中其它位點(diǎn)的結(jié)合，從而提高與其特定啟動(dòng)子結(jié)合的概率。根據(jù)這一方法，就可得到一組以ddNTP結(jié)尾的長(zhǎng)短不一的DNA片段。 5．雜交瘤細(xì)胞系的產(chǎn)生與篩選？脾B細(xì)胞+骨髓瘤細(xì)胞，加聚乙二醇（PEG）促進(jìn)細(xì)胞融合，HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)（內(nèi)含次黃嘌呤、氨基蝶呤、T）生長(zhǎng)出來的脾B骨髓瘤融合細(xì)胞繼續(xù)擴(kuò)大培養(yǎng)。26．轉(zhuǎn)基因動(dòng)物常用的方法有：（逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法）、（DNA顯微注射法）、（胚胎干細(xì)胞法 ）。23．限制性內(nèi)切酶的切割方式有三種類型分別是（在對(duì)稱軸539。1轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的基本過程通常包括：①將克隆的外源基因?qū)氲揭粋€(gè)受精卵或胚胎干細(xì)胞的細(xì)胞核中；②接種后的受精卵或胚胎干細(xì)胞移植到雌性的子宮；③完成胚胎發(fā)育，生長(zhǎng)為后代并帶有外源基因；④利用這些能產(chǎn)生外源蛋白的動(dòng)物作為種畜，培育新的純合系。典型的DNA重組實(shí)驗(yàn)通常包含以下幾個(gè)步驟：①提取供體生物的目的基因（或稱外源基因），酶接連接到另一DNA分子上（克隆載體），形成一個(gè)新的重組DNA分子。8．hnRNA與mRNA之間的差別主要有兩點(diǎn)：（ hnRNA在轉(zhuǎn)變?yōu)閙RNA的過程中經(jīng)過剪接，）、（ mRNA的5′末端被加上一個(gè)m7pGppp帽子，在mRNA3′末端多了一個(gè)多聚腺苷酸(polyA)尾巴）。20．融合蛋白：真核蛋白的基因與外源基因連接，同時(shí)表達(dá)翻譯出的原基因蛋白與外源蛋白結(jié)合在一起所組成的蛋白質(zhì)。14．單克隆抗體：只針對(duì)單一抗原決定簇起作用的抗體。7．模體：蛋白質(zhì)分子空間結(jié)構(gòu)中存在著某些立體形狀和拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)頗為類似的局部區(qū)域8．信號(hào)肽：在蛋白質(zhì)合成過程中N端有15~36個(gè)氨基酸殘基的肽段，引導(dǎo)蛋白質(zhì)的跨膜。2．標(biāo)準(zhǔn)折疊單位：蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)單元α－螺旋與β－折疊通過各種連接多肽可以組成特殊幾何排列的結(jié)構(gòu)塊，此種確定的折疊類型通常稱為超二級(jí)結(jié)構(gòu)。產(chǎn)生這一應(yīng)急反應(yīng)的信號(hào)是鳥苷四磷酸(ppGpp)和鳥苷五磷酸（pppGpp）。當(dāng)外源DNA插入后，LacZ基因不能表達(dá)，菌株呈白色，以此來篩選重組細(xì)菌。3．原核生物中有三種起始因子分別是（IF1）、（ IF2 ）和（IF3 ）。 11．半乳糖對(duì)細(xì)菌有雙重作用；一方面（可以作為碳源供細(xì)胞生長(zhǎng) ）；另一方面（它又是細(xì)胞壁的成分 ）。④對(duì)含有重組DNA的細(xì)胞進(jìn)行大量培養(yǎng)，檢測(cè)外援基因是否表達(dá)。19．目前對(duì)昆蟲病毒的基因工程改造主要集中于桿狀病毒，表現(xiàn)在引入（外源毒蛋白基因 ）；（ 擾亂昆蟲正常生活周期的基因 ）；（ 對(duì)病毒基因進(jìn)行修飾 ）。 側(cè)切割產(chǎn)生339。 c、縮短長(zhǎng)度，切去不必要的片段，提高導(dǎo)入效率，增加裝載量。氨基蝶呤對(duì)葉酸還原酶有抑制作用，因此不能生長(zhǎng)。當(dāng)大腸桿菌生長(zhǎng)在缺乏葡萄糖的培養(yǎng)基中時(shí)，CAP合成量增加，CAP具有激活乳糖（Lac）等啟動(dòng)子的功能。 c、對(duì)那些吸收了重組DNA的受體細(xì)胞進(jìn)行篩選和鑒定。當(dāng)外源DNA插入后，LacZ基因不能表達(dá)，菌株呈白色，以此來篩選重組細(xì)菌。3．密碼的簡(jiǎn)并性(degeneracy)：—個(gè)氨基酸具有兩個(gè)以上密碼子的現(xiàn)象。2．遺傳密碼是如何破譯的?提示：三個(gè)突破性工作 (1)體外翻譯系統(tǒng)的建立；(2)核糖體結(jié)合技術(shù)；(3)核酸的人工合成。4．簡(jiǎn)述三種RNA在蛋白質(zhì)生物合成中的作用。 ， (2)轉(zhuǎn)移 在合成酶催化下將氨基酸從氨基酸—AMP—酶復(fù)合物上轉(zhuǎn)移到相應(yīng)的tRNA上，形成氨酰tRNA。9．原核細(xì)胞和真核細(xì)胞在合成蛋白質(zhì)的起始過程有什么區(qū)別。13.提示：有關(guān)氨基酸的簡(jiǎn)并密碼分別為14. 試列表比較核酸與蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)。RNA空間構(gòu)象2．生物界共有_____64____個(gè)密碼子，其中____61___個(gè)為氨基酸編碼，起始密碼子為___AUG ______；終止密碼子為___ UAA _、___ UAG _、__ UGA___。l0．每形成一個(gè)肽鍵要消耗____4____個(gè)高能磷酸鍵，但在合成起始時(shí)還需多消耗____1____個(gè)高能磷酸鍵。 ①線粒體 ②葉綠體 ③高爾基體 ④核糖體3．真核生物的延伸因子是( ④ )。 ①已達(dá)到mRNA分子的盡頭 ②具有特異的tRNA識(shí)別終止密碼子 ③終止密碼子本身具有酯酶作用，可水解肽酰與tRNA之是的酯鍵 ④終止密碼子被終止因子(RF)所識(shí)別11．蛋白質(zhì)生物合成中的終止密碼是( ①④⑤ )。在研究蛋白合成中,可利用嘌呤霉素,這是因?yàn)樗? ( ② )①使大小亞基解聚　 ②使肽鏈提前釋放 ③抑制氨基酰tRNA合成酶活性　 ④防止多核糖體形成 ⑤以上都正確20.( √ )8．在大腸桿菌中，一種氨基酸只對(duì)應(yīng)于一種氨酰tRNA合成酶。( )16. ，DnaA與復(fù)制起始區(qū)DNA結(jié)合，決定復(fù)制的起始。6．單鏈DNA結(jié)合蛋白(singlestrand 10．復(fù)制眼θ結(jié)構(gòu)：在一段DNA上，正在復(fù)制的部分形成眼狀結(jié)構(gòu)。 Temin(1960)首次從勞氏肉瘤病毒中發(fā)現(xiàn)。20．修復(fù)(repair)：除去DNA上的損傷，恢復(fù)DNA的正常結(jié)構(gòu)和功能是生物機(jī)體的一種保護(hù)功能。25．DNA重組(rebination)：DNA重組是指在真核生物減數(shù)分裂過程中，細(xì)菌細(xì)胞的轉(zhuǎn)化中、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)中等發(fā)生的DNA片段的交換或插入。33．內(nèi)含子(intron)：真核生物基因中，不為蛋白質(zhì)編碼的、在mRNA加工過程中消失的DNA序列，稱內(nèi)含子。2．描述大腸桿菌DNA聚合酶I在DNA生物合成過程中的作用?？蛇B續(xù)進(jìn)行，以親代5’→3’鏈為模板時(shí)，子鏈不能以3’→5’方向合成，而是先合成出許多5’→3’方向的岡崎片段，然后連接起來形成一條子鏈；③終止：當(dāng)一個(gè)岡崎片段的339。6．簡(jiǎn)述基因工程的基本操作步驟及其應(yīng)用意義。常染色質(zhì)DNA復(fù)制端粒DNA復(fù)制酶DNA 聚合酶等一些復(fù)制必須酶端粒酶（逆轉(zhuǎn)錄酶）模板常染色質(zhì)DNARNA時(shí)間最先最后生物學(xué)功能確保遺傳信息傳代完成線性染色體末端復(fù)制，防止遺傳信息的丟失9. 將大腸桿菌從37度轉(zhuǎn)移到42度時(shí)，其基因表達(dá)如何變化？其基因表達(dá)的變化為：細(xì)胞基因特異性表達(dá)是細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境變化的重要方式，且轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控是重要一環(huán)。用蛋白水解酶作用DNA聚合酶I，可將其分為大、小兩個(gè)片段，其中__大_____片段叫Klenow片段，具有__5’→3’聚合酶作用_____和___3’→5’外切酶____作用，另外一個(gè)片段具有__5’→3’外切酶 _____活性。8．DNA連接酶只能催化__雙_____鏈DNA中的缺口形成3’,5’ 磷酸二酯鍵，不能催化兩條 游離的單鏈 間形成3’,5’ 磷酸二酯鍵，真核生物DNA連接酶以___ ATP ____作為能源，大腸桿菌則以 NAD+ 作為能源，DNA連接酶在DNA_復(fù)制_____、___修復(fù)_____、___重組____中起作用。16．用于RNA生物合成的DNA模板鏈稱為___反意義鏈____或____負(fù)鏈___。23．RNA聚合酶中能識(shí)別DNA模板上特定起始信號(hào)序列的亞基是__因子__ ，該序列部位稱__啟動(dòng)子部位_。 ①只有存在DNA時(shí)，RNA聚合酶才能催化磷酸二酯鍵的形成。 ①引導(dǎo)合成岡奇片段 ②作為合成岡奇片段的模板 ③為DNA合成原料dNTP提供附著點(diǎn) ④激活DNA聚合酶 8．下列關(guān)于單鏈結(jié)合蛋白的描述哪個(gè)是錯(cuò)誤的( ④ )。 ①它們的壽命比大多數(shù)細(xì)胞液的RNA為短 ②在3’端有一個(gè)多聚腺苷酸(polyA)長(zhǎng)尾，是由DNA編碼的 ③它們存在于細(xì)胞核的核仁外周部分 ④鏈內(nèi)核苷酸不發(fā)生甲基化反應(yīng) ⑤有大約四分之三成份將被切除棹，以形成mRNA16．DNA復(fù)制的精確性遠(yuǎn)高于RNA的合成，這是因?yàn)? ②④ )。①α ②σ ③β ④β’ ⑤δ22．RNA生物合成的終止需要以下哪些成分( ①② )。④回文順序 ⑤以上都正確? ( ⑤ )①DNA的修復(fù)作用 ( )6．在DNA合成終止階段由DNA聚合酶Ⅱ切除引物。( √ )14．RNA不能做為遺傳物質(zhì)。15 / 15